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1編寫細(xì)菌檢驗(yàn)手冊
檢驗(yàn)手冊的主要內(nèi)容應(yīng)包括標(biāo)本的采集和運(yùn)送、收發(fā)、核對(duì),培養(yǎng)基和試劑的制備及其性能鑒定,正確地選用細(xì)菌鑒定雙歧索引和流程表以及編碼本,正確地選用藥敏試驗(yàn)的方法等。手冊要不斷更新和修訂。
2監(jiān)測儀器,保證正常運(yùn)轉(zhuǎn)
細(xì)菌室的主要儀器包括:高壓滅菌器、干熱滅菌器、孵育箱、水浴箱、冰箱、厭氧箱(罐)、CO2箱、生物安全箱等,本文僅介紹孵育箱、厭氧箱和CO2箱。孵育箱其溫度應(yīng)保持在35℃,因有的細(xì)菌超過37℃生長不好,甚至死亡。如腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌等,前者40℃、后者41℃不生長。有些國家用肺炎鏈球菌作為孵育箱溫度是否合格的質(zhì)控菌株。另外,其濕度應(yīng)保持在40%~50%,以利細(xì)菌的生長。
3培養(yǎng)基的質(zhì)量控制培養(yǎng)
基來源要可靠,各個(gè)成分中不應(yīng)含有對(duì)目的菌生長的抑制物。每批培養(yǎng)基在用于臨床標(biāo)本的分離鑒定之前,都應(yīng)做性能試驗(yàn)。培養(yǎng)基按使用目的的不同,可分為增菌培養(yǎng)基、分離培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。
4標(biāo)本質(zhì)量的控制
4.1培養(yǎng)之前標(biāo)本質(zhì)量的評(píng)價(jià)雖然要盡量做到標(biāo)本采集的標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)控,但有些標(biāo)本收到時(shí)已大量污染了與感染無關(guān)的常在菌和定植菌。標(biāo)本直接涂片革蘭氏染色鏡檢有助于檢查下呼吸道標(biāo)本是否被咽部污染,也可以識(shí)別采自傷口、中耳和子宮內(nèi)膜滲出物是否被污染。當(dāng)直接涂片鏡檢有大量鱗狀上皮細(xì)胞時(shí),指示有來自皮膚或口腔黏膜的污染,這種標(biāo)本不宜做細(xì)菌培養(yǎng),除非懷疑子宮內(nèi)膜炎時(shí)試圖從子宮內(nèi)膜和宮頸標(biāo)本中分離淋病奈瑟菌(使用選擇分離培養(yǎng)基)。某些類型的標(biāo)本由于經(jīng)常出現(xiàn)常在菌、定植菌和與感染關(guān)系不明的細(xì)菌混合感染,因此試圖從此類標(biāo)本中得到有用的微生物方面的信息常常是浪費(fèi)勞動(dòng)。
4.2提高送檢標(biāo)本質(zhì)量,正確評(píng)價(jià)檢驗(yàn)結(jié)果臨床微生物專家要集中精力處理那些很可能從中獲得對(duì)臨床有用資料的標(biāo)本,限制處理那些臨床意義不肯定的標(biāo)本。因此需要限制處理那些被常在菌和定植菌污染的標(biāo)本。如鼻咽部取材培養(yǎng)除為了診斷百日咳價(jià)值不大,又如取自咽部的標(biāo)本常規(guī)應(yīng)檢查化膿性鏈球菌,根據(jù)醫(yī)生的要求也應(yīng)檢查白喉棒狀桿菌和淋病奈瑟菌。從成人或兒童鼻部和咽喉部檢出金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌和腸桿菌科各菌,不論是優(yōu)勢菌或純培養(yǎng)都不能確診為咽炎、中耳炎和下呼吸道感染,應(yīng)結(jié)合臨床資料進(jìn)行分析最后確診。要保證送檢標(biāo)本質(zhì)量,必須要制定和執(zhí)行送檢標(biāo)本的有關(guān)規(guī)定,并得到臨床醫(yī)護(hù)工作人員的支持和配合。只有質(zhì)量合格的標(biāo)本,才能從其檢驗(yàn)結(jié)果中獲得對(duì)患者診斷和治療最有用的資料。
5質(zhì)控用標(biāo)準(zhǔn)菌株
搞好臨床細(xì)菌學(xué)質(zhì)控,必須要有一批在形態(tài)、生理、生化及血清學(xué)特性保持相當(dāng)穩(wěn)定的可靠菌株,作為對(duì)儀器、培養(yǎng)基、染色劑、試劑和診斷血清的質(zhì)控菌株,也可作為培訓(xùn)檢驗(yàn)人員熟悉某些菌株的教材,制備診斷用抗血清和測定商品抗血清的效價(jià)。
6臨床細(xì)菌檢驗(yàn)記錄單的設(shè)計(jì)和應(yīng)用
6.1堅(jiān)持做檢驗(yàn)記錄的必要性檢驗(yàn)記錄是客觀反映檢驗(yàn)質(zhì)量的素材,可及時(shí)發(fā)現(xiàn)檢驗(yàn)工作中的問題,有利于做好質(zhì)量控制。保證發(fā)出檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性,增強(qiáng)檢驗(yàn)人員對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的自信心,也是考察檢驗(yàn)人員工作的客觀依據(jù)之一。
6.2檢驗(yàn)記錄單的設(shè)計(jì)要求檢驗(yàn)記錄單是記載和評(píng)論檢驗(yàn)工作質(zhì)量的資料,各個(gè)項(xiàng)目要組織合理,記載和注釋檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)盡量簡要,使參與記錄人員一看就懂,要使用含意確切的詞或縮寫字,避免使用含混的名詞。各項(xiàng)目應(yīng)留有足夠的空隙,以便填寫相應(yīng)的內(nèi)容。
6.3檢驗(yàn)記錄單的種類和應(yīng)用檢驗(yàn)記錄單包括:送檢申請單、細(xì)菌分離、鑒定、藥敏試驗(yàn)記錄單,各種儀器使用情況記錄單,培養(yǎng)基、試劑、染液以及診斷血清等質(zhì)控記錄單,菌種保存記錄單等。這些記錄可作為檢查檢驗(yàn)質(zhì)量的依據(jù)。培養(yǎng)和訓(xùn)練技術(shù)人員的教材,總結(jié)檢驗(yàn)工作經(jīng)驗(yàn)的資料,鼓勵(lì)和推動(dòng)檢驗(yàn)人員改進(jìn)工作。
作者:鄧曉鑫單位:黑龍江省邊防總隊(duì)醫(yī)院