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細(xì)胞核范文第1篇

沒有細(xì)胞核。原核生物是指一類細(xì)胞核無核膜包裹，只存在稱作核區(qū)的裸露DNA的原始單細(xì)胞生物。它包括細(xì)菌、放線菌、立克次氏體、衣原體、支原體、藍(lán)細(xì)菌和古細(xì)菌等。

與真核生物的種類相比，已發(fā)現(xiàn)的原核生物種類雖不甚多，但其生態(tài)分布卻極其廣泛，生理性能也極其龐雜。有的種類能在飽和的鹽溶液中生活；有的卻能在蒸餾水中生存；有的能在0℃下繁殖；有的卻以70℃為最適溫度；有的是完全的無機(jī)化能營養(yǎng)菌，以二氧化碳為唯一碳源；有的卻只能在活細(xì)胞內(nèi)生存。

在進(jìn)行光合作用的原核生物中，有的放氧，有的不放氧；有的能在pH為10以上的環(huán)境中生存，有的只能在pH為1左右的環(huán)境中生活；有的只能在充足供應(yīng)氧氣的環(huán)境中生存，而另外一些細(xì)菌卻對(duì)氧的毒害作用極其敏感。有的可利用無機(jī)態(tài)氮，有的卻需要有機(jī)氮才能生長；還有的能利用分子態(tài)氮作為唯一的氮源等。

（來源：文章屋網(wǎng) ）

細(xì)胞核范文第2篇

一、細(xì)胞核與擬核

細(xì)胞生物種類繁多，H.Ris最早提出“原核細(xì)胞”、“真核細(xì)胞”概念，將細(xì)胞生物分為原核生物和真核生物.原核細(xì)胞一般由細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、擬核組成基本結(jié)構(gòu)，真核細(xì)胞一般由細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核組成.原核細(xì)胞“核”形態(tài)原始，沒有膜包被，不成形，無核膜、核仁，由一個(gè)環(huán)狀雙鏈DNA分子形成核區(qū).DNA分子上不含或含很少蛋白質(zhì)，原核細(xì)胞中沒有染色體.真核細(xì)胞“細(xì)胞核”成形明顯，由外向內(nèi)依次由核膜、核液、染色質(zhì)以及核仁等結(jié)構(gòu)組成.核膜兩層（核外膜和核內(nèi)膜），其上有核孔.核膜有選擇透過性，允許一些小分子、離子進(jìn)出；核孔是選擇性通道，允許RNA和蛋白質(zhì)進(jìn)出，但不允許RNA和蛋白質(zhì)分子自由進(jìn)出，更不允許DNA分子進(jìn)出.

二、核膜與核被膜

核被膜和核膜常被誤以為相同結(jié)構(gòu).實(shí)際上，核被膜比核膜復(fù)雜得多.核膜由兩層不連續(xù)單位膜構(gòu)成，面向細(xì)胞質(zhì)一層為核外膜，面向核質(zhì)一層為核內(nèi)膜.外核膜表面附有核糖體顆粒，常與糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)連通，使核周間隙與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔彼此相通.內(nèi)核膜無核糖體顆粒，表面光滑，但緊貼其內(nèi)表面有一層致密的結(jié)構(gòu)――核纖層.這樣，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“內(nèi)連”核膜、“外連”細(xì)胞膜，占生物膜系統(tǒng)最大比例.外核膜和內(nèi)核膜之間有20～40nm的透明的腔，稱為膜間腔.核被膜由雙層核膜、核孔復(fù)合體和核纖層3種結(jié)構(gòu)組成.它位于間期細(xì)胞核最外層，是細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)之間的界膜.

三、核孔與核孔復(fù)合體

核孔復(fù)合體鑲嵌在核內(nèi)膜、核外膜融合形成的核孔上，目前所知所有真核細(xì)胞，比如從酵母到人，間期細(xì)胞核普遍存在核孔復(fù)合體.核孔復(fù)合體中一部分結(jié)構(gòu)嵌入了核被膜，因此核孔復(fù)合體比核孔稍大一些，比如核孔直徑約為80～120nm，核孔復(fù)合體直徑約為120～150nm.核孔是內(nèi)核膜、外核膜的局部融合所形成的小孔，是溝通核質(zhì)與胞質(zhì)物質(zhì)相互交流的渠道.兩者具有一定的選擇性，對(duì)細(xì)胞活動(dòng)起調(diào)節(jié)作用.

四、染色質(zhì)與染色體

“狹義”的染色體是指真核生物的染色體，由DNA、組蛋白、非組蛋白和少量RNA組成，易被堿性染料染成深色的物質(zhì).間期、末期以絲狀形態(tài)呈現(xiàn)；前期、中期、后期以圓柱狀或桿狀出現(xiàn).為了區(qū)別同一物質(zhì)兩種形態(tài)，前者稱為染色質(zhì)，后者稱為染色體.簡言之，絲狀染色質(zhì)經(jīng)螺旋化、縮短變粗為圓柱狀、桿狀染色體.兩者主要區(qū)別不是化W組成，而是構(gòu)型，表現(xiàn)在染色體是染色質(zhì)在分裂期緊密包裝、卷曲凝縮的結(jié)構(gòu)形式.從“狹義”的染色體出發(fā)，原核生物沒有染色體.

五、核質(zhì)、核基質(zhì)與核液

核質(zhì)是核仁以外、核膜以內(nèi)的物質(zhì)，包括不易著色的核液和能被著色的染色質(zhì).間期細(xì)胞核中，在染色質(zhì)和核仁周圍有無定型的著色淺的液體，稱為核液.核基質(zhì)指細(xì)胞核內(nèi)，除了核被膜、核纖層、染色質(zhì)與和核仁以外的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)體系，因此核基質(zhì)等同核骨架，比較類似核液.

細(xì)胞核范文第3篇

一、充分利用資料，設(shè)計(jì)問題，剖析出真知

對(duì)于遺傳信息在細(xì)胞核中這個(gè)知識(shí)點(diǎn)，充分利用資料，對(duì)資料進(jìn)行分析，設(shè)計(jì)一系列問題，讓學(xué)生根據(jù)設(shè)計(jì)的問題讀書、思考，然后進(jìn)行形式、內(nèi)容兼?zhèn)涞挠懻?、分析、推理、歸納、總結(jié)，從而得出結(jié)論。問題1：克隆羊多利誕生實(shí)驗(yàn)中用到了幾只羊，科學(xué)家對(duì)它們分別做了哪些處理？問題2：這三只羊分別為多利提供了什么？問題3：多利長得像哪只羊？分析為什么會(huì)長得像B羊？問題4：你得出了什么結(jié)論？

通過這些問題的分析、歸納，鍛煉學(xué)生的團(tuán)隊(duì)合作能力、邏輯推理能力、啟迪學(xué)生思維，培養(yǎng)學(xué)生的語言概述能力，發(fā)揮學(xué)生的主體性、能動(dòng)性，真正做到品讀出知識(shí)、思考出知識(shí)、討論出知識(shí)、分析出知識(shí)、歸納出觀點(diǎn)。

二、利用圖片理解基因與DNA的關(guān)系

出示果蠅的一條染色體結(jié)構(gòu)圖，同時(shí)提出問題如下：（1）一個(gè)DNA上只有一個(gè)片段嗎？（2）片段如何排列？（3）每個(gè)片段可能有什么含義？（4）果蠅的染色體是否只含有展示出的這八個(gè)基因？（提示，果蠅只有8條染色體，但性狀卻又近千萬個(gè)）（5）DNA的片段是否全部都是基因？（6）你對(duì)這幅圖，還有哪些疑問？讓學(xué)生帶著疑問觀察、分析、討論、綜合、歸納和演繹出DNA可以分為很多個(gè)片段，許多片段是基因，但有些片段可能不是基因。

果蠅某染色體上的幾個(gè)基因圖

學(xué)生通過觀察、分析資料不但獲得了知識(shí)，也掌握了獲取知識(shí)的方法和過程；不但領(lǐng)悟了知識(shí)，并且把知識(shí)轉(zhuǎn)化為思維智慧；不但進(jìn)行了思考，并且把思考理論轉(zhuǎn)化為思考技巧；通過讓學(xué)生自己提出問題，不但能激發(fā)學(xué)生的求知欲，而且能培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力；不但能發(fā)揮學(xué)生的主體性，而且能化尋常思想為科學(xué)素養(yǎng)。

三、利用圖片分析染色體組成

染色體的結(jié)構(gòu)抽象且微觀，因此DNA和蛋白質(zhì)組成染色體是本節(jié)課的又一重點(diǎn)和難點(diǎn)。可以充分利用圖片、表格直觀地展示知識(shí)點(diǎn)。

1.剖析圖片，解析染色體概念及組成

什么是染色體？如何根據(jù)圖片描述染色體的形狀？讓學(xué)生帶著問題讀書，觀察多媒體圖片時(shí)，分析問題：什么是染色體？染色體命名由來？DNA是否就是染色體？DNA和染色體的關(guān)系？染色體結(jié)構(gòu)十分微觀、抽象，利用圖片資料，學(xué)生結(jié)合圖片資料、文字資料和問題，小組內(nèi)發(fā)揮主體性的討論探究。通過DNA是否就是染色體這個(gè)問題，學(xué)生在矛盾思維中，分析、討論，染色體中不但有DNA，還含有蛋白質(zhì)。

2.利用表格分析染色體數(shù)目特點(diǎn)

出示下表，分析表格中數(shù)據(jù)，得出何種結(jié)論？

不同物種的染色體數(shù)目表

學(xué)生根據(jù)表格數(shù)據(jù)，能很輕松地得出結(jié)論：不同種類生物染色體數(shù)目不同。那么，這些生物的染色體有何共同點(diǎn)呢？學(xué)生得出：每種生物染色體的數(shù)目均為偶數(shù)。還有的學(xué)生聯(lián)系上面所學(xué)，回答：都含有蛋白質(zhì)和DNA。甚至有學(xué)生根據(jù)米歇爾發(fā)現(xiàn)核酸的故事，得出染色體的元素構(gòu)成都是C、H、O、N、P。

3.設(shè)計(jì)問題剖析染色體在體細(xì)胞中的存在形式

問題1：人體細(xì)胞內(nèi)含有多少條染色體？為什么寫成23對(duì)？水稻的體細(xì)胞也寫成12對(duì)。那么設(shè)問：能否據(jù)此推測(cè)生物體細(xì)胞中染色體是成對(duì)存在的。教師補(bǔ)充：體細(xì)胞的染色體并非成對(duì)存在，在特殊的細(xì)胞中和特殊的時(shí)期，即形成生殖細(xì)胞的細(xì)胞在減數(shù)分裂的某個(gè)時(shí)期染色體會(huì)配對(duì)。適時(shí)拋出問題2，引發(fā)思考：為什么書本上體細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目都寫成成對(duì)形式。生殖細(xì)胞內(nèi)能否成對(duì)存在？聯(lián)系自身，你體內(nèi)的46條染色體，有幾條是母親給你的？幾條是父親給你的。

細(xì)胞核范文第4篇

【摘要】 目的 研究抑膠素對(duì)大鼠腦膠質(zhì)瘤增殖細(xì)胞核抗原的影響。方法 采用鼠腦立體定向的方法建立大鼠腦膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型并進(jìn)行分組：抑膠素不同濃度實(shí)驗(yàn)組(Ⅰ：8 μg/kg;Ⅱ：16 μg/kg;Ⅲ：32 μg/kg;Ⅳ：64 μg/kg)、對(duì)照組，于治療14 d后計(jì)算瘤體變化，應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)，觀察瘤細(xì)胞增殖變化情況。結(jié)果 抑膠素Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組對(duì)C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞有顯著抑制作用，其瘤體積及抑瘤率與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P

【關(guān)鍵詞】 抑膠素;腦膠質(zhì)瘤;增殖細(xì)胞核抗原

神經(jīng)膠質(zhì)瘤是發(fā)生于神經(jīng)外胚層的腫瘤，是顱內(nèi)腫瘤中最常見的一種，因其侵襲性生長的特性，手術(shù)難以完全切除，復(fù)發(fā)率極高，因此，尋求一種高效低毒、特異性高、不易發(fā)生耐藥的抗膠質(zhì)瘤藥有重要意義。抑膠素(antigliomatin)作為一種特異性氯離子通道阻滯劑，是一種蝎毒素多肽。為觀察其抑瘤效應(yīng)及探討其抗腫瘤的作用機(jī)制〔1〕，本研究觀察了其對(duì)大鼠腦膠質(zhì)瘤形態(tài)學(xué)的影響及對(duì)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原的作用。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 大鼠C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株是由雄性大鼠靜脈注射硝甲基脲而誘發(fā)產(chǎn)生的惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞株。本實(shí)驗(yàn)所用的瘤株由吉林大學(xué)病理毒理學(xué)教研室提供。抑膠素由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理教研室提供。動(dòng)物選用雄性、健康Wistar大鼠50只，鼠齡6～8 w，體重200～250 g，由高新技術(shù)開發(fā)區(qū)動(dòng)物中心提供。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)〔2〕 將C6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株復(fù)蘇成功后，接種于25 cm2培養(yǎng)瓶中，采用單層貼壁培養(yǎng)法。將復(fù)蘇后的C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞加入含10%滅活小牛血清的IMDM培養(yǎng)液中，置于含5%CO2、37℃恒溫密閉式孵箱中培養(yǎng)，每周傳代2次。當(dāng)細(xì)胞增殖進(jìn)入對(duì)數(shù)階段，培養(yǎng)瓶細(xì)胞長滿時(shí)，先倒去培養(yǎng)液，用0.25%胰酶溶于不含Ca2+、Mg2+的磷酸鹽緩沖液中消化細(xì)胞，在顯微鏡下觀察到細(xì)胞開始皺縮時(shí)加入營養(yǎng)液中和，反復(fù)吹打，使之脫壁，1 000 r/min離心5 min，棄上清，制成細(xì)胞懸液。體外培養(yǎng)的C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞爬片常規(guī)應(yīng)用免疫組化(SABC法)檢測(cè)GFAP蛋白的表達(dá)，陽性細(xì)胞胞漿呈現(xiàn)棕黃色著染。

1.3 接種方法 收集對(duì)數(shù)生長期生長狀態(tài)良好的C6細(xì)胞，細(xì)胞濃度為2.0×106/10 μl，經(jīng)MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率達(dá)90%以上。以2.0×106個(gè)細(xì)胞/只鼠的量接種，所有的大鼠均采用立體定向方法進(jìn)行接種。根據(jù)Barker法確定切口和鉆孔位置，在大鼠腦立體定位儀上選取大鼠腦右側(cè)尾狀核區(qū)為靶點(diǎn)，從頭部正中矢狀面交點(diǎn)向后縱向切開皮膚，暴露顱骨標(biāo)志，按前述坐標(biāo)點(diǎn)定位，用牙科鉆在顱骨上鉆孔，孔徑1.2 mm，用10 μl的微量注射器針頭銳性刺破硬膜在立體定向引導(dǎo)下接種針垂直緩慢延伸至硬膜下6.0 mm，再后延1.0 mm于硬膜下5.0 mm靶點(diǎn)處，將10 μl細(xì)胞懸液以1 μl/min緩慢注入靶區(qū)，留針5 min，使細(xì)胞充分沉積，縫合頭皮。每只大白鼠每天給予青霉素10萬U腹腔注射共5 d以預(yù)防感染。

1.4 動(dòng)物分組 荷瘤7 d后將全部Wistar大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只。以不同濃度抑膠素灌胃治療14 d，具體如下：(1) 空白對(duì)照組：用生理鹽水對(duì)照;(2)實(shí)驗(yàn)組：抑膠素不同濃度組(Ⅰ：8 μg/kg;Ⅱ：16 μg/kg;Ⅲ：32 μg/kg;Ⅳ：64 μg/kg)。

1.5 觀察用藥前后腫瘤體積變化、計(jì)算抑瘤率 用藥后活體灌注4%多聚甲醛固定腫瘤標(biāo)本，沿腦表接種穿刺點(diǎn)做冠狀切口，測(cè)量腫瘤大小，腫瘤體積=a2×b×π/6(a為腫瘤的短徑，b為腫瘤的長徑)。抑瘤率=(對(duì)照組腫瘤的平均體積-實(shí)驗(yàn)組腫瘤的平均體積)/對(duì)照組腫瘤的平均體積×100%，抑制率≥30%為腫瘤對(duì)藥物敏感。

1.6 免疫組化染色檢測(cè)增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)蛋白 采用SABC法，石蠟切片脫蠟至水，3%雙氧水阻斷10 min，微波修復(fù)抗原10 min。10%正常山羊血清封閉非特異性抗原室溫下60 min。傾去血清，加1∶100稀釋的PCNA，置濕盒內(nèi)4℃過夜。PBS沖洗5 min×3次，滴加生物素化二抗工作液，加蓋濕盒內(nèi)室溫下60 min。PBS振洗5 min×3次。加入SABC復(fù)合物，室溫下60 min，PBS振洗5 min×4次。DAB顯色液顯色。蘇木素襯染3 min。自來水沖洗，酒精水化，二甲苯透明，中性樹膠封片。正常腦組織為正常對(duì)照，結(jié)果以胞核或(和)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，高倍視野下(400倍)陽性細(xì)胞數(shù)所占總腫瘤細(xì)胞的百分率即為PCNA標(biāo)記指數(shù)(LI)。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS統(tǒng)計(jì)分析軟件，計(jì)量資料采用x±s表示，并計(jì)算抑瘤率，然后進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 實(shí)驗(yàn)大鼠的腫瘤體積和抑瘤率的變化 活體灌注4%多聚甲醛固定腫瘤標(biāo)本，沿腦表接種穿刺點(diǎn)做冠狀切口，測(cè)量腫瘤大小，計(jì)算出各實(shí)驗(yàn)組的抑制率，并與對(duì)照組做比較，用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)兩總體均數(shù)比較的t檢驗(yàn)對(duì)所測(cè)得的腫瘤體積大小進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理、分析。由表1可以看出：實(shí)驗(yàn)組Ⅰ腫瘤體積與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.86，P>0.05);實(shí)驗(yàn)組Ⅱ～Ⅳ與對(duì)照組相比有顯著差異(P

2.2 PCNA免疫組化結(jié)果分析 PCNA陽性細(xì)胞的胞核呈黃色或棕黃色，鏡下計(jì)數(shù)腫瘤內(nèi)5個(gè)視野的陽性細(xì)胞。對(duì)照組腫瘤細(xì)胞中PCNA蛋白陽性表達(dá)率平均為72.18%，表現(xiàn)為陽性細(xì)胞密度高，胞核呈強(qiáng)陽性，數(shù)量多。經(jīng)抑膠素治療后即可見腫瘤內(nèi)PCNA陽性細(xì)胞密度下降，核PCNA陽性強(qiáng)度減弱，隨濃度增加陽性率呈下降趨勢(shì)。實(shí)驗(yàn)組Ⅱ～Ⅳ PCNA指數(shù)較對(duì)照組有顯著差異(P0.05)，其余各組兩兩比較有顯著性差異(P

3 討 論

抑膠素的有效成分是氯毒素(chlorotoxin)，有研究表明Cl通道參與了星形細(xì)胞瘤生長的調(diào)控〔3〕;1998年，Soroceanu等〔4〕報(bào)道了氯毒素多肽在神經(jīng)膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型上靶向腦瘤組織的研究。結(jié)果顯示，動(dòng)物注射125I和131I標(biāo)記的氯毒素后，放射性選擇性地累積在動(dòng)物腦部的腫瘤內(nèi)。以上結(jié)果表明，由于GCC在人體神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中選擇性產(chǎn)生，且產(chǎn)生量與腫瘤的惡化程度呈正相關(guān)。Sontheimer〔5〕將放射性的碘和一種植物毒素連接在氯毒素上，借助氯毒素的特異靶向作用將它們帶到神經(jīng)膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型腫瘤內(nèi)，結(jié)果藥物只選擇性殺死腫瘤。目前，尚未見國內(nèi)使用研制開發(fā)的氯毒素類物質(zhì)對(duì)C6鼠腦膠質(zhì)瘤作用的研究報(bào)道，因此對(duì)于此類藥物的研究及開發(fā)具有廣闊的應(yīng)用前景。本研究結(jié)果顯示，不同濃度抑膠素組均有抑制瘤體生長作用，其中實(shí)驗(yàn)Ⅰ組腫瘤體積及抑瘤率與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;實(shí)驗(yàn)Ⅱ～Ⅳ組與對(duì)照組相比有顯著差異，并且隨抑膠素濃度增大，瘤體積縮小越明顯，抑瘤率也隨抑膠素濃度增高而增加，提示抑膠素具有抑制腫瘤生長作用。

PCNA是一種分子量為36 kD的多肽，僅在增殖細(xì)胞中合成與表達(dá)，在細(xì)胞周期S期合成最高，是存在于細(xì)胞核內(nèi)的酸性蛋白，其表達(dá)水平與細(xì)胞的增殖有關(guān)，目前認(rèn)為它是S期細(xì)胞的標(biāo)志物。用免疫組化方法標(biāo)記PCNA，并通過計(jì)數(shù)其陽性細(xì)胞而得到的PCNA指數(shù)被認(rèn)為是評(píng)價(jià)和反映細(xì)胞增殖水平的客觀指標(biāo)。PCNA指數(shù)越高，意味著處于S期的細(xì)胞越多，亦即染色體排列紊亂的危險(xiǎn)性愈高〔6〕。因此PCNA被用于研究惡性腫瘤的細(xì)胞增殖和判斷其惡性程度，它對(duì)腫瘤的治療及預(yù)后的判斷有重要意義。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)抑膠素治療后即可見腫瘤內(nèi)PCNA陽性細(xì)胞密度下降，核PCNA陽性強(qiáng)度減弱，隨濃度增加陽性率呈下降趨勢(shì)。實(shí)驗(yàn)Ⅱ～Ⅳ組PCNA指數(shù)較對(duì)照組有顯著差異。而實(shí)驗(yàn)Ⅰ組與對(duì)照組PCNA蛋白表達(dá)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。推測(cè)抑膠素抑制腫瘤增殖的機(jī)制可能是抑制PCNA合成與表達(dá)，從而也就抑制了DNA合成，由此阻止腫瘤細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的復(fù)制，抑制細(xì)胞有絲分裂。

本研究明確了抑膠素對(duì)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的抑制、殺傷作用，并且其作用機(jī)制之一可能與抑制PCNA合成與表達(dá)而阻止腫瘤細(xì)胞和細(xì)胞核的復(fù)制有關(guān)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為今后進(jìn)一步深入研究抑膠素及開發(fā)應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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細(xì)胞核范文第5篇

【關(guān)鍵詞】增殖細(xì)胞核抗原標(biāo)記物；腺樣囊性癌；免疫組化

文章編號(hào)：1009-5519（2007）10-1423-02 中圖分類號(hào)：R78 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

腺樣囊性癌（adenoid cystic carcinoma，ACC）亦稱“圓柱瘤”（cylindroma），是較常見的唾液腺惡性腫瘤之一，該腫瘤細(xì)胞增殖比較活躍，具有嗜神經(jīng)侵襲性，術(shù)后容易復(fù)發(fā)。增殖細(xì)胞核抗原標(biāo)記物(Ki-67)是反映細(xì)胞增殖狀態(tài)的一種蛋白質(zhì)，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后均有一定的相關(guān)性，是反映腫瘤細(xì)胞增殖比率的生物學(xué)指標(biāo)之一。目前國內(nèi)外對(duì)Ki-67與ACC的相關(guān)性研究少見報(bào)道，本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法測(cè)定Ki-67在ACC組織中的表達(dá)，旨在探討ACC腫瘤細(xì)胞的增殖特點(diǎn)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：54例腺樣囊性癌組織均取自我院1988～2005年間收治的ACC患者手術(shù)切除蠟塊，其中男26例，女28例。年齡23－69歲，中位年齡48歲。根據(jù)2002年UICC涎腺癌、口腔癌和上頜竇癌的國際標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)54例ACC作臨床分期，其中Ⅰ期10例，Ⅱ期23例，Ⅲ期13例，Ⅳ期8例。根據(jù)2005年WHO涎腺腫瘤組織病理學(xué)的分類標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)腫瘤組織作病理分類，其中腺樣-管狀型41例，實(shí)性型13例。所有病例均經(jīng)病理學(xué)確診證實(shí)。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及方法：常規(guī)行5 μm切片，Ki-67抗體免疫組化，DAB染色。第一抗體Ki-67及S-P實(shí)驗(yàn)試劑盒均購于福州邁新公司。免疫組化實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，采用邁新公司提供的已被證實(shí)的乳腺癌陽性片作為陽性對(duì)照，陰性對(duì)照采用PBS液代替一抗，并與實(shí)驗(yàn)組切片在同一條件下同時(shí)進(jìn)行DAB顯示劑染色。

1.3 結(jié)果判斷：采用德國萊卡病理圖像分析儀DMR+Q550型進(jìn)行圖像分析，胞核著色呈棕黃色顆粒者為陽性細(xì)胞。低倍鏡（10×10）下選取5-10個(gè)染色清晰、陽性細(xì)胞數(shù)相對(duì)密集的區(qū)域，高倍鏡（40×10）下觀察1 000個(gè)腫瘤細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞所占的百分比為增殖指數(shù)(Proliferation index，PI)。PI按數(shù)值可分為4個(gè)等級(jí)，30％為Ⅳ級(jí)。Ⅰ、Ⅱ級(jí)視為低表達(dá)，Ⅲ、Ⅳ視為高表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析：數(shù)據(jù)處理應(yīng)用SPSS for windows 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，不同組間PI數(shù)值的比較采用t檢驗(yàn)，以P

2 結(jié)果

Ki-67在54例ACC組織中均有不同程度的表達(dá)，表達(dá)率為100%。陽性產(chǎn)物定位于腫瘤細(xì)胞的胞核中，呈棕黃色，處于不同細(xì)胞周期的胞核染色強(qiáng)度可有不同。陽性細(xì)胞在ACC組織中大多呈彌散分布，癌旁的正常涎腺組織偶可見到陽性細(xì)胞（見圖1、2）。

Ki-67的表達(dá)與患者的性別、年齡及腫瘤的病變部位無明顯相關(guān)性（P>0.05）。與臨床分期呈正相關(guān)，隨著臨床分期的逐步增高，Ki-67的陽性表達(dá)率亦明顯增高，不同分期間PI值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

3 討論

Ki-67是Gerdes等從霍杰金氏病L-428細(xì)胞株的粗提核成分接種小鼠制備而來的單克隆抗體，它只與增生細(xì)胞核起反應(yīng)，編碼Ki-67蛋白的人類基因位于10q25。其功能目前認(rèn)為與細(xì)胞有絲分裂有關(guān)，在G1后期出現(xiàn)，S、G2期升高，M期達(dá)峰值，G0期消失，能有效地反映細(xì)胞增殖狀態(tài)，已經(jīng)證實(shí)與細(xì)胞增殖、病變惡性程度密切相關(guān)[1，2]。近年來Ki-67開始用于腫瘤增殖動(dòng)力學(xué)研究，以評(píng)價(jià)腫瘤組織的生物學(xué)特性，其表達(dá)水平代表細(xì)胞的增殖狀態(tài)。