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【關(guān)鍵詞】 苯巴比妥;熊去氧膽酸;苦黃注射液;還原型谷胱甘肽針;茵梔黃注射液;病毒性肝炎后殘余黃疸
病毒性肝炎后高膽紅素血癥即殘余黃疸,是病毒性肝炎合并膽紅素代謝障礙,以間接膽紅素增高為主。其主要臨床表現(xiàn)是患者患病毒性肝炎后,出現(xiàn)持久不退的輕度黃疸,患者肝臟活體組織檢查肝組織結(jié)構(gòu)正常,無(wú)炎癥及肝細(xì)胞壞死。臨床治療比較困難。筆者于2009年1月~2013年1月使用苯巴比妥聯(lián)合熊去氧膽酸(優(yōu)思弗)治療病毒性肝炎后殘余黃疸30例,臨床癥狀改善、黃疸消退,療效滿意。并與運(yùn)用苦黃注射液、還原型谷胱甘肽針、茵梔黃注射液等常規(guī)保肝藥物作對(duì)照?,F(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下。
1 臨床資料
1.1 一般資料 從我院2009年1月~2013年1月收治的病毒性肝炎后殘余黃疸患者中,根據(jù)診斷標(biāo)準(zhǔn)選取60例患者進(jìn)行回顧性分析,其年齡分布為14~65歲,其中男性36例,女性24例。
1.2 病例納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn):①2009年1月~2013年1月的初診患者,符合病毒性肝炎后殘余黃疸診斷標(biāo)準(zhǔn);②無(wú)其他臟器疾??;③戒酒;④年齡不大于65周歲或小于14周歲。排除標(biāo)準(zhǔn):①就診時(shí)間為2009年1月前或2013年1月后者;②非病毒性肝炎后殘余黃疸者;③妊娠或哺乳期婦女;④合并有心血管、腦血管或造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病及精神病者;⑤年齡大于65周歲或小于14周歲。
1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) 依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì)所定的《病毒性肝炎防治方案》以及陳灝珠主編的《實(shí)用內(nèi)科學(xué)》制訂本診斷標(biāo)準(zhǔn)。① 明確診斷為病毒性肝炎者。②臨床生化檢查:ALT、AST正常,TBIL、IBIL有不同程度的異常。③確診為病毒性肝炎后高膽紅素血癥,TBIL、IBIL均有不同程度異常的患者。④器官移植、自身免疫性肝病、酒精性肝病等。
2 方法及指標(biāo)
2.1 治療方法 治療組:苯巴比妥片60mg口服,每天3次;熊去氧膽酸(優(yōu)思弗)250mg口服,每天3次,28d為1個(gè)療程。對(duì)照組:還原型谷胱甘肽針1.8g加10%葡萄糖注射液250ml靜滴,每天1次;苦黃注射液40ml加5%葡萄糖注射液250ml靜滴,每天1次;茵梔黃注射液20ml加5%葡萄糖注射液250ml靜滴,每天1次,14d為1個(gè)療程。
2.2 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 治愈:癥狀全部消失,TBIL、IBIL正常,30d后隨診復(fù)查無(wú)異常;好轉(zhuǎn):癥狀好轉(zhuǎn),TBIL、IBIL基本正常,30d后隨診復(fù)查基本正常;無(wú)效:癥狀無(wú)減輕,TBIL、IBIL無(wú)變化,30d后隨診復(fù)查變化不大。
3 結(jié) 果
表1 兩組療效比較
由上表可以看出,治療組療效優(yōu)于對(duì)照組。服藥過(guò)程中,所有患者均未出現(xiàn)不良反應(yīng)。
4 討 論
病毒性肝炎后高膽紅素血癥指在患者患病毒性肝炎后,出現(xiàn)輕度黃疸,持久不退。其發(fā)病機(jī)制是肝臟膽紅素代謝障礙。主要是患者患病毒性肝炎后,肝細(xì)胞微粒體內(nèi)尿嘧啶核苷二磷酸葡萄糖醛酰移換酶活性減低,使間接膽紅素和尿嘧啶核苷葡萄糖醛酸結(jié)合轉(zhuǎn)變?yōu)橹苯幽懠t素的能力下降,血中間接膽紅素潴積而增高。肝臟排泄直接膽紅素的功能正常,血直接膽紅素常不增加。此外,亦有可能為患者患肝炎后,肝細(xì)胞對(duì)血中間膽紅素的攝取功能障礙所致。
苯巴比妥為肝酶誘導(dǎo)劑,其作用機(jī)制為:①誘導(dǎo)脲嘧啶二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶,促使膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合,加速其從腸道和尿中排泄;②誘導(dǎo)肝內(nèi)Y蛋白,促進(jìn)膽紅素運(yùn)輸;③誘導(dǎo)毛細(xì)膽管膜上的Na+/K+-ATP酶活性,使膽汁分泌增加,誘導(dǎo)膽固醇降解酶,促使膽固醇分解成膽酸排出體外,從而增加膽汁和膽酸的生成。熊去氧膽酸(優(yōu)思弗)能促進(jìn)內(nèi)源性膽汁酸的分泌,并抑制其重吸收;能拮抗疏水性膽汁酸的細(xì)胞毒作用,保護(hù)肝細(xì)胞;能抑制肝臟膽固醇的合成,并促進(jìn)其轉(zhuǎn)化和排泌以及免疫調(diào)節(jié)和炎癥抑制;清除自由基抗氧化及抑制細(xì)胞凋亡。
綜上,根據(jù)病毒性肝炎后殘余黃疸的發(fā)病機(jī)理及苯巴比妥、熊去氧膽酸(優(yōu)思弗)的作用機(jī)制,在實(shí)際工作當(dāng)中,針對(duì)病毒性肝炎后殘余黃疸的患者,我們運(yùn)用苯巴比妥、熊去氧膽酸(優(yōu)思弗)聯(lián)合運(yùn)用,取得了較好的效果,值得進(jìn)一步研究和推廣。
參考文獻(xiàn)
[1] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì).病毒性肝炎防治方案[J].中華肝臟病雜志,2000,8(6):324-329.
[2] 陳灝珠.實(shí)用內(nèi)科學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2001:1700-1713.
[3] 付敏.熊去氧膽酸(優(yōu)思弗)治療慢性肝炎殘留黃疸的療效觀察[J].河南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2007,26(2):38-39.
(遼寧省興城市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所125100)
對(duì)于母豬流產(chǎn)的診斷和其他疾病的診斷有明顯的不同。其他疾病多是從發(fā)生急性感染、未進(jìn)行過(guò)任何治療且出現(xiàn)癥狀的具有代表性的患畜身上采集恰當(dāng)?shù)臉颖竞笤\斷,大多數(shù)情況下可以找到病因。流產(chǎn)發(fā)生時(shí)大多原因不明,即無(wú)論是大體還是微觀檢查均沒(méi)有發(fā)現(xiàn)病原體。
由于影響流產(chǎn)因素特別多,如激素、遺傳、營(yíng)養(yǎng)、毒素、創(chuàng)傷、代謝、缺氧和感染等,進(jìn)行胚胎和胎兒死亡原因的診斷是具有挑戰(zhàn)性的。即使采樣和檢測(cè)十分順利,也只有1/3的流產(chǎn)可確診,并且說(shuō)明大部分的流產(chǎn)并不是由感染造成,進(jìn)行診斷前需要更細(xì)致更全面的臨床調(diào)查。診斷部分個(gè)體或散發(fā)的流產(chǎn)樣本難以代表整個(gè)畜群的狀況。當(dāng)發(fā)生傳染性流產(chǎn)時(shí),可能出現(xiàn)以下幾個(gè)指征:妊娠母豬在流產(chǎn)前1~4星期表現(xiàn)有一定的癥狀,如發(fā)熱、抑郁、食欲不佳;部分特定的子群體發(fā)生流產(chǎn),如剛引進(jìn)的母豬、小母豬;集群性的流產(chǎn);漸進(jìn)性的整個(gè)畜群都發(fā)生流產(chǎn);未注射疫苗的母豬發(fā)生流產(chǎn)。
1組織采樣的一般原則
診斷母豬流產(chǎn)時(shí),每胎中需要送檢至少4~6個(gè)胎兒的樣本。送檢完整的冷凍胎兒樣本同樣可以,尤其是胎兒冷凍后運(yùn)輸以最小化進(jìn)一步自溶時(shí)。樣本應(yīng)該包括胎盤,因?yàn)楦鶕?jù)胎盤是否有損傷可以輔助判斷是否為感染性的流產(chǎn),更好地理解從胎兒組織中分離培養(yǎng)出細(xì)菌的診斷意義。在非細(xì)菌性感染的情況下,胎兒在子宮內(nèi)發(fā)生死亡脫水后會(huì)木乃伊化,這在病毒導(dǎo)致的流產(chǎn)中很常見(jiàn)。
組織病理學(xué)是常規(guī)診斷方法,可確定檢出微生物可能的致病作用。在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法未能檢測(cè)到病原體時(shí),組織病理學(xué)可以根據(jù)炎癥或者壞死判斷是否存在感染性流產(chǎn)。當(dāng)流行病學(xué)檢查顯示為感染性的過(guò)程,同時(shí)又有相關(guān)的損傷存在時(shí),若初步檢查未發(fā)現(xiàn)病原體,此時(shí)應(yīng)擴(kuò)大檢查的病原體種類,進(jìn)行更多的檢查。
2病毒性流產(chǎn)
同其他家畜相比,病毒是導(dǎo)致豬感染性流產(chǎn)最常見(jiàn)的病因。例如,在美國(guó)60%的感染性流產(chǎn)都是由藍(lán)耳病病毒引起的。盡管母豬的病毒性疾病可能是導(dǎo)致流產(chǎn)的原發(fā)性病因或者是促進(jìn)因素,但通常可見(jiàn)胎兒胎盤的感染。
盡管有很多病毒可以引起母豬的繁殖性疾病,但目前藍(lán)耳病病毒、圓環(huán)病毒和細(xì)小病毒是最常見(jiàn)的。其他引起流產(chǎn)的病毒包括腦心肌炎病毒、腸道病毒、捷申病毒、水皰病毒、豬繁殖與神經(jīng)綜合征病毒、巨細(xì)胞病毒,在野豬還可見(jiàn)偽狂犬病毒。在其他國(guó)家,繁殖疾病由日本腦炎病毒、豬瘟、非洲豬瘟等感染導(dǎo)致。
病毒導(dǎo)致的繁殖性疾病在大體檢查時(shí)可見(jiàn)木乃伊胎的增加,多胎可見(jiàn)有胎兒異常,臍帶育節(jié)段性的出血水腫,出現(xiàn)很多針尖大壞死灶,心衰。顯微病變對(duì)病毒性流產(chǎn)更有診斷意義,檢出率也更高。提示病毒感染的顯微病變包括非化膿性腦炎、心肌炎、間質(zhì)性肺炎、多組織壞死。
病毒性感染常見(jiàn)自溶的胎兒或木乃伊胎,這種胎兒不適于進(jìn)行病毒分離。但熒光抗體檢測(cè)或者PCR可能從中檢到病毒的抗原或核酸,尤其是細(xì)小病毒或圓環(huán)病毒的感染。最好用新鮮的死胎、弱胎或者母豬樣本來(lái)進(jìn)行病毒的分離。
PCR檢測(cè)迅速,敏感性和特異性高,而且受胚胎自溶的影響較小。然而,PCR難以區(qū)分同源性很近的毒株,對(duì)于部分樣本類型可能是首選方法,分離病毒的能力也不是特別突出。由于特異性方法的出現(xiàn),傳統(tǒng)的病毒分離方法逐漸被淘汰,導(dǎo)致流產(chǎn)的不常見(jiàn)病毒被確診的數(shù)量越來(lái)越少。當(dāng)常規(guī)檢測(cè)病毒結(jié)果為陰性時(shí),應(yīng)考慮病毒分離,尤其在出現(xiàn)胎兒異常、木乃伊胎、間質(zhì)性肺炎、心肌炎、腦炎或壞死時(shí)。
3細(xì)菌性流產(chǎn)
與以前只能提供單一殺毒功能的精簡(jiǎn)版免費(fèi)殺毒軟件不同,如今的免費(fèi)殺毒軟件已經(jīng)提供包括監(jiān)控、防惡意軟件在內(nèi)的完全功能。
免費(fèi)的“午餐”有哪些
avast家庭版 4.8
文件大?。?8.62MB
適用平臺(tái):Windows 2000/XP/Vista
下載網(wǎng)址:/iavs4pro/setupchs.exe
PC Tools AntiVirus 4.0
文件大小:20.97MB
適用平臺(tái):Windows 2000/XP
下載網(wǎng)址:/cn/free-antivirus/
墨者安全專家豪華版3.13(趨勢(shì)殺毒專家 2008版)
文件大?。?7.3MB
適用平臺(tái):Windows XP
下載網(wǎng)址:/dl/
1.avast!家庭版 4.8
應(yīng)該有很多人不知道avast!家庭版 4.8(以下簡(jiǎn)稱avast),它是來(lái)自捷克的Alwi公司的產(chǎn)品。avast有免費(fèi)家庭版和收費(fèi)專業(yè)版之分,后者主要增加了網(wǎng)頁(yè)腳本攔截、增大用戶界面等功能。在安裝avast時(shí),一定不要安裝在中文名的文件夾下。安裝完成后,軟件可以試用60天,登錄/scripts/register.php?lang=CHS后,通過(guò)郵件免費(fèi)獲取有效期為一年的注冊(cè)號(hào),期滿后,重新注冊(cè)即可。avast的實(shí)時(shí)監(jiān)控本地化做的相當(dāng)出色,可以監(jiān)控QQ接收及BitComet下載到的文件(見(jiàn)圖1)。
圖1
avast最具特色的功能是它的VRDB(Virus Restore DataBase的縮寫,病毒復(fù)原數(shù)據(jù)庫(kù))功能,它主要是對(duì)電腦中的重要文件進(jìn)行備份。當(dāng)有病毒進(jìn)入系統(tǒng)并感染文件時(shí)能夠修復(fù)被感染的文件。在對(duì)付維金或熊貓燒香等感染型蠕蟲病毒是非常有用的。
安裝完avast后,在系統(tǒng)托盤會(huì)生成兩個(gè)圖標(biāo),確認(rèn)電腦內(nèi)沒(méi)有病毒后,右擊左側(cè)的圖標(biāo),選擇“馬上產(chǎn)生VRDB”項(xiàng)。這樣,以后查毒時(shí),發(fā)現(xiàn)病毒在彈出的窗口中就有“修復(fù)”的選項(xiàng)了,點(diǎn)它即可恢復(fù)(見(jiàn)圖2)。
圖2
2.PC Tools AntiVirus 4.0
如果你用過(guò)DOS,肯定知道PC Tools,PC Tools AntiVirus(以下簡(jiǎn)稱PTAV)就是它推出的殺毒軟件,功能上自然也很強(qiáng)。同樣,它也分免費(fèi)版和收費(fèi)版,區(qū)別只是前者沒(méi)有售后支持及高速升級(jí)(見(jiàn)圖3)。
圖3
PTAV的特色功能就是IntelliGuard實(shí)時(shí)保護(hù)技術(shù),它可以監(jiān)視并刪除在系統(tǒng)中運(yùn)行的惡意文件。
另外,PC Tools還提供了免費(fèi)的防火墻,你可以從/cn/firewall/下載到。
在使用PTAV時(shí),在主窗口點(diǎn)擊“設(shè)置”按鈕,將“掃描壓縮文件”由“一個(gè)級(jí)別”改為“所有級(jí)別”,這樣才能發(fā)揮軟件全部殺毒能力。
3.墨者安全專家豪華版3.13
這是一款安全輔助軟件與殺毒軟件的“套裝”(見(jiàn)圖4),里面包含了趨勢(shì)殺毒專家2008版,與前兩款軟件不同,軟件承諾終身免費(fèi)升級(jí),安裝之后,可以立刻使用,對(duì)于菜鳥來(lái)說(shuō)這點(diǎn)非常具有吸引力(見(jiàn)圖5)。前面兩款殺毒軟件的免費(fèi)版與收費(fèi)版都少一些功能,而墨者中的趨勢(shì)則和正式版基本完全一樣,廠商相當(dāng)大方。為了公正,我們?cè)谙旅娴臏y(cè)試中關(guān)閉了“墨者”。
圖4
圖5
試吃免費(fèi)的大餐
小編在一臺(tái)Windows XP電腦上分三次安裝了殺毒軟件,分別對(duì)大家最關(guān)注的問(wèn)題進(jìn)行了測(cè)試。我們分別測(cè)試了四個(gè)病毒包,分別在解壓縮及未解壓縮的情況下查殺病毒。
31個(gè)樣本壓縮包:基本全是最近流行的病毒樣本,有些專業(yè)的殺毒軟件只能查出29個(gè)。
57個(gè)樣本壓縮包:包括機(jī)器狗在內(nèi)的多個(gè)病毒。能掃出30個(gè)就算優(yōu)秀了。
137個(gè)樣本壓縮包:包括一些老病毒在內(nèi)的壓縮包,有部分樣本與57個(gè)中的相同。
7162個(gè)樣本壓縮包:該樣本包是由23個(gè)ZIP壓縮包組成,每個(gè)壓縮包又由數(shù)量不等的病毒樣本壓縮包組成,一共為7162個(gè)樣本,其中有部分樣本為老病毒。
注:
1.趨勢(shì)殺毒專家中的病毒及惡意軟件被稱為“威脅”
2.avast殺毒查殺壓縮包內(nèi)的文件后,文件還會(huì)保留,但已經(jīng)不能使用
研究院報(bào)告
統(tǒng)考一:VB100
考官:英國(guó)病毒技術(shù)研究(Virus Bulletin)
難度指數(shù):
VB100被譽(yù)為“安全領(lǐng)域的奧林匹克”。1989年成立的Virus Bulletin以世界性組織―最大病毒庫(kù)(Wild List)作為病毒來(lái)源和樣本,主要以評(píng)測(cè)反病毒軟件的偵測(cè)率、偵測(cè)速度及總體表現(xiàn)為主,頒發(fā)VB 100%獎(jiǎng)。
參加認(rèn)證的反病毒產(chǎn)品必須完全殺掉“WildList”里登記的所有病毒樣本,并可對(duì)計(jì)算機(jī)進(jìn)行實(shí)時(shí)防病毒監(jiān)控,防止病毒侵入。評(píng)測(cè)沒(méi)有打分,只有兩個(gè)結(jié)果:通過(guò)或者不通過(guò)。因?yàn)榉浅?yán)格,VB100一向被視為殺毒軟件的“滑鐵盧”,所有測(cè)試結(jié)果都會(huì)公開(kāi),缺乏信心的廠商一般都望而卻步。
2007年,金山毒霸2007打破了國(guó)產(chǎn)殺毒軟件集體缺席VB100的尷尬,成為國(guó)內(nèi)首家通過(guò)VB100測(cè)試的安全廠商。今年4月的VB100測(cè)試采用了Windows vista business 32 sp1系統(tǒng)下的病毒作為檢驗(yàn)樣本,金山毒霸2008以100%診斷率、0%的誤診率,在手動(dòng)掃描及實(shí)時(shí)監(jiān)控兩種模式下均順利通過(guò)評(píng)測(cè)(見(jiàn)圖)。
統(tǒng)考二:Checkmark
考官:英國(guó)西海岸實(shí)驗(yàn)室(WestCoastLabs)
難度指數(shù):
西海岸實(shí)驗(yàn)室1996年推出Checkmark認(rèn)證方案,測(cè)試各類信息安全產(chǎn)品與國(guó)際統(tǒng)一認(rèn)可的最基本標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范的符合性表現(xiàn)。
Checkmark認(rèn)證證書體現(xiàn)產(chǎn)品在真實(shí)環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)下的測(cè)試結(jié)果,一級(jí)認(rèn)證獎(jiǎng)勵(lì)能偵測(cè)到病毒的防毒產(chǎn)品,二級(jí)認(rèn)證僅授予那些能偵測(cè)和解除病毒危險(xiǎn)程度評(píng)估組織(WildList Organization)所的各種極具破壞性病毒的威脅,而木馬認(rèn)證要求被評(píng)測(cè)的產(chǎn)品能夠100%查出西海岸實(shí)驗(yàn)室所有測(cè)試木馬樣本,并且掃描誤報(bào)測(cè)試專用樣本時(shí)的誤報(bào)率為0。我國(guó)三大殺毒廠商金山、瑞星、江民都先后通過(guò)了Checkmark查毒、Checkmark殺毒、反木馬三項(xiàng)認(rèn)證。
統(tǒng)考三:ICSA
考官:ICSA實(shí)驗(yàn)室
難度指數(shù):
1實(shí)驗(yàn)材料與方法
1.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)本實(shí)驗(yàn)在我區(qū)果園、銀達(dá)、三墩三鄉(xiāng)鎮(zhèn)進(jìn)行,選擇飼養(yǎng)周期較長(zhǎng)的牛羊作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。每年春季防疫結(jié)束一個(gè)月,分別采集這三個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)選定的牛羊血清(親自注射疫苗,佩帶免疫標(biāo)識(shí)),監(jiān)測(cè)一次抗體水平,夏季防疫不注射疫苗,只采集血清監(jiān)測(cè)抗體,秋季防疫前(不注射疫苗)再采一次血,測(cè)定抗體水平。通過(guò)比較,分析家畜體內(nèi)抗體水平變化。
供試家畜:春季防疫一個(gè)月后采集樣本,果園鄉(xiāng)采集牛血樣6份,羊血樣6份;銀達(dá)鎮(zhèn)采集牛血樣6份,羊血樣5份;三墩鎮(zhèn)采集牛血樣3份,羊血樣5份。夏季未注射疫苗,果園鄉(xiāng)采集牛血樣6份,采集羊血樣1份;銀達(dá)鎮(zhèn)采集牛血樣5份,羊血樣2份;三墩鎮(zhèn)采集牛血樣3份,羊血樣4份。秋季打防疫針之前采集血樣,果園鄉(xiāng)采集牛血樣5份;銀達(dá)鎮(zhèn)采集牛血樣5份,羊血樣2份;三墩鎮(zhèn)采集牛血樣1份,羊血樣3份。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法本實(shí)驗(yàn)采用免疫抗體檢測(cè)液相阻斷ELISA法,通過(guò)預(yù)先滴定好的固定量病毒抗原與被檢血清首先在液相中反應(yīng),然后將抗原抗體復(fù)合物轉(zhuǎn)移到包被了口蹄疫型特異型抗體ELISA中,沒(méi)有完全被血清抗體阻斷的病毒抗原被ELISA板中的抗體捕獲,亦與隨后加入的豚鼠抗血清中的抗體結(jié)合,再通過(guò)免抗豚鼠IgG酶結(jié)合物和底物溶液顯色。按實(shí)驗(yàn)孔呈現(xiàn)的顏色與抗原對(duì)照(未加血清)孔呈現(xiàn)顏色相比較,判定結(jié)果。抗體滴度以能阻斷50%病毒抗原的血清稀釋度表示。
1.3實(shí)驗(yàn)試劑與器材
1.3.1主要試劑
①捕獲抗體:口蹄疫病毒免抗血清;②檢測(cè)抗體:口蹄疫病毒豚鼠抗血清;③酶結(jié)合物:免抗豚鼠IgG-辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合物;④病毒抗原與病毒對(duì)照抗原:用BEI滅活的病毒細(xì)胞培養(yǎng)物;⑤標(biāo)準(zhǔn)陰性、陽(yáng)性血清;⑥底物溶液:鄰苯二胺(OPD)/雙氧水(H2O2)溶液;⑦終止液:1.25mol/l硫酸溶液(H2SO4);⑧緩沖液:包被緩沖液:0.05mol/l碳酸鈉(Na2CO3)/碳酸氫鈉(NaHCO3),pH9.60;稀釋液:0.05%吐溫-20(Tween-20)加入0.01mol/l PBS,pH7.40(PBST);豚鼠抗血清稀釋液:5%脫脂奶粉-PBST;洗滌液:0.01mol/l PBST,pH7.40。
1.3.2主要儀器材料
① ELISA板:96孔平底聚苯乙烯ELISA板;② 抗原抗體反應(yīng)板:96孔U型聚丙烯微量板;③ 移液器:0.50~20ul、5~40ul、50~200ul、200~1000ul可調(diào)移液器各1把,8道或12道可調(diào)移液器1把,移液槽5~6個(gè),配套槍尖若干;④ 可調(diào)恒溫培養(yǎng)箱1臺(tái);⑤ 酶標(biāo)儀:492波長(zhǎng)濾光片;⑥ 吸水紙巾
2結(jié)果分析
2.1結(jié)果判定
2.1.1牛、羊O型血清抗體效價(jià)與保護(hù)力的關(guān)系:抗體效價(jià)大于等于1:128,99%以上保護(hù);效價(jià)小于等于1:16不保護(hù);效價(jià)在1:22~90之間,50%保護(hù)。
2.1.2牛、羊亞洲I型血清抗體效價(jià)與保護(hù)力的關(guān)系:抗體效價(jià)大于等于1:128,99%以上保護(hù);效價(jià)小于等于1:16不保護(hù);效價(jià)在1:22~90之間,50%保護(hù)。
2.2結(jié)果分析
從監(jiān)測(cè)結(jié)果來(lái)看,第1次檢測(cè)是在4月30日,注射疫苗時(shí)間為3月17日。O型抗體水平:共檢測(cè)15份牛血樣本,全部達(dá)到99%保護(hù);15份羊血樣本,10份樣本達(dá)到99%保護(hù);4份樣本50%保護(hù);1份樣本沒(méi)有保護(hù)率。亞洲I型抗體水平;共檢測(cè)15份牛血樣本,全部達(dá)到99%保護(hù);共檢測(cè)15份羊血樣本,11份樣本達(dá)到99%保護(hù);4份樣本50%保護(hù);抗體滴度小于1:16的沒(méi)有。第2次監(jiān)測(cè)是在7月11日,沒(méi)有注射疫苗。O型抗體水平:14份牛血樣本,全部達(dá)到99%保護(hù);7份羊血樣本,6份樣本達(dá)到99%保護(hù);1份樣本50%保護(hù);沒(méi)有保護(hù)率的沒(méi)有。亞洲I型抗體水平:14份牛血樣本,11份樣本達(dá)到99%保護(hù);2份樣本50%保護(hù);1份樣本沒(méi)有保護(hù)率。第3次監(jiān)測(cè)是在秋季防疫前,采血日期10月15日。 O型抗體水平:9份牛血樣本,全部達(dá)到99%保護(hù);羊血樣本4份,1份樣本99%,其余3份樣本50%;沒(méi)有保護(hù)率的沒(méi)有。亞洲I型抗體水平:9份牛血樣本,5份99%保護(hù);3份50%保護(hù);1份不保護(hù)。羊血樣本4份,1份樣本99%保護(hù);1份樣本50%保護(hù);2份樣本不保護(hù)。
3小結(jié)與討論
從這一年的監(jiān)測(cè)中可以看出,牛在注射疫苗后,畜體產(chǎn)生的抗體較高。第1次監(jiān)測(cè)O型抗體,100%的??贵w水平達(dá)到有效保護(hù)。第2次監(jiān)測(cè),抗體水平依然維持在第1次監(jiān)測(cè)的水平,仍在有效保護(hù)范圍之內(nèi),100%保護(hù)。第3次監(jiān)測(cè),也是100%保護(hù),抗體滴度≥1:128。羊在注射疫苗后,第1次監(jiān)測(cè),94%達(dá)到100%保護(hù),第2次監(jiān)測(cè),86%達(dá)到100%保護(hù)。第3次監(jiān)測(cè)只能達(dá)到25%保護(hù)。亞洲I型抗體第1次監(jiān)測(cè),牛100%全部保護(hù),羊73%達(dá)到100%保護(hù)。第2次監(jiān)測(cè),牛79%保護(hù),羊57%保護(hù)。第3次監(jiān)測(cè),牛56%保護(hù),羊25%保護(hù)。