前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇細(xì)胞生物學(xué)研究范文，相信會(huì)為您的寫作帶來(lái)幫助，發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。

細(xì)胞生物學(xué)研究范文第1篇

以前我國(guó)的學(xué)校進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的方法是：老師將實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)操作、注意事項(xiàng)在實(shí)驗(yàn)之前全部告訴學(xué)生，學(xué)生在老師設(shè)置的要求里用心完成課堂實(shí)驗(yàn)，造成學(xué)生在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，對(duì)老師的指導(dǎo)形成了嚴(yán)重的依賴性，缺乏創(chuàng)新意識(shí)，不利于學(xué)生未來(lái)實(shí)踐能力的培養(yǎng)。鑒于這種情況，我國(guó)開始改變實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式，在保證學(xué)生生命安全的條件下，盡可能的將實(shí)驗(yàn)變成開放性實(shí)驗(yàn)，增強(qiáng)學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的自主性，學(xué)生根據(jù)自己的設(shè)想，用一定的實(shí)驗(yàn)方法去驗(yàn)證自己設(shè)想的可行性，老師的任務(wù)是現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督實(shí)驗(yàn)的安全性，對(duì)一些存在安全隱患的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行制止，并在實(shí)驗(yàn)快要結(jié)束的時(shí)候，將課本上的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行講解，并鼓勵(lì)學(xué)生無(wú)論設(shè)想是否正確都要積極去做，科學(xué)的路上本來(lái)就充滿挫折，失敗是很正常的，使學(xué)生更加愿意按照自己的設(shè)想去做實(shí)驗(yàn)，久而久之增強(qiáng)了學(xué)生的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力和創(chuàng)新能力，從長(zhǎng)遠(yuǎn)來(lái)看必將推動(dòng)我國(guó)甚至世界生物科學(xué)的發(fā)展。

2.及時(shí)的更換實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。

科學(xué)技術(shù)在不斷的進(jìn)步，生物科學(xué)也不例外。在生物學(xué)實(shí)踐教學(xué)的路上必須不斷豐富實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，及時(shí)的讓學(xué)生學(xué)習(xí)到世界先進(jìn)的研究成果或者優(yōu)良的研究方法。學(xué)?？梢愿鶕?jù)本校學(xué)生的實(shí)際情況，適當(dāng)增加實(shí)驗(yàn)的難度，在安排實(shí)驗(yàn)的時(shí)候盡量多一些創(chuàng)新性的實(shí)驗(yàn)減少驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)的比例，因?yàn)橄鄬?duì)應(yīng)于驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，創(chuàng)新性的實(shí)驗(yàn)更加有利于培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力和生物研發(fā)能力，創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)提前不知道實(shí)驗(yàn)結(jié)果，學(xué)生帶著問(wèn)題和好奇去做實(shí)驗(yàn)，而驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)學(xué)生在做實(shí)驗(yàn)之前就已經(jīng)知道了本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，只是通過(guò)一定的方法驗(yàn)證結(jié)論即可，此外創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不唯一，有利于培養(yǎng)學(xué)生的發(fā)散思維，根據(jù)自己對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的不同理解，從不同的角度得出不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)是一個(gè)實(shí)踐性的教學(xué)，更改實(shí)驗(yàn)內(nèi)容光從改變這些實(shí)驗(yàn)的理論是不夠的，還必須要求實(shí)驗(yàn)硬件的配合，增加在實(shí)驗(yàn)方面的投資，購(gòu)買一些先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備，聘請(qǐng)一些國(guó)內(nèi)外知名的生物學(xué)教授來(lái)學(xué)校進(jìn)行教師的培訓(xùn)或者辦學(xué)生講座，軟件和硬件雙管齊下才能達(dá)到更換實(shí)驗(yàn)內(nèi)容目標(biāo)，最終提高基于實(shí)踐的細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)效果。

3.老師根據(jù)學(xué)?，F(xiàn)有的物質(zhì)條件，合理的安排實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。

雖然我們?cè)诩?xì)胞生物學(xué)的教學(xué)過(guò)程中，大力支持和發(fā)揚(yáng)實(shí)踐教學(xué)，也就是將課堂做生物實(shí)驗(yàn)作為教學(xué)的主要形式，學(xué)生通過(guò)做實(shí)驗(yàn)，將理論與實(shí)踐結(jié)合起來(lái)，并從中鍛煉自己實(shí)際解決問(wèn)題的能力，甚至創(chuàng)造出一些科技成果來(lái)，但是，我們也不能盲目的追求實(shí)驗(yàn)教學(xué)，因?yàn)榇蠖鄶?shù)實(shí)驗(yàn)尤其是生物實(shí)驗(yàn)需要非常先進(jìn)的設(shè)備，有的還需要珍貴的材料做實(shí)驗(yàn)標(biāo)本，這會(huì)無(wú)形之中提高學(xué)校的教學(xué)成本，不利于學(xué)校的可持續(xù)發(fā)展，所以，必須將實(shí)踐教學(xué)與學(xué)校的實(shí)際辦學(xué)條件緊密結(jié)合起來(lái)，老師根據(jù)目前學(xué)校目前擁有的先進(jìn)設(shè)備和實(shí)驗(yàn)標(biāo)本合理的安排實(shí)驗(yàn)，保證將現(xiàn)有的資源合理利用，對(duì)于那些必須的先進(jìn)生物設(shè)備和實(shí)驗(yàn)標(biāo)本老師應(yīng)該向上級(jí)部門提出申請(qǐng)，希望學(xué)校能盡力滿足。

細(xì)胞生物學(xué)研究范文第2篇

關(guān)鍵詞：TBL；教學(xué)模式；細(xì)胞生物學(xué)；實(shí)驗(yàn)

中圖分類號(hào)：G642.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2014）11-0257-03

細(xì)胞生物學(xué)不僅是生命科學(xué)的重要基礎(chǔ)學(xué)科之一，也是現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)、生物技術(shù)領(lǐng)域、畜牧業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖等行業(yè)的重要基石。同時(shí)，它還是一門實(shí)驗(yàn)性較強(qiáng)的學(xué)科，通過(guò)實(shí)驗(yàn)可以讓學(xué)生將理論知識(shí)融會(huì)貫通。一直以來(lái)，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)“以教師為中心，以驗(yàn)證為中心”的舊教學(xué)方式大大地阻止了學(xué)生實(shí)驗(yàn)的積極性和創(chuàng)新性。要怎樣改變細(xì)胞生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)來(lái)培養(yǎng)學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)知識(shí)、獨(dú)立思考問(wèn)題，以及運(yùn)用實(shí)驗(yàn)手段來(lái)探索生命的本質(zhì)和現(xiàn)象，目前是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革需要思考的問(wèn)題。以團(tuán)隊(duì)為基礎(chǔ)的學(xué)習(xí)（team-based learning，TBL）是上世紀(jì)70年代的美國(guó)Oklahoma大學(xué)Larry K Michaelssen教授創(chuàng)立的。與傳統(tǒng)的以授課為基礎(chǔ)的學(xué)習(xí)（lecture-based learning，LBL）教學(xué)模式有著很大的不同。TBL不再是以教師講授為中心，而是以學(xué)生自主學(xué)習(xí)為中心，以學(xué)生團(tuán)隊(duì)式合作學(xué)習(xí)為主，注重培養(yǎng)學(xué)生人際交往能力，培養(yǎng)主動(dòng)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題并解決問(wèn)題的能力，是一種有效促進(jìn)學(xué)習(xí)的新型教學(xué)模式。目前，TBL教學(xué)模式已在我國(guó)中山大學(xué)、三峽大學(xué)等高校廣泛應(yīng)用，特別是在臨床、解剖等醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程和信息素質(zhì)教育課程的教學(xué)中已得到普遍認(rèn)可。雖然在我國(guó)已有很多院校在不同程度上開展了TBL教學(xué)法的探索和研究并得到不同程度的好評(píng)，但沒(méi)有得到推廣和應(yīng)用。針對(duì)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程的性質(zhì)，將TBL教學(xué)法應(yīng)用到細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程中，擬為TBL教學(xué)模式在《細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》課程中的推廣進(jìn)行一些探討，提供一些思路。

一、TBL教學(xué)模式設(shè)計(jì)與實(shí)踐

細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)以理論課程為基礎(chǔ)。理論與實(shí)踐相結(jié)合，加深對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解，對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器要求較高，因此開設(shè)此課程的宗旨是使學(xué)生掌握細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)備的操作方法。使學(xué)生更加牢固地掌握基礎(chǔ)知識(shí)，更重要的是培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手和科研能力。

1.團(tuán)隊(duì)組建。將我院2011級(jí)生物科學(xué)本科班60名學(xué)生分為15組，其中每組為4人。分組時(shí)對(duì)組內(nèi)成員進(jìn)行調(diào)配，以達(dá)到組與組之間的均衡，再由成員分推選出一名組長(zhǎng)，小組必須合理組織，合理管理，組員需要有責(zé)任意識(shí)。分組時(shí)要遵循的原則是既要使小組內(nèi)的各種資源均衡，還要保持小組內(nèi)成員穩(wěn)定不變，減少影響小組內(nèi)部凝聚力的因素。

2.教學(xué)準(zhǔn)備。根據(jù)《細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》教學(xué)大綱要求，教師將需要了解與掌握的內(nèi)容提綱預(yù)先告知學(xué)生，在TBL教學(xué)之前讓學(xué)生對(duì)將要開展的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行預(yù)習(xí)。運(yùn)用TBL教學(xué)法，學(xué)生根據(jù)老師擬定的教學(xué)提綱，實(shí)驗(yàn)室具備的實(shí)驗(yàn)器材，結(jié)合課程內(nèi)容，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前的自我研讀和儀器、材料準(zhǔn)備。充分體現(xiàn)以學(xué)生為主體，提高學(xué)生主動(dòng)性的要求。

3.教學(xué)實(shí)施。（1）個(gè)人測(cè)試。在課堂開始的前十分鐘，給每位學(xué)生發(fā)放一份復(fù)選題，題目覆蓋此次實(shí)驗(yàn)課的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)原理、操作步驟及其注意事項(xiàng)，要求學(xué)生運(yùn)用之前所學(xué)到的知識(shí)來(lái)完成。之后參照分組，各組共同回答同樣的復(fù)選題測(cè)驗(yàn)，并交出共識(shí)建立之后的答案，最后老師來(lái)分析、總結(jié)。個(gè)人測(cè)試有助于教師了解學(xué)生學(xué)習(xí)知識(shí)的情況，有利于教師調(diào)整和安排教學(xué)進(jìn)程。（2）組間交流。接著進(jìn)行組間交流發(fā)言，其中某一小組選舉一名代表，上講臺(tái)把本組覺(jué)得重要內(nèi)容、必須重視的注意事項(xiàng)向其他組的同學(xué)匯報(bào)，其他組的同學(xué)與該組交換意見(jiàn)，共同尋求保證實(shí)驗(yàn)成功的可行性方法。教師在一旁聽證，記錄各小組在討論中存在的問(wèn)題、小組的發(fā)言次數(shù)及發(fā)言的質(zhì)量。在此過(guò)程中，教師應(yīng)鼓勵(lì)不愛(ài)發(fā)言的學(xué)生發(fā)言，參與到討論中，必要時(shí)對(duì)不發(fā)言的學(xué)生進(jìn)行有針對(duì)性的提問(wèn)。（3）實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行過(guò)程中教師要注意培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新精神和能力。及時(shí)指導(dǎo)學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行階段性總結(jié)。教師總體掌控任務(wù)的執(zhí)行，注意隨時(shí)為學(xué)生調(diào)整實(shí)驗(yàn)任務(wù)，讓學(xué)生就實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行深入的思考，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)探索生命本質(zhì)成功的關(guān)鍵。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，要求學(xué)生及時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，最后各組選派一名代表展示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，優(yōu)秀學(xué)生帶動(dòng)差生，綜合提高班級(jí)水平。評(píng)估提高實(shí)驗(yàn)結(jié)束后收集實(shí)驗(yàn)結(jié)果，要求學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析、討論，最后撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

二、TBL教學(xué)調(diào)查研究

研究采用問(wèn)卷調(diào)查。課程結(jié)束后對(duì)全班學(xué)生進(jìn)行調(diào)查。教師參考相關(guān)研究后設(shè)計(jì)調(diào)查問(wèn)卷。調(diào)查問(wèn)卷包括：實(shí)驗(yàn)前是否進(jìn)行課前預(yù)習(xí)；是否有利于提高文獻(xiàn)檢索能力；是否有利于提高人際交往能力；是否有利于提高學(xué)習(xí)主動(dòng)性；是否有利于提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力；是否有利于增強(qiáng)團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識(shí)；今后是否繼續(xù)使用TBL教學(xué)模式等問(wèn)題。

三、結(jié)果

60份調(diào)查問(wèn)卷全部收回，收回率100%，其結(jié)果見(jiàn)表1。調(diào)查結(jié)果98.4%的學(xué)生認(rèn)同TBL教學(xué)法能調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)積極性，98.4%的學(xué)生認(rèn)為能提高文獻(xiàn)檢索能力，95.1%的學(xué)生認(rèn)為能提高人際交往能力，96.8%的學(xué)生認(rèn)為能促進(jìn)課前預(yù)習(xí)，96.7%的學(xué)生認(rèn)為能提高動(dòng)手能力，96.7%的學(xué)生認(rèn)為能增強(qiáng)團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識(shí)，96.7%的學(xué)生認(rèn)為能使他們建立自主學(xué)習(xí)的觀念，96.8%的學(xué)生認(rèn)為TBL教學(xué)法能使課堂教學(xué)氣氛活躍，95.1%的學(xué)生認(rèn)為能更好地使他們理解課堂內(nèi)容，91.7%的學(xué)生認(rèn)為TBL教學(xué)法能及時(shí)解決學(xué)習(xí)問(wèn)題，95.0%的學(xué)生認(rèn)為能提高學(xué)生運(yùn)用所學(xué)知識(shí)的能力，98.4%的學(xué)生認(rèn)為今后應(yīng)繼續(xù)使用TBL教學(xué)模式。

四、討論

細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)傳統(tǒng)的教學(xué)主要以教師講解理論知識(shí)，學(xué)生驗(yàn)證為主。學(xué)生被動(dòng)地學(xué)習(xí)知識(shí)技能，不能激發(fā)學(xué)生的積極主動(dòng)性。而采用TBL教學(xué)模式在教學(xué)中的優(yōu)點(diǎn)與不足具體討論如下：

1.使實(shí)驗(yàn)課教學(xué)能在更高層次提高學(xué)生的動(dòng)手能力。調(diào)查結(jié)果表明有96.7%的同學(xué)對(duì)提高學(xué)生的動(dòng)手能力表示認(rèn)同。與傳統(tǒng)教學(xué)模式相比較，TBL教學(xué)模式更注重學(xué)生的主體性，教師精心設(shè)計(jì)一系列必要的知識(shí)內(nèi)容，促使學(xué)生課前預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、操作步驟、注意事項(xiàng)，查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料解答疑惑，使其理論知識(shí)得到不斷鞏固與加強(qiáng)。學(xué)生用更多的時(shí)間去驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，可以發(fā)現(xiàn)自己在實(shí)驗(yàn)中的不足，激發(fā)學(xué)生去改正并且提高實(shí)驗(yàn)操作能力。

2.向后進(jìn)生提供幫助與支持。TBL教學(xué)模式以團(tuán)隊(duì)為單位，小組成員無(wú)論是理論還是實(shí)驗(yàn)操作技能存在不足的，都會(huì)在個(gè)人測(cè)試，團(tuán)隊(duì)交流、討論中顯現(xiàn)出來(lái)，發(fā)現(xiàn)有知識(shí)點(diǎn)或是實(shí)驗(yàn)操作有不足之處的，老師或者其他懂的同學(xué)可以及時(shí)指導(dǎo)。所以，TBL教學(xué)模式能給后進(jìn)生提供支持和幫助，能獲得較大容量的學(xué)習(xí)知識(shí)。

3.培養(yǎng)學(xué)生的團(tuán)隊(duì)協(xié)作和人際交往能力。調(diào)查結(jié)果表明有96.7%同學(xué)對(duì)能提高團(tuán)隊(duì)協(xié)作認(rèn)同，有95.1%的同學(xué)對(duì)能提高人際交往能力認(rèn)同。在TBL教學(xué)中，教學(xué)任務(wù)的完成主要是通過(guò)團(tuán)隊(duì)協(xié)作來(lái)完成，這有利于提高學(xué)生團(tuán)隊(duì)合作的精神。在整個(gè)過(guò)程中，小組的每個(gè)成員都需要參與到問(wèn)題的分析和解決中去，并通過(guò)相互的溝通來(lái)達(dá)成共識(shí)[5]。TBL教學(xué)模式中，小組內(nèi)成員合作學(xué)習(xí)，取長(zhǎng)補(bǔ)短，共同完成組內(nèi)任務(wù)，這一過(guò)程培養(yǎng)了學(xué)生團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識(shí)[7]。

4.樹立并保持教師的工作熱情。采用TBL教學(xué)法對(duì)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課進(jìn)行教學(xué)，教師不僅要把需要講解的知識(shí)點(diǎn)全部熟悉，還要理解相關(guān)的其他學(xué)科知識(shí)，花更多的時(shí)間去準(zhǔn)備測(cè)試題和相關(guān)資料。對(duì)教師來(lái)講，教師是引導(dǎo)者和組織者，通過(guò)與學(xué)生共同參與討論，教師也從中獲益，實(shí)現(xiàn)教學(xué)相長(zhǎng)式的終身學(xué)習(xí)，從而提高了教學(xué)效率[6]，樹立并保持了教師的工作熱情。

5.真正讓學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)。調(diào)查結(jié)果表明有98.4%的同學(xué)對(duì)TBL能調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性認(rèn)同。在TBL教學(xué)過(guò)程中，學(xué)生以討論式學(xué)習(xí)和互教式的拓展性學(xué)習(xí)，真正做到以學(xué)生為中心。例如學(xué)生從實(shí)驗(yàn)課開始之前就需要自己根據(jù)教師給出的學(xué)習(xí)任務(wù)，自我研讀掌握知識(shí)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中親自動(dòng)手實(shí)驗(yàn)，不明白的地方由學(xué)生向老師提問(wèn)。老師在回答之前，先請(qǐng)其他學(xué)生來(lái)回答，這樣可以增加互動(dòng)。

6.節(jié)省課時(shí)，提高課堂效率。TBL教學(xué)采用課前給學(xué)生下達(dá)學(xué)習(xí)任務(wù)，學(xué)生以團(tuán)隊(duì)合作方式進(jìn)行自我研讀，這一環(huán)節(jié)大大縮短了教師課堂上的講授時(shí)間，留有更多時(shí)間讓學(xué)生測(cè)驗(yàn)、團(tuán)隊(duì)合作學(xué)習(xí)、團(tuán)隊(duì)討論，提高了課堂效率。

7.TBL教學(xué)法在細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)具體實(shí)施過(guò)程中的不足及展望。TBL教學(xué)對(duì)教學(xué)設(shè)備、教學(xué)場(chǎng)所、教師個(gè)人素質(zhì)等提出了更高要求，首先，要求教師對(duì)本專業(yè)知識(shí)融會(huì)貫通，教師個(gè)人素養(yǎng)高，教學(xué)技能出色，并要具備良好的組織管理能力以及控制實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的能力。其次，教師對(duì)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣、學(xué)習(xí)態(tài)度、能力和責(zé)任感等很難在短期內(nèi)較為全面和準(zhǔn)確的把握。當(dāng)發(fā)現(xiàn)一些小組成員搭配得不恰當(dāng)時(shí)。已經(jīng)來(lái)不及重新分組，這就會(huì)造成組間成績(jī)有一定差異[5]。另外，TBL教學(xué)法的特點(diǎn)是以小組討論形式開展教學(xué)，1位教師組織TBL教學(xué)，心有余而力不足，不能有效地參與到每一個(gè)小組的討論和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)中去，這樣也會(huì)影響到TBL教學(xué)的效果。雖然TBL教學(xué)在《細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》中推廣還存在一些問(wèn)題，還有待今后不斷地探索和完善。但TBL教學(xué)模式教學(xué)有利于提高學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性、主動(dòng)性以及動(dòng)手能力和科學(xué)研究能力，能有效促進(jìn)學(xué)生培養(yǎng)團(tuán)隊(duì)協(xié)作精神，同時(shí)更新了教師的教學(xué)理念，促進(jìn)了師生之間交流，提高了細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)質(zhì)量[5]。調(diào)查表明有98.4%的學(xué)生贊同在今后教學(xué)中繼續(xù)使用TBL教學(xué)法。

參考文獻(xiàn)：

[1]焦德志，李波，孫嬰寧.細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐能力[J].高師理科學(xué)刊，2011，31（1）：112-114.

[2]王筱冰，張坤，王攀.細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)改革初探[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2011，11（19）：3780-3782.

[3]孫祝美，葉杰，閆曉風(fēng)，等.以TBL為導(dǎo)向的教學(xué)方法在“細(xì)胞分化、衰老與死亡”章節(jié)中的應(yīng)用[J].中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào)，2012，34（9）：911-915.

[4]馮英，曾園山.組織學(xué)與胚胎學(xué)課程應(yīng)用TBL教學(xué)的初步探索[J].中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志，2011，（4）：377-379.

[5]蘇健，劉芳，于海東.TBL教學(xué)模式在信息素質(zhì)教育課程中的設(shè)計(jì)及研究[J].現(xiàn)代情報(bào)，2012，32（11）：115-118.

[6]宋志宏，任明，高國(guó)全，等.構(gòu)建TBL教學(xué)模式培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生溝通與合作能力[J].中國(guó)高等醫(yī)學(xué)教育，2012，（2）：113-114.

[7]徐俊文，侯朝鳳，張燕中.TBL教學(xué)模式在醫(yī)學(xué)影像學(xué)臨床實(shí)習(xí)中的應(yīng)用[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，33（8）：1054-1055.

細(xì)胞生物學(xué)研究范文第3篇

    雖然近年來(lái)對(duì)大腸癌治療的研究已經(jīng)取得了很大進(jìn)展，但始終不能改變其發(fā)病率和死亡率高的特點(diǎn)，對(duì)患者預(yù)后亦無(wú)明顯改善。因此，本研究探討δnp73基因的高表達(dá)對(duì)大腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響，為臨床防治大腸癌提供較可靠的理論依據(jù)。

    1  材料與方法

    1.1  實(shí)驗(yàn)材料

    lovo細(xì)胞株及真核表達(dá)質(zhì)粒pcdna3δnp73均由第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院腫瘤科惠贈(zèng)。rpmi1640培養(yǎng)基、小牛血清購(gòu)自hycolone公司。胰蛋白酶購(gòu)自sigma公司。millicell chamber購(gòu)自millipore公司。四甲基偶氮唑藍(lán)(mtt)、青霉素、鏈霉素均購(gòu)自gibco試劑公司。vegf試劑盒購(gòu)自r&d公司。

    1.2  lovoδnp73細(xì)胞株的建立

    以人類大腸癌細(xì)胞株lovo細(xì)胞為研究對(duì)象，將構(gòu)建于真核表達(dá)質(zhì)粒pcdna3δnp73基因用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染lovo細(xì)胞，用g418沉篩選出過(guò)表達(dá)δnp73基因的細(xì)胞株，命名為lovoδnp73細(xì)胞株；同時(shí)以空載體pcdna3轉(zhuǎn)染細(xì)胞，命名為lovopcdna3。

    1.3  臺(tái)盼蘭活細(xì)胞記數(shù)測(cè)定細(xì)胞的增殖能力與細(xì)胞活力

    胰酶消化收獲細(xì)胞（含懸浮及貼壁細(xì)胞）制備單細(xì)胞懸液，以冷pbs懸浮，細(xì)胞濃度為1×105/ml。取9滴細(xì)胞懸液移入小試管內(nèi)，加1滴0.4%臺(tái)盼蘭工作液，混勻，在3min內(nèi)用血球記數(shù)板分別記數(shù)活細(xì)胞和死細(xì)胞。

    1.4  細(xì)胞增殖曲線mtt測(cè)定

    取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞懸液200μl/孔（含2×103個(gè)細(xì)胞）接種至96孔板，于37℃、5% co2、飽和濕度培養(yǎng)箱，每組每天取3個(gè)復(fù)孔，每孔加入20μlmtt（5g/l）培養(yǎng)4h后棄培養(yǎng)液，每孔加入二甲基亞砜(dmso)200μl，振蕩10min溶解結(jié)晶紫。酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定490nm波長(zhǎng)各孔光吸收值（a490值）。

    1.5  流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡

    將lovo細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液，收集到5ml離心管中，離心，2 000g，5min，室溫，冷pbs洗滌2次，離心，2 000g，5min，棄上清。再以冷pbs懸浮，細(xì)胞濃度為1×106ml。加5ml annexin vfitc溶液和2.5μl pi到100μl細(xì)胞懸液中，混勻后室溫避光反應(yīng)30min。加入反應(yīng)緩沖液400μl，流式細(xì)胞術(shù)對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行定量檢測(cè)。

    1.6  boyden小室體外侵襲實(shí)驗(yàn)

    用改良的boyden小室法[1]：用人工基質(zhì)覆蓋millicell chamber濾膜上的微孔，向小室內(nèi)加入1×105/ml的細(xì)胞懸液, 培養(yǎng) 12h 后取出濾膜, 將下室面的細(xì)胞刮下，將膜固定，結(jié)晶紫染色細(xì)胞，高倍鏡下隨機(jī)取5個(gè)視野,計(jì)數(shù)細(xì)胞,取平均值。

    1.7  westernblot檢測(cè)vegf蛋白表達(dá)

    按照ripa蛋白提取步驟提取細(xì)胞總蛋白,采用bradford法測(cè)定總蛋白濃度。取總蛋白40μg行sdspage,電泳結(jié)束后電轉(zhuǎn)印17h至pvdf膜,膜封閉液內(nèi)封閉室溫1h,4℃過(guò)夜,pbs洗膜5min×4,加入兔抗人vegf單克隆抗體(1∶350),37℃孵育1h,pbs洗膜5min×4,再加入羊抗兔igg(1∶2 000),37℃孵育1h,pbs洗膜5min×4,化學(xué)發(fā)光試劑與pvdf膜共同孵育1min,將pvdf膜與x光片共同放暗盒曝光4min,顯影3min,定影10min。以gelproanalyzer凝膠定量分析軟件分析westernblot檢測(cè)結(jié)果,得出各條帶的灰度值,以平均灰度值代表vegf蛋白表達(dá)水平。

    1.8  統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    數(shù)據(jù)結(jié)果以±s表示,采用t檢驗(yàn), spss10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。

    2  結(jié)果

    2.1  臺(tái)盼蘭拒染實(shí)驗(yàn)

    臺(tái)盼蘭拒染實(shí)驗(yàn)中活細(xì)胞不染色，而死細(xì)胞染藍(lán)色。結(jié)果顯示δnp73轉(zhuǎn)染后lovo細(xì)胞的死細(xì)胞比例為（4.6+1.1）%,較lovopcdna3組（7.5+0.8）％明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01）。

    2.2  mtt法測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

    mtt結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染δnp73的lovo細(xì)胞較轉(zhuǎn)染空載體pcdna3的lovo細(xì)胞組和空白對(duì)照組細(xì)胞生長(zhǎng)明顯增快，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01），見(jiàn)圖1。

    圖1  mtt法測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

    2.3  基因轉(zhuǎn)染對(duì)大腸癌細(xì)胞凋亡率的影響

    fitcpi流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染空載體pcdna3的lovo細(xì)胞組凋亡率為（5.8＋1.2）％，而轉(zhuǎn)染δnp73的lovo細(xì)胞組的凋亡率為（2.4＋0.8）％，與lovo/pcdna3組對(duì)比凋亡率明顯降低（p<0.01），見(jiàn)圖2。

    圖2  δnp73轉(zhuǎn)染對(duì)lovo細(xì)胞凋亡的影響

    2.4  boyden 小室體外侵襲實(shí)驗(yàn)

    lovo、lovopcdna3 和 lovoδnp73細(xì)胞穿過(guò)人工基底膜的細(xì)胞數(shù)分別為（21.4±0.1）、（22.8±0.4） 和（39.5±0.6）, lovoδnp73 細(xì)胞與lovo 細(xì)胞和 lovopcdna3細(xì)胞比較, 穿膜數(shù)量明顯增加, 兩者間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01) 。而lovo細(xì)胞和 lovopcdna3細(xì)胞穿膜數(shù)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05) 。

    2.5  vegf蛋白表達(dá)westernblot檢測(cè)結(jié)果

    vegf蛋白表達(dá)westernblot檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖3。轉(zhuǎn)染pcdna3后lovo細(xì)胞中vegf蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05),而轉(zhuǎn)染δnp73能使vegf蛋白表達(dá)水平升高,灰度值上升，與未轉(zhuǎn)染p73基因的細(xì)胞相比上升了44.2％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p<0.05)，見(jiàn)表2。表2  轉(zhuǎn)染δnp73前后lovo細(xì)胞中vegf蛋白含量

    3  討論

    研究表明δnp73因?yàn)閚末端轉(zhuǎn)錄活化區(qū)缺失導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄活化功能完全喪失,對(duì)p53和全長(zhǎng)型p73的轉(zhuǎn)錄活化和促凋亡活性有明顯的負(fù)調(diào)節(jié)作用[2,3], δnp73除與大腸癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切外，對(duì)神經(jīng)母細(xì)胞瘤也是一個(gè)預(yù)示較差預(yù)后的分子標(biāo)志[4]。但在某些腫瘤中，如甲狀腺腫瘤，δnp73卻有著抑制增殖的作用[5,6]。由于δnp73基因在不同的腫瘤中對(duì)細(xì)胞凋亡和血管生成的影響不同，因此本實(shí)驗(yàn)以δnp73基因在對(duì)大腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、凋亡率、體外侵襲性以及對(duì)血管調(diào)節(jié)因子的表達(dá)調(diào)節(jié)作為主要切入點(diǎn)進(jìn)行了研究。

    本實(shí)驗(yàn)采用臺(tái)盼蘭拒染、mtt測(cè)定對(duì)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的體外生長(zhǎng)情況進(jìn)行了分析。臺(tái)盼蘭拒染、mtt測(cè)定均可反映細(xì)胞的增殖情況，但作用的機(jī)制與側(cè)重點(diǎn)不同。臺(tái)盼蘭是一種有機(jī)染料，當(dāng)細(xì)胞損傷或死亡時(shí)，可透過(guò)細(xì)胞膜與解體的dna結(jié)合，使其著色，而活細(xì)胞阻止其進(jìn)入，借此可鑒別活細(xì)胞和死細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)用該方法測(cè)定細(xì)胞的總數(shù)與存活率。mtt是一種淡黃色的化合物，它參與活細(xì)胞線粒體的能量代謝。在活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶可將mtt還原成難溶性的紫蘭色結(jié)晶物formazan并沉淀在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。在一定的細(xì)胞范圍內(nèi)，mtt結(jié)晶物形成的量與活細(xì)胞數(shù)成正比。dmso能溶解細(xì)胞中藍(lán)紫色的結(jié)晶物，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可以間接反映活細(xì)胞數(shù)量。我們認(rèn)為，臺(tái)盼蘭拒染實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，方便快捷，但結(jié)果受人為因素影響較多。mtt法較客觀準(zhǔn)確，是一種較好的判斷細(xì)胞增殖的指標(biāo)，而boyden 小室體外侵襲實(shí)驗(yàn)，則為檢測(cè)大腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染δnp73基因后的侵襲力改變提供了直接證據(jù)。本實(shí)驗(yàn)將3種實(shí)驗(yàn)方法的結(jié)果相結(jié)合分析更具準(zhǔn)確性和說(shuō)服力。進(jìn)一步流式細(xì)胞分析提示δnp73基因轉(zhuǎn)染lovo后細(xì)胞凋亡比例明顯減少。這一結(jié)果提示δnp73基因過(guò)表達(dá)可以促進(jìn)大腸癌細(xì)胞的惡性增殖，其可能的機(jī)制是δnp73的過(guò)表達(dá)通過(guò)影響p73的反式激活而導(dǎo)致其啟動(dòng)子活性的減弱,抑制p73誘導(dǎo)的凋亡[2]。

    除了上述指標(biāo)，目前，對(duì)大腸癌的細(xì)胞生物學(xué)行為的研究中還有一個(gè)研究熱點(diǎn)就是腫瘤血管生成 [7]。vegf是迄今鑒定出來(lái)的最重要的促血管生成因子之一,vegf能特異地與血管內(nèi)皮細(xì)胞上vegf受體結(jié)合,刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖并促進(jìn)血管形成。因此,vegf是反映大腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的良好指標(biāo)。在本研究中, 采用westernblot法檢測(cè)高表達(dá)δnp73的細(xì)胞中的vegf蛋白表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)δnp73大腸癌細(xì)胞株中vegf蛋白的表達(dá)較對(duì)照組明顯增高,表明δnp73的高表達(dá)打破了血管生成因子和抗血管生成因子之間的平衡,從而促進(jìn)了血管生成。其可能的機(jī)制是當(dāng)大腸癌發(fā)生時(shí),抑制因子表達(dá)下調(diào)、刺激因子上調(diào),并伴隨著癌基因激活和抑癌基因失活從而促使病理性血管生成[8,9]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示δnp73的高表達(dá)能促進(jìn)大腸癌血管生成，增強(qiáng)了其侵襲和轉(zhuǎn)移的能力，這也給我們今后對(duì)大腸癌臨床治療研究提出了一個(gè)思路和課題：有效的抑制δnp73的過(guò)度表達(dá)，可以在基因水平上抑制大腸癌血管的生成，從而對(duì)癌腫的生長(zhǎng)和侵襲起到有效的抑制作用。

    綜上所述，δnp73以高表達(dá)的方式參與大腸癌的發(fā)生發(fā)展，抑制大腸癌細(xì)胞凋亡，上調(diào)血管生成因子vegf的表達(dá)，促進(jìn)了大腸癌血管增生，增強(qiáng)了大腸癌細(xì)胞的侵襲性。鑒于δnp73基因?qū)Υ竽c癌細(xì)胞的這些影響,我們認(rèn)為，對(duì)δnp73進(jìn)行檢測(cè)，有利于從基因水平了解大腸癌的發(fā)生機(jī)制和生物學(xué)行為，從而對(duì)大腸癌作前瞻性估計(jì)，為臨床上對(duì)大腸癌的診斷、鑒別診斷、治療及預(yù)后判斷提供重要的參考指標(biāo)，同時(shí)，還可將δnp73作為新的腫瘤治療靶點(diǎn)進(jìn)一步深入研究。

【參考文獻(xiàn)】

[1]彭海霞，關(guān)明，周林法，等. p73對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞侵襲性的影響及其機(jī)制研究[j].中華消化雜志, 2004, 24（7）: 439441.

[2]nakagawa t, takahashi m,ozaki t,et al.autoinhibitory regulation of p73 by deltanp73 to modulate cell survival and death through a p73specific target element within the deltanp73 promoter [j]. mol cel biol,2002,22(8):25752585.

[3]vossio s, palescandolo e,pediconi n,et al. dnp73 is activated after dna damage in a p53dependent manner to regulate p53induced cell cyclear rest [j]. oncogene, 2002, 21(23):37963803.

[4]casciano i, mazzocco k, boni l,et al. expression of deltanp73 is a molecular marker for adverse outcome in neuroblastoma patients [j]. cell death differ, 2002, 9(3):246251.

[5]goldschneider d, blanc e, raguenez g, et al. differential response of p53 targe genes to p73 overexpression in shsy5y neuroblastoma cellline [j]. cell sci, 2004,117(pt2): 293301.

[6]frasc f, vella v, aloisi a, et al. p73 tumorsuppressor activity is impaired in human thyroid cancer [j]. cancer res, 2003,63(18): 58295837.

細(xì)胞生物學(xué)研究范文第4篇

[關(guān)鍵詞] 牙囊細(xì)胞； 基因轉(zhuǎn)染； 端粒酶； 成骨分化； 增殖

[中圖分類號(hào)] Q 813 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.01.002 牙囊細(xì)胞（dental follicle cells，DFC）來(lái)源于形成牙周組織始基的牙囊[1]，系牙周組織工程研究中受到廣泛關(guān)注的種子細(xì)胞之一[2]。數(shù)量豐富并且細(xì)胞表型

和生物學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的種子細(xì)胞是牙周組織工程研究的前提[3]，但是牙囊細(xì)胞體外培養(yǎng)的數(shù)量較少，容易

失去自我更新能力發(fā)生老化。通過(guò)轉(zhuǎn)染外源性基因片段至目的細(xì)胞可以抑制細(xì)胞的衰亡，使有限的生命細(xì)胞轉(zhuǎn)化成為具有長(zhǎng)期傳代能力和穩(wěn)定表型的細(xì)胞。

猿腎病毒SV40大T抗原（simian virus 40 large tu-mor antigen，SV40Tag）是較常用和有效的外源性基

因之一[4]，目前國(guó)內(nèi)外已成功將其用于牙骨質(zhì)細(xì)胞

以及牙周膜成纖維細(xì)胞[5]的永生化構(gòu)建。本研究將

SV40Tag基因片段轉(zhuǎn)染至體外培養(yǎng)的SD大鼠牙囊細(xì)胞，對(duì)其傳代增殖能力和抗衰老能力、成骨分化及細(xì)胞增殖等生物學(xué)特征進(jìn)行觀察和檢測(cè)，為牙周組織工程研究的種子細(xì)胞來(lái)源提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 材料

1周齡SD大鼠由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，含SV40Ta段質(zhì)粒pSSR69、pAmpho、293細(xì)胞均由重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院羅進(jìn)勇教授惠贈(zèng)，胎牛血清、DMEM培養(yǎng)基（Hyclone公司，美國(guó)），胰酶、Ⅰ型膠原酶、脂質(zhì)體2000、二甲基亞砜（dimethyl sul-foxide，DMSO）、聚凝胺（polybrene）、潮霉素（hygro-mycin）（Sigma公司，美國(guó)），端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（telome-rase reverse transcriptase，TRT）抗體、山羊抗兔二抗、甘油醛三磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）（Cell Signaling Technology公司，美國(guó)），焦碳酸二乙酯（diethypyrocarbonate，DEPC）（Bio Basic公司，美國(guó)），Rever Tre Ace-a-逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBRGreen逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（Toyobo公司，日本），瓊脂糖（TaKaRa公司，日本）。

1.2 牙囊細(xì)胞體外培養(yǎng)及SV40Tag基因轉(zhuǎn)染

將SD大鼠引頸法處死后取出下頜第一磨牙牙胚，分離出牙囊組織立即置入DMEM培養(yǎng)基并剪成l～2 mm大小的組織塊。加入0.1%Ⅰ型膠原酶37 ℃水浴消化1 h，0.25%胰蛋白酶消化5 min，離心棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基3 mL轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶。5%CO2、37 ℃、飽和濕度條件下培養(yǎng)，2～3 d換液1次，細(xì)胞生長(zhǎng)形成單層后常規(guī)消化傳代并鑒定細(xì)胞來(lái)源。37 ℃、5%CO2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)胞融合至75%～80%時(shí)胰蛋白酶消化傳代。

利用293細(xì)胞包裝病毒構(gòu)建含SV40Tag的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，制備重組逆轉(zhuǎn)錄病毒并轉(zhuǎn)染至SD大鼠牙囊細(xì)胞。方法：將293細(xì)胞按30%～40%密度鋪于T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，待細(xì)胞貼壁（8～12 h）后，設(shè)置轉(zhuǎn)染體系，將含有SV40Ta段的pSSR69質(zhì)粒1～2 μg、pAmpho質(zhì)粒0.5～1.0 μg、脂質(zhì)體2000 15 μL、DMEM（無(wú)血

清、無(wú)雙抗）250 μL混合均勻，室溫放置15～20 min。將T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中293細(xì)胞用3 mL無(wú)血清、無(wú)雙抗的DMEM洗滌2遍，再加入無(wú)血清、無(wú)雙抗的DMEM 2.5 mL。將設(shè)置好的轉(zhuǎn)染體系加入細(xì)胞培養(yǎng)瓶，輕柔混合均勻。3～5 h后，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基換成完全DMEM 4 mL，在繼續(xù)培養(yǎng)36、60、84、108 h后，分別收集細(xì)胞上清液（含有轉(zhuǎn)染體系），合計(jì)收集約16 mL，低速離心5 min去除細(xì)胞懸液，0.22～0.45 μm醋酸纖維膜濾器過(guò)濾，4 ℃保存?zhèn)溆谩⒀滥壹?xì)胞按20%～30%密度鋪于T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，等待細(xì)胞貼壁。在含有轉(zhuǎn)染體系的293細(xì)胞培養(yǎng)上清液中加入80～100 μL聚凝胺，吸取SD大鼠牙囊細(xì)胞培養(yǎng)基，換成含有轉(zhuǎn)染體系的細(xì)胞培養(yǎng)上清液4 mL，6～8 h后吸出上清液，再加入含有轉(zhuǎn)染體系的細(xì)胞培養(yǎng)上清液

4 mL，過(guò)夜培養(yǎng)，第2天換成完全DMEM 4 mL，培養(yǎng)4 h。2 μg?mL-1潮霉素篩選。

1.3 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察

以轉(zhuǎn)染SV40Tag后的DFC為實(shí)驗(yàn)組，正常DFC為對(duì)照組，連續(xù)傳代至60代。在倒置相差顯微鏡下觀察2組的細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)狀態(tài)。

1.4 轉(zhuǎn)染SV40Tag基因前后DFC端粒酶表達(dá)的檢測(cè)

細(xì)胞中端粒的長(zhǎng)度會(huì)隨著細(xì)胞分裂逐漸縮短，進(jìn)而衰老死亡，因此維持端粒的長(zhǎng)度成為阻止細(xì)胞衰老的方法之一[12]。本研究對(duì)轉(zhuǎn)染SV40Tag前后的DFC細(xì)胞進(jìn)行TRT檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組TRT灰度值明顯高于對(duì)照組，證明轉(zhuǎn)染SV40Tag后DFC的端粒酶被激活，端粒長(zhǎng)度增加，提示轉(zhuǎn)染SV40Tag后的DFC具備抗衰老的特性。

轉(zhuǎn)染SV40Tag后的DFC獲得了極強(qiáng)的傳代和抗衰老能力，但其成骨分化和細(xì)胞增殖特性與正常牙囊細(xì)胞有無(wú)差異尚需要進(jìn)一步的研究。ALP是細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的早期標(biāo)志[13]，OC是成骨活性細(xì)胞分化晚期的重要標(biāo)志[14]，Runx2基因是成骨細(xì)胞分化的

特異性轉(zhuǎn)錄因子[15]，BMP2通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)上調(diào)成骨

調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄直接及間接地促進(jìn)成骨分化[16]。本

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞內(nèi)ALP、OC、BMP2、Runx2的表達(dá)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明SV40Tag轉(zhuǎn)染大鼠DFC后成骨早期和晚期分化能力以及成骨特異性因子的轉(zhuǎn)錄與正常牙囊細(xì)胞均無(wú)明顯差異，保持了相對(duì)一致性。IGF和bFGF[17]作為一種多肽生長(zhǎng)因子，可促進(jìn)細(xì)胞在同一生長(zhǎng)周期內(nèi)的增殖活性。本研究結(jié)果顯示，大鼠DFC轉(zhuǎn)染SV40Tag基因前后的IGF-1及bFGF表達(dá)水平均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明轉(zhuǎn)染SV40Tag后大鼠DFC在細(xì)胞周期內(nèi)增殖活性與正常牙囊細(xì)胞無(wú)明顯差異，保持了功能狀態(tài)的穩(wěn)定。

本研究通過(guò)轉(zhuǎn)染SV40Tag基因片段至SD大鼠牙囊細(xì)胞，對(duì)其生物學(xué)特性觀察檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染SV40Tag后的DFC獲得了無(wú)限傳代增殖和抗衰老的能力，染色體端粒長(zhǎng)度得以維持。同時(shí)該細(xì)胞保持了與正常牙囊細(xì)胞相對(duì)一致的成骨分化特性和增殖活性，表明其生物學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，有望成為牙周組織工程研究中較理想的種子細(xì)胞來(lái)源。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Handa K， Saito M， Yamauchi M， et al. Cementum matrix forma-

tion in vivo by cultured dental follicle cells[J]. Bone， 2002， 31（5）：

606-611.

[2] Guo W， Gong K， Shi H， et al. Dental follicle cells and treated

dentin matrix scaffold for tissue engineering the tooth root[J]. Bio-

materials， 2012， 33（5）：1291-1302.

[3] Izumi Y， Aoki A， Yamada Y， et al. Current and future periodontal

tissue engineering[J]. Periodontol 2000， 2011， 56（1）：166-187.

[4] D’Errico JA， Ouyang H， Berry JE， et al. Immortalized cemento-

blasts and periodontal ligament cells in culture[J]. Bone， 1999， 25

（1）：39-47.

[5] Fujii S， Maeda H， Wada N， et al. Establishing and characterizing

human periodontal ligament fibroblasts immortalized by SV40T-

antigen and hTERT gene transfer[J]. Cell Tissue Res， 2006， 324

（1）：117-125.

[6] 趙書芳， 金巖， 李松， 等. 細(xì)胞增殖與凋亡在牙齒發(fā)育中的作用

[J]. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志， 1999， 17（2）：99-101.

Zhao Shufang， Jin Yan， Li Song， et al. Cell proliferation and pro-

grammed cell death in tooth development[J]. West China J Stoma-

tol， 1999， 17（2）：99-101.

[7] Tominaga K， Olgun A， Smith JR， et al. Genetics of cellular senes-

cence[J]. Mech Ageing Dev， 2002， 123（8）：927-936.

[8] Nakamura Y， Hiroyama T， Miharada K， et al. Red blood cell pro-

duction from immortalized progenitor cell line[J]. Int J Hematol，

2011， 93（1）：5-9.

[9] Gai D， Li D， Finkielstein CV， et al. Insights into the oligome-

ric states， conformational changes， and helicase activities of SV40

large tumor antigen[J]. J Biol Chem， 2004， 279（37）：38952-38959.

[10] Nobre A， Kalve I， Cesnulevicius K， et al. Characterization and dif-

ferentiation potential of rat ventral mesencephalic neuronal proge-

nitor cells immortalized with SV40 large T antigen[J]. Cell Tissue

Res， 2010， 340（1）：29-43.

[11] 齊志明， 呂剛， 白彥東， 等. 轉(zhuǎn)導(dǎo)人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因致人骨

髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化并向軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究[J]. 中華

外科雜志， 2008， 46（9）：697-699.

Qi Zhiming， Lü Gang， Bai Yandong， et al. Differentiation of human

telomerase reverse transcriptase immortalized human marrow me-

senchymal stem cell into chondrocyte[J]. Chin J Surgery， 2008， 46

（9）：697-699.

[12] Hasegawa T， Chosa N， Asakawa T， et al. Establishment of immor-

talized human periodontal ligament cells derived from deciduous

teeth[J]. Int J Mol Med， 2010， 26（5）：701-705.

[13] 柳向東， 唐朝暉， 白祥軍， 等. 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向成骨誘

導(dǎo)中堿性磷酸酶對(duì)其成骨能力的影響[J]. 中華創(chuàng)傷雜志， 2009，

25（10）：945-948.

Liu Xiangdong， Tang Chaohui， Bai Xiangjun， et al. Effect of alka-

line phosphatase on ossification capacity of human marrow-derived

mesenchymal stem cells（hBMSCs） during hBMSCs differentiating

into osteoblasts[J]. Chin J Trauma， 2009， 25（10）：945-948.

[14] 儲(chǔ)慶， 吳織芬， 王勤濤， 等. 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1基因轉(zhuǎn)染對(duì)人

牙齦成纖維細(xì)胞成骨特性的影響[J]. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志， 2009，

27（3）：264-267.

Chu Qing， Wu Zhifen， Wang Qintao， et al. Influence of transfec-

tion with human transforming growth factor-β1 gene on the osteo-

genic potential of the cultured human gingival fibroblast[J]. West

China J Stomatol， 2009， 27（3）：264-267.

[15] 關(guān)鍵， 程宗生， 王健平， 等. 成骨細(xì)胞中Runx2對(duì)機(jī)械離心力刺

激的響應(yīng)[J]. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志， 2010， 28（1）：38-40.

Guan Jian， Cheng Zongsheng， Wang Jianping， et al. Bone morpho-

genetic protein signal transduction pathway regulates Runx2 ex-

pression in MC3T3-E1 osteoblasts in vitro induced by centrifu-

gation[J]. West China J Stomatol， 2010， 28（1）：38-40.

[16] Liu H， Zhang R， Chen D， et al. Functional redundancy of type

Ⅱ BMP receptor and type ⅡB activin receptor in BMP2-induced

osteoblast differentiation[J]. J Cell Physiol， 2012， 227（3）：952-963.

[17] 韋永珍， 王秀穎， 潘乙懷， 等. 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)體外

培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞增殖和遷移的影響[J]. 現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志， 2011，

25（2）：126-130.

Wei Yongzhen， Wang Xiuying， Pan Yihuai. Effect of bFGF on the

proliferation and migration of human dental pulp cells in vitro[J]. J

細(xì)胞生物學(xué)研究范文第5篇

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1006-1959(2009)07-0280-02

腎細(xì)胞癌(renalcellcarcinoma,RCC)是泌尿系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,長(zhǎng)期危害著人類健康。近十年來(lái),對(duì)腎細(xì)胞癌的分子生物學(xué)研究取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展,使我們對(duì)腎細(xì)胞癌有了更深刻的認(rèn)識(shí)。本文就腎細(xì)胞癌各種病理分型的分子生物學(xué)研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1腎細(xì)胞癌發(fā)生的分子生物機(jī)制

腎癌的發(fā)生發(fā)展是多階段、多步驟的過(guò)程,包括癌基因激活和抑癌基因(tumorsuppressorgene,TSG)失活在內(nèi)的一系列遺傳學(xué)改變。抑癌基因的缺失或失活是腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中重要的分子事件之一。腫瘤常在抑癌基因位點(diǎn)出現(xiàn)染色體基因缺失,表現(xiàn)為等位基因雜合性缺失(lossofheterozygosity,LOH),通過(guò)檢測(cè)分析腫瘤LOH及其規(guī)律,可在染色體一定范圍內(nèi)發(fā)現(xiàn)腫瘤的抑癌基因及易感基因。為了能較全面的了解導(dǎo)致腎細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵分子事件,不同學(xué)者對(duì)腎細(xì)胞癌全基因組進(jìn)行了不同的研究,發(fā)現(xiàn)腎細(xì)胞癌發(fā)生高頻率LOH主要見(jiàn)于以下幾個(gè)染色體:3p、5q、8p、9p、10q、14q、17和18q染色體。

1.13號(hào)染色體:3號(hào)染色體短臂的部分缺失是腎癌基因改變中的高發(fā)事件。其中定位于3p25-26的VHL抑癌基因被認(rèn)為是這些基因改變的首要目標(biāo)。在以前的研究中,VHL在腎透明細(xì)胞癌(cc-RCC)中的失活機(jī)制主要為等位基因缺失和突變,DNA超甲基化很少見(jiàn)。劉寧等利用PCR限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性法對(duì)3號(hào)染色體上的VHL基因的兩個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)來(lái)分析VHL基因的雜合性缺失失情況,發(fā)現(xiàn),42%(8/19)發(fā)生VHL基因LOH,并未發(fā)現(xiàn)VHL基因失活與腫瘤的分期、分級(jí)存在聯(lián)系。

有雜合性缺失研究顯示,有可能在染色體3p上存在另外的RCC相關(guān)抑癌基因。定位于染色體3p14.2上包含最常見(jiàn)的FRA3B脆性位點(diǎn)的FHIT基因作為候選抑癌基因日益受到關(guān)注。Velickovic等通過(guò)選擇性的檢測(cè)FHIT區(qū)域的LOH發(fā)生情況認(rèn)為這個(gè)基因在ccRCC的發(fā)展過(guò)程中起到很重要的作用。并且發(fā)現(xiàn)在cc-RCC中染色體3p的LOH發(fā)生率達(dá)76%。Farkas等對(duì)88例腎細(xì)胞癌病例進(jìn)行LOH研究,選取了3p14.2-p25范圍內(nèi)16個(gè)位點(diǎn)采用PCR技術(shù)進(jìn)行LOH分析,結(jié)果顯示VHL基因和FHIT基因區(qū)域,透明細(xì)胞癌的LOH發(fā)生率高達(dá)96%,而狀細(xì)胞癌和嫌色細(xì)胞癌僅為10%和18%,并且LOH的發(fā)生率與腫瘤大小、分期、分級(jí)無(wú)關(guān)。從而認(rèn)為VHL和FHIT的等位基因缺失是腫瘤發(fā)生的早期事件。

1.25號(hào)染色體:1986年APC基因首次在一位患有息肉病及多種其它先天性畸形患者的5號(hào)染色體長(zhǎng)臂片段先天性中間缺失中得到證實(shí),確切的基因位點(diǎn)隨后由定位克隆確定。Pecina-SlausN等利用相對(duì)外顯子11和15的特殊寡核苷酸引物對(duì)36例腎細(xì)胞癌病例進(jìn)行限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性的檢測(cè),了解與APC基因相關(guān)的LOH情況,并同時(shí)檢測(cè)APC蛋白的表達(dá)情況。研究發(fā)現(xiàn)36例樣本中有33例為信息性病例,其中有17例出現(xiàn)LOH,并且LOH的發(fā)生與年齡以及腫瘤的TNM分期呈正相關(guān)。但并不是所有出現(xiàn)LOH的病例都有APC蛋白的表達(dá)。從而認(rèn)為APC基因與腫瘤的進(jìn)展有著密切關(guān)系,可能不是腫瘤發(fā)生的早期事件。

1.38號(hào)、9號(hào)染色體:Presti等學(xué)者對(duì)72例腎透明細(xì)胞癌進(jìn)行LOH測(cè)定,并將LOH作為臨床預(yù)后指標(biāo)的評(píng)估,他們選取了3p,8p,9p,14q四個(gè)不同的染色體,在每個(gè)染色體上選取兩對(duì)引物,結(jié)果顯示8p、9p的LOH發(fā)生率與腫瘤復(fù)發(fā)率正相關(guān)。由此推測(cè)8p、9p的LOH可作為判斷局部進(jìn)展型腎癌預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)。

近年來(lái)許多學(xué)者在多種腫瘤,如肺癌、食管癌、黑色素、胃癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤等研究中均發(fā)現(xiàn),9號(hào)染色體常出現(xiàn)較高頻率的LOH,所以推測(cè)9號(hào)染色體上存在不止一個(gè)與這些腫瘤的發(fā)生相關(guān)的抑癌基因。Fukunaqa等利用熒光多重PCR技術(shù)比較提取自腫瘤組織和對(duì)應(yīng)的外周血液樣本中的DNA,通過(guò)對(duì)9號(hào)染色體上的13個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)109例腎細(xì)胞癌中27例至少有一個(gè)位點(diǎn)出現(xiàn)LOH,其中最高發(fā)生率出現(xiàn)在PTCH基因所在的9P22區(qū)域。而Sanz-casla等對(duì)40例單發(fā)腎細(xì)胞癌病例同時(shí)進(jìn)行p16基因附近染色體9p21區(qū)域的LOH和p16基因啟動(dòng)子超甲基化的檢測(cè),出現(xiàn)LOH的為9例,超甲基化的為8例但是兩者之間沒(méi)有必然聯(lián)系由此推測(cè)p16基因的失活和其他未知的抑癌基因共同參與腎細(xì)胞癌的發(fā)病機(jī)制。Grady則通過(guò)對(duì)60例腎細(xì)胞癌病例進(jìn)行9號(hào)染色體上的16個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)的LOH分析,60例樣本中至少一個(gè)位點(diǎn)出現(xiàn)LOH的為44例,主要缺失區(qū)域出現(xiàn)在位于9p21的DS171、D9S1749和DS270上。有46%的病例在9q32-9q33出現(xiàn)LOH,在這一區(qū)域的D9S170位點(diǎn)LOH發(fā)生率達(dá)22%,研究認(rèn)為除了在9p21附近的p16候選抑癌基因外,在9p21以及9q32-9q33附近很有可能存在其它的抑癌基因。

1.410號(hào)染色體：Velickovic等對(duì)10號(hào)染色體上與PTEN/MMAC1抑癌基因相關(guān)的7個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記物L(fēng)OH發(fā)生率進(jìn)行分析，其中腎透明細(xì)胞癌的LOH發(fā)生率為37.5%，狀細(xì)胞癌為29.7%，嫌色細(xì)胞癌為87.5%，且LOH發(fā)生率與腫瘤的分期、分級(jí)和生存率有關(guān)，并且認(rèn)為雙等位基因失活的發(fā)生多由非點(diǎn)突變畸變導(dǎo)致。

1.514號(hào)染色體：Kaku等對(duì)染色體14q24-31區(qū)域的7個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)42例信息性病例中23例（54.8%)出現(xiàn)LOH，并發(fā)現(xiàn)LOH發(fā)生最普遍的區(qū)域位于D14S67附近的2-Mb范圍，且LOH的發(fā)生率與腫瘤分期呈正相關(guān)。同樣Alimov等利用2個(gè)RFLP位點(diǎn)對(duì)45例腎細(xì)胞癌患者進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)45例信息性病例中17例（38%）在染色體14q31-q32.2上出現(xiàn)LOH，并且LOH的發(fā)生率與腫瘤的分級(jí)和低生存率正相關(guān)。而Gallou等的實(shí)驗(yàn)則將14q上的普遍缺失區(qū)域定位于D14S281到D14S277之間。另外有學(xué)者對(duì)130例腎透明細(xì)胞癌病例采用D14S588、D14S617、GATA136B01三個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行LOH分析，數(shù)據(jù)顯示LOH發(fā)生率與腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)、生長(zhǎng)速度以及致死率呈正相關(guān)。

以上關(guān)于14q染色體的LOH研究均顯示與腫瘤的分級(jí)和低生存率呈正相關(guān)關(guān)系，表明腫瘤的14qLOH很可能與腫瘤的侵襲發(fā)展有關(guān)。

1.617號(hào)染色體：p53基因位于17p13.1上，具有反式激活功能和廣譜抑癌作用，與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有關(guān)。因此研究染色體17p上TP53位點(diǎn)的LOH情況對(duì)于揭示P53在腫瘤發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮的作用意義重大。在29例腎細(xì)胞癌中，W.M.L.報(bào)道了關(guān)于P53的雜合性缺失為48%(14/29)，并通過(guò)序列測(cè)定確認(rèn)單鏈構(gòu)象多態(tài)性而發(fā)現(xiàn)了有11例出現(xiàn)突變。Ogawa等利用p53基因附近的5個(gè)多態(tài)性探針對(duì)48例腎癌進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)染色體17p的等位基因缺失率為17%(6/36)，并且染色體17p的等位基因缺失與腫瘤分期無(wú)確切相關(guān)性。其他研究者發(fā)現(xiàn)在17號(hào)染色體上還存在著其它LOH發(fā)生區(qū)域。Khoo等對(duì)BHD基因區(qū)域的2個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)D17S740和D17S2196進(jìn)行檢測(cè)，28例腎細(xì)胞癌中10例（36%）出現(xiàn)LOH，其中6例嫌色細(xì)胞癌中2例（33%）出現(xiàn)LOH，6例狀細(xì)胞癌中出現(xiàn)5例（83%），透明細(xì)胞癌12例出現(xiàn)3例（25%）。并推測(cè)BHD基因可能在腎臟腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。而Simon-kayser等對(duì)處于17q11到17q23之間的7個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記物進(jìn)行檢測(cè)，15例狀腎細(xì)胞癌中14例為信息性病例7例出現(xiàn)LOH。發(fā)生頻率最高的為與FBXO47候選抑癌基因相關(guān)的D17s250位點(diǎn)。

1.718號(hào)染色體：Hirata等對(duì)126例腎透明細(xì)胞癌病例進(jìn)行研究，通過(guò)對(duì)染色體18q上的9個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)24例(19%)發(fā)生LOH，LOH最高發(fā)生率出現(xiàn)在DCC基因所在的18q21.3區(qū)域，并發(fā)現(xiàn)LOH的發(fā)生率與性別、腫瘤分期、分級(jí)、等參數(shù)無(wú)關(guān)。認(rèn)為DCC和SMAD4可能做為候選抑癌基因與腎透明細(xì)胞癌的發(fā)生有關(guān)。 2腎細(xì)胞癌的病理分型與分子生物學(xué)機(jī)制

1997年國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)和美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)(AJCC)根據(jù)已知基因改變以及腫瘤細(xì)胞起源，并結(jié)合腫瘤細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)將腎癌分為透明細(xì)胞癌(clearcellrenalcellcarcinoma)、狀腎細(xì)胞癌(papillaryrenalcellcarcinoma)、嫌色細(xì)胞癌(chromophoberenalcellcarcinoma)和集合管癌（carcinomaofthecollectingducts）4種基本形式。約有4％~5％腎癌細(xì)胞形態(tài)及遺傳學(xué)改變不一，細(xì)胞成分混雜或有未識(shí)別的細(xì)胞成分，此類腫瘤歸為未分類腎細(xì)胞癌（renalcellcarcinoma，unclassified），有待今后進(jìn)一步研究。由于在各型腎癌組織中都可見(jiàn)到細(xì)胞質(zhì)中含有嗜酸顆?；蛩笮渭?xì)胞成分，所以在新分類中取消了顆粒細(xì)胞癌和肉瘤樣癌。

腎透明細(xì)胞癌或稱為傳統(tǒng)的腎細(xì)胞癌或非狀腎癌，約占70％~80％，是最常見(jiàn)的病理類型，起源于腎近曲小管。已明確的遺傳學(xué)改變是以3p缺失、VHL基因突變、甲基化或缺失為特征，此外尚有不十分明確的改變。綜合國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，常見(jiàn)的染色體缺失區(qū)域包括4q、6q、9p、13q、Xq、8p，常見(jiàn)的染色體擴(kuò)增區(qū)域包括5q、9q、17p、17q。Jiang等利用分枝樹模型及時(shí)間樹模型對(duì)腎癌比較基因組雜交數(shù)據(jù)進(jìn)行分析后認(rèn)為透明細(xì)胞癌至少可能分為兩個(gè)亞型，一型伴有-6、+17p、+17q，另一型伴有-9p、-13q、-18q。-4q是透明細(xì)胞癌發(fā)展過(guò)程中除-3p外的另一重要早期事件，-8q多出現(xiàn)在轉(zhuǎn)移灶中，是原發(fā)性透明細(xì)胞癌的一個(gè)晚期事件，9p、13q上可能存在與腎癌進(jìn)展相關(guān)的抑癌基因。

狀腎細(xì)胞癌或稱為嗜色腎細(xì)胞癌或腎小管狀癌，約占10％一15％，是第二常見(jiàn)的腎惡性腫瘤，可能起源于腎近曲小管。遺傳學(xué)上，以Y染色體丟失、7號(hào)染色體和17號(hào)染色體的三倍體或四倍體異常為特征，此外較典型的分子遺傳學(xué)異常尚有C-MET基因活化、+12q、+16q、+20q、-1P、-4q、-6q、-9p、-13q、-xp、-xq、-Y等。Delahunt和Eble在1997年應(yīng)用免疫組化方法分析91例狀腎細(xì)胞癌，根據(jù)形態(tài)學(xué)改變分為2型，1型狀腎細(xì)胞癌光學(xué)顯微鏡下呈管狀結(jié)構(gòu)，被覆小細(xì)胞，含有卵圓形小細(xì)胞核，核仁不顯著，胞質(zhì)少、灰白。2型狀腎細(xì)胞癌為狀結(jié)構(gòu)，被覆豐富嗜酸性胞質(zhì)的大細(xì)胞，含有大球形細(xì)胞核。分析結(jié)果顯示：7號(hào)染色體和17號(hào)染色體倍體異常多見(jiàn)于狀腎細(xì)胞癌1型，而-Xp常提示預(yù)后不良。與透明細(xì)胞癌相比，狀腎細(xì)胞癌的多灶性或雙腎癌更常見(jiàn)。

嫌色細(xì)胞腎細(xì)胞癌約占5％，起源于腎集合小管暗細(xì)胞。遺傳學(xué)以多個(gè)染色體丟失和單倍體為特征，LOH常發(fā)生在1、2、6、10、13、17或21號(hào)染色體。

腎集合管癌少見(jiàn)，起源于腎髓質(zhì)或腎的中央?yún)^(qū)集合管上皮，遺傳學(xué)上的改變無(wú)統(tǒng)一形式，以染色體18、21和Y染色體單體丟失以及染色體7、12、17、20的多倍體異常較常見(jiàn)。