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有意思的電影范文第1篇

一、 曹少U：死亡游戲發(fā)起者與操控者

由古天樂飾演的曹瑛之子曹少U是電影中的大反派，是個(gè)以殺人為樂的惡魔，他在影片開始時(shí)血洗石頭城就充分體現(xiàn)出了其狂妄兇殘的本性。后進(jìn)入普城，他因連殺三人而被楊克難帶領(lǐng)的普城保衛(wèi)團(tuán)拿下并判處死刑。曹少U手下的上校張亦（吳京飾）帶領(lǐng)軍隊(duì)出現(xiàn)并亮明其少帥的真實(shí)身份，要求放人，但無濟(jì)于事。楊克難堅(jiān)持殺人償命的原則拒不放人，這時(shí)曹少U心生一計(jì)，準(zhǔn)備掀起一場殺人游戲以愚弄全城百姓。他命令張亦離開，并極為自信地肯定明日一早楊克難必然會親自放他出去。上校張亦也放出口風(fēng)：給保衛(wèi)團(tuán)一天時(shí)間考慮，明早如若少帥有絲毫差池，普城百姓將面臨滅頂之災(zāi)。這一恐嚇與威脅嚇得百姓惶惶不可終日，而身為罪犯的曹少U卻如局外人一般自得其樂，冷眼旁觀著這些小人物如履薄冰的窘態(tài)。

曹少U為何會穩(wěn)操勝券，認(rèn)為這次游戲的贏家一定是自己？正如他在普城的一小面館中提到的：“有強(qiáng)權(quán)就沒有公理，有權(quán)的時(shí)候，別人就會怕你；不怕你的，那就是死路一條?！彼运嘈艔?qiáng)權(quán)之下無公理，如若一定要有，自己就是法的亂世歪理。曹少U之所以秉持著這條信念不動搖，其實(shí)最為根本的就是他對人本性的深刻洞察力。他知道普城百姓面對強(qiáng)權(quán)、面對危險(xiǎn)時(shí)內(nèi)心的恐懼與自私，他們不會冒著滅頂之災(zāi)的危險(xiǎn)去堅(jiān)持所謂公平正義原則，即便有個(gè)別像楊克難那樣的人，也難逃民眾的意愿或者妥協(xié)，或成為眾矢之的，如若這樣他正可以借民眾之手將其殺死。因此，曹少U雖身在牢獄中，卻操控著整場游戲的發(fā)展進(jìn)程與方向，他之所以成功正是有效利用了人性本色的黑暗面來綁架了全城的百姓，牢中上吊這場戲正是一種對普城百姓的試探?？吹剿麄兙o張害怕的模樣，曹少U更進(jìn)一步驗(yàn)證了自己推斷的正確性，所以他才敢拿自己的生命作為成本來與全城百姓玩這場刺激的死亡游戲。

二、 普城百姓：死亡游戲被動接受者

據(jù)上文分析，曹少U之所以提出“強(qiáng)權(quán)之下無公理”的理論，堅(jiān)信自己會是整場游戲的勝利方，普城百姓在其中可謂功不可沒，他們?nèi)诵援?dāng)中的脆弱、恐懼與自私恰恰成為了曹少U打贏整場游戲的最大王牌。而這些人性缺陷歸根到底指的就是普通大眾在強(qiáng)權(quán)下的奴性服從意識。

所謂奴性，從本質(zhì)上講，可以理解為“通過低調(diào)的自我呈現(xiàn)，來規(guī)避權(quán)威、自由，以順服強(qiáng)的內(nèi)外控制過程，它是文化背景、個(gè)體特征和情景交互作用的結(jié)果，也是利益與情感共同驅(qū)使的?！盵1]由于我國幾千年來封建專制王朝的壓迫，使得民眾奴性的服從意識根深蒂固。這在電影《危城》中顯而易見地體現(xiàn)了出來。

當(dāng)惡少曹少U血洗石頭城，逼得石頭城老百姓流離失所，逃難到普城時(shí)，普城村民卻因自身利益不準(zhǔn)他們進(jìn)城，直到保衛(wèi)團(tuán)團(tuán)長楊克難出現(xiàn)，以曉之以情動之以理的勸說，村民才聽取了團(tuán)長的意見，對難民伸出了援助之手。這一小小的細(xì)節(jié)，為電影的后續(xù)展開打下了小小的鋪墊――在個(gè)人利益面前，同情心貌似顯得無足輕重；緊接著，主角曹少U入場，一進(jìn)普城就槍殺三條人命，這一事件激起了民憤，普城百姓義憤填膺，聚集在一起強(qiáng)烈要求團(tuán)長“殺人償命”“槍斃殺人兇手”，本地鄉(xiāng)紳劉老板也叫囂著要將殺人犯就地執(zhí)行，當(dāng)楊團(tuán)長順從民意決定明早對曹少U執(zhí)行死刑時(shí)，所有百姓都拍手叫好，一股正義凜然之氣充斥在整個(gè)普城上空，但時(shí)間并未持久。上校張亦帶領(lǐng)軍隊(duì)沖進(jìn)普城，亮明罪犯是曹少帥的真實(shí)身份后，所有百姓議論紛紛、一片愕然。當(dāng)聽到張少校揚(yáng)言，如若少帥被殺，所有人將要為其陪葬時(shí)，百姓的緊張、畏懼溢于言表，之前的浩然正氣蕩然無存。本地鄉(xiāng)紳劉老板第一個(gè)要求楊克難放人，并要求向罪犯曹少U磕頭認(rèn)錯(cuò)，這被克難一口回絕，支持將兇手就地正法的民眾也有了動搖傾向，目光復(fù)雜地望著楊團(tuán)長，這與之前的場景形成了鮮明的對比與諷刺。

隨著指定放人的時(shí)間一步步逼近，為了規(guī)避死亡、明哲保身，群眾的倒戈傾向越來越明顯：劉老板在木橋設(shè)下重重埋伏，要取楊克難性命；克難的好兄弟阿廖替全村人向克難請命，請求跪下認(rèn)錯(cuò)以保太平；甚至全村的人都集體跪下給其施壓，要求放人。最終楊克難為順民意被迫妥協(xié)，曹少U成功放出。此時(shí)的克難想要用自己的命換百姓的命，但當(dāng)他即將被曹殺死時(shí)，如此生死存亡的關(guān)鍵時(shí)刻，百姓為求自保竟選擇以沉默作為回應(yīng)。可結(jié)局還是正如克難所預(yù)料，低頭不只會背棄公義，而且不會逃避死亡。曹少U出獄后，要求殺光普城所有百姓，而此時(shí)普城人手中沒有了唯一的籌碼，只能如魚肉般任人宰割。

一場由惡人發(fā)起的游戲，成功地將普城百姓的人性本質(zhì)顯現(xiàn)地淋漓盡致，他們最終沒有承受住考驗(yàn)。所謂的公平正義、所謂的原則，只有在不涉及自身的安危時(shí)，他們才會呼吁，而在強(qiáng)權(quán)面前，為了自保、為了安穩(wěn)太平，他們可以毫無原則地放棄是非判斷，放棄三個(gè)無辜受戕害的人以及自己團(tuán)長的性命。因而所謂的“危城”到底是因何而危？我想“?！钡牟粌H僅是因?yàn)閻耗Р苌賃的屠城，更多的是民心。

三、 楊克難：死亡游戲的真正贏家

由劉青云飾演的保衛(wèi)團(tuán)團(tuán)長羈四眩是電影中最正義凜然的硬漢，是正能量的傳遞者。他在這場死亡游戲里是真正的贏家，而他手中的唯一王牌就是“死亡”，他堵上自己的性命最終換回了“公義”的存在，正如其所說“做人要憑良心”。而他為了堅(jiān)守這份心中的道義和信念，卻幾經(jīng)曲折，歷經(jīng)生死、離別之煎熬。

面對上校張亦的恐嚇威脅，他堅(jiān)守“殺人犯就該懲處”的做事原則；面對本地鄉(xiāng)紳的相勸，他毅然決然地一口回絕；面對自己的手下光仔被殘害，他仍不改初心；面對出生死共患難好兄弟阿廖的口苦婆心，他亦堅(jiān)守本心，不做顛倒是非黑白之惡事。因?yàn)樗兰幢愎蛳?，即便屈服，事情同樣無法得到解決，像他所說“我們不是奴隸，是普城的主人”，退讓與屈服，不僅讓普城的子子孫孫成為奴隸，而且面對殺人惡魔曹少U，越退縮、越恐懼反而會死得越慘，因而放與不放都已經(jīng)是普城難以逃脫的劫難，只有以死相搏，可能還會換回一絲求生的希望。但普城百姓不懂，他們懷著僥幸心理請求楊克難放人，沉浸在失去親朋痛苦中還未來得及喘息的團(tuán)長，再次被鄉(xiāng)親們逼上了絕路。為了堅(jiān)守自己做人的基本原則，克難被迫妥協(xié)，辭去了團(tuán)長一職。但自己心中所堅(jiān)持的“公義”卻沒有因此放棄，他打發(fā)自己的妻女與手下離開，選擇獨(dú)自留在普城，用自己的性命來護(hù)整城百姓的周全。

這個(gè)武功高強(qiáng)，集明智、強(qiáng)悍、仁愛于一體的團(tuán)長，為了保護(hù)自己的家園與百姓，為了背負(fù)起自己的職責(zé)與使命，在死亡與原則的抉擇上，他雖害怕前者，卻還是毅然決然地守住了原則，堵上了性命，成功地通過了這場考驗(yàn)人性的死亡測驗(yàn)。最終被曹兵殺戮的百姓幡然頓悟，開始一致對外，連俠客隱士馬峰（彭于晏飾）也被楊克難的俠義與氣節(jié)深深震撼，加入到了熱血御敵的隊(duì)伍當(dāng)中。影片結(jié)局，殺人惡魔曹少U，漸漸失去了這場死亡游戲的操控權(quán)，慘死在了百姓的刀槍棍棒之中。

正如電影中所反復(fù)陳述的主題――“公義有人去做才存在”，保衛(wèi)團(tuán)團(tuán)長楊克難就是用實(shí)踐證明了這條理論的真實(shí)性與可靠性，他不僅給強(qiáng)權(quán)濫用的人敲響了警鐘，而且在生死抉擇中更是彰顯了他人性的光輝。

有意思的電影范文第2篇

Abstract: Taking the Tienyou Grand Hotel of Haikou as an example, the article analyzes the impact of construction of "international tourism island" on the marketing of hotels in Hainan Province and some hotel marketing strategies.

關(guān)鍵詞：國際旅游島；酒店；營銷；影響

Key words: international tourism island；hotel；marketing；impact

中圖分類號：F274 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1006-4311（2011）25-0060-01

1 酒店簡介

海南?？谔煊哟缶频暝麨槿A運(yùn)凱萊大飯店。酒店位于?？诿利愇骱０?，毗鄰西海岸高爾夫俱樂部、美視高爾夫球會和假日海灘。酒店客房能從不同角度欣賞到平靜寬闊的瓊州海峽，房間內(nèi)設(shè)置寬帶上網(wǎng)接口，大堂酒廊及咖啡廳能實(shí)現(xiàn)無線寬帶上網(wǎng)，充分體現(xiàn)出飯店的商務(wù)智能化特色。?？谔煊哟缶频杲∩碇行奶峁┤娴目刁w設(shè)施。如戶外大型泳池、溫泉、香熏水療等，另外飯店的各式餐廳為客人提供豐富的餐飲選擇。?？谔煊哟缶频暝O(shè)有不同規(guī)模的各類會議室及最先進(jìn)的會議設(shè)施及視聽設(shè)備，能充分滿足不同類型的會議、宴會的需求還有各種完善的設(shè)施，如餐飲設(shè)施，休閑設(shè)施等。

2 國際旅游島對酒店?duì)I銷的影響

2.1 國際知名酒店可能入駐海南，加劇海南目前的市場競爭 作為全國唯一的熱帶島嶼，海南島擁有全國獨(dú)一無二的氣候、環(huán)境和旅游資源，旅游地產(chǎn)擁有獨(dú)特的發(fā)展優(yōu)勢。在國際旅游島建設(shè)的大背景下，寬松的政策等條件吸引了眾多世界知名酒店入駐海南。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前海南已經(jīng)建成的40個(gè)五星級酒店和正在建設(shè)的20個(gè)五星級度假酒店，絕大部分由國際品牌公司來管理，基本達(dá)到國際先進(jìn)水平。這樣無疑就大大增加了海南酒店間的競爭。

2.2 會增加來海南旅游的人數(shù)，從而增加酒店客源 據(jù)海南統(tǒng)計(jì)局調(diào)查顯示，2010年一季度，全省共接待旅游過夜人數(shù)738.99萬人次，比上年同期增長15.8%。旅游飯店客房開房率達(dá)70.7%，同比提高3.7個(gè)百分點(diǎn)。旅游收入86.17億元，同比增長36.2%。從以上數(shù)據(jù)可以看出，海南今年的客源較去年有了較大幅增長，而同時(shí)酒店的入住率也有提升，這無疑會增加酒店收入，加快酒店業(yè)發(fā)展。

2.3 客源來源多元化，酒店提供個(gè)勢在必行 國際旅游島的建設(shè)不僅吸引了一些追求新奇的觀光客，而且還吸引了很多來瓊考察的投資商，他們之間有團(tuán)隊(duì)出游的，也有個(gè)人出游的，有因公出行的，也有因私出行的，他們來海南很明顯有不同的目的和需求。這就對海南酒店的服務(wù)水平提出了更高要求，需要他們不斷的改進(jìn)服務(wù)水平，增加以顧客為中心的特色服務(wù)。

3 營銷建議

目前，天佑大酒店在旅游旺季并不存在客源不足的情況，現(xiàn)在主要解決的是如何保證旅游淡季的客源。為了達(dá)到這一點(diǎn)，我們可以從以下兩個(gè)大的方面入手：一是，加強(qiáng)酒店的市場推廣，增加酒店的知名度；二是，從酒店自身入手，增加其硬件設(shè)施水平和服務(wù)水平，做到“人無我有，人有我優(yōu)”。營銷策略如下：

3.1 加強(qiáng)與旅行社的聯(lián)系 在之前的關(guān)于旅游島建設(shè)對于海南的影響中提到了客源的增加，而這些客人之中有很大一部分是隨團(tuán)行動，因此與旅行社加強(qiáng)合作將會很好的助于提高酒店的入住率，特別是解決淡季客源問題。

3.2 加強(qiáng)與酒店各類物品供應(yīng)商的聯(lián)系，為客人提供優(yōu)質(zhì)服務(wù) 酒店對客人所提供的食、住、行、娛等服務(wù)的物質(zhì)條件最終都離不開各類供應(yīng)商的支持，與他們加強(qiáng)聯(lián)系對酒店為客人提供優(yōu)質(zhì)服務(wù)至關(guān)重要。

3.3 媒體推廣 酒店可以嘗試與媒體接觸，特別是一些知名媒體，借他們的力量向社會宣傳自己的酒店。以成都索菲特萬達(dá)大飯店為例。有報(bào)道如下：2010年4月25日，第41個(gè)地球日后的第一個(gè)周末，成都索菲特萬達(dá)大飯店積極響應(yīng)號召，與華西都市報(bào)、都江堰市林業(yè)局齊聚都江堰八一聚源高級中學(xué)，共赴綠色約會，為減少碳排放認(rèn)購并種下了“低碳樹”。?？谔煊哟缶频暌部梢越梃b他們的做法，通過這種緊扣時(shí)代、獨(dú)樹一幟的活動使媒體為酒店宣傳。對于酒店業(yè)來說，選擇節(jié)能減排、低碳環(huán)保，不僅能凸顯酒店企業(yè)的社會責(zé)任，為酒店塑造良好的社會形象，更能降低酒店運(yùn)營成本，大幅提升酒店企業(yè)的盈利能力，是一舉兩得的事情。

3.4 虛擬客房 現(xiàn)在是網(wǎng)絡(luò)時(shí)代，有很多人，特別是年輕人，喜歡在網(wǎng)上訂購房間，這樣做好網(wǎng)絡(luò)訂房的工作便顯得格外重要?，F(xiàn)在網(wǎng)上很多酒店在介紹自己的酒店時(shí)只是配上自己的圖片和文字說明，而視頻或是虛擬客房則很少見，如果酒店能夠在這方面“第一個(gè)吃螃蟹”，必能更好的服務(wù)顧客，贏得口碑。顧客只要在酒店主頁的醒目位置用鼠標(biāo)點(diǎn)擊按紐，屏幕會立刻從平面進(jìn)入一個(gè)立體空間。顧客就可以進(jìn)入酒店的“虛擬客房”進(jìn)行參觀，效果應(yīng)該是這樣的：在優(yōu)雅的背景音樂中，鏡頭隨著解說員的解說緩慢的移動，顯示客房全景，家具設(shè)備，房頂裝飾，地板花紋等等。展示完畢以后（當(dāng)然你也可有選擇地進(jìn)行參觀瀏覽）你還可以移動鼠標(biāo)查看新的服務(wù)項(xiàng)目，了解客房各項(xiàng)設(shè)施使用方法，甚至還可遠(yuǎn)眺窗外景色。如果顧客對所“參觀”客房很滿意的話就可以進(jìn)行確認(rèn)預(yù)訂。

3.5 特色服務(wù) 現(xiàn)在的人，特別是青年人都越來越追求個(gè)性，如果在網(wǎng)上預(yù)定客房時(shí)能接受客人的特殊服務(wù)要求，就能實(shí)實(shí)在在的為旅客提供一些獨(dú)一無二的服務(wù)必能贏得顧客的心，增加客源。為此，酒店在接受客人預(yù)定房間是可以應(yīng)客人要求對房間做一些更改，當(dāng)然這種更改不能是對客房大的更改，只是對一些擺設(shè)和其它的軟件設(shè)施做更改。在做這個(gè)時(shí)可以結(jié)合虛擬客房滿足客人要求，如果客人覺得有些地方還不大令自己滿意。如窗簾的顏色，風(fēng)屏的擺放同，樓層的高低等等。顧客只要把自己的要求輸入計(jì)算機(jī)，稍等片刻后酒店就會答復(fù)。如果顧客的要求酒店可以滿足的話，酒店將會再一次邀請顧客進(jìn)入“虛擬客房”。不過這一次顧客所看到的將是自己設(shè)計(jì)的客房，客房內(nèi)的一切都是按照顧客的意愿設(shè)計(jì)的。顧客也就有了一間真正屬于自己的客房。在做更改時(shí)可以增加一些房價(jià)，這樣既滿足了一些客人的特殊要求，又贏得了口碑、增加了收入。

3.6 網(wǎng)絡(luò)搜索引擎 現(xiàn)在酒店的搜索引擎技術(shù)不斷進(jìn)步，使用也越來越廣泛，搜索結(jié)果對客人選擇酒店有重要作用，如何設(shè)計(jì)搜索詞讓客人能快速的搜索到本酒店是一個(gè)值得思考的問題。

注釋：本文有關(guān)?？谔煊哟缶频甑馁Y料皆由網(wǎng)上查詢和閱讀其宣傳資料所得.

參考文獻(xiàn)：

有意思的電影范文第3篇

南都娛樂X雷德利?斯科特 & 邁克爾?法斯賓德

AI有情緒，人類很危險(xiǎn)

南都娛樂：全世界的朋友都非常希望看到《異形》，這一部的主題比之前的更大，請問這次為什么要選擇這樣一個(gè)題材呢？

雷德利?斯科特：《異形》是1979年拍的，一共有三部，他們沒有問到底是誰創(chuàng)造了這個(gè)怪物呢？人是從哪里出來的？我想到要用這樣一個(gè)方法即前傳的方式呈現(xiàn)出來，所以《普羅米修斯》里面就提到了這樣一個(gè)問題，到底它是怎么出來的？在《異形：契約》里頭回答了這個(gè)問題，下一步還有一部片子。

南都娛樂：邁克爾，你在電影中飾演的兩個(gè)仿生人是完全不同的，對你來說，扮演這兩個(gè)角色有什么樣的樂趣？

邁克爾?法斯賓德：其實(shí)再重演這個(gè)大衛(wèi)很有意思，在之前扮演大衛(wèi)我覺得是非常有意思的，它是一個(gè)AI的原型，一個(gè)仿生人，它有一些人性的元素，擁有這些元素很有意思。他有一些孵化的元素，沃爾特是《普羅米修斯》10年之后的仿生人，已經(jīng)改變了一些AI的結(jié)構(gòu)，他們認(rèn)為人性的特色是讓人比較不舒服的，所以把它制造得比較直接一點(diǎn)，比較像一個(gè)機(jī)器一樣。大衛(wèi)就像我說的，仿生人里頭比較有人的性格，看到他們在這十年當(dāng)中有哪些變化。

南都娛樂：這一次的主題講到造物者，還有被造出來新物種，他們之間會有敵意的，就你的觀點(diǎn)來看，AI會有靈魂嗎？

邁克爾?法斯賓德：這是一個(gè)很有意思的問題，我們講到造物者與被造物之間的敵意，從宗教來講人也是要敬畏上帝的，有一種罪惡感，或者有一種恐懼心。其實(shí)這是關(guān)于到底什么是真實(shí)存在的問題，比如說我說一個(gè)故事的話，這個(gè)故事里頭有它的真實(shí)性的，不管這個(gè)故事有沒有發(fā)生，如果AI有靈魂的話，對他來講這個(gè)靈魂就是真的。

雷德利?斯科特：我來補(bǔ)充一下好了，萬物是有一個(gè)等式的，你要設(shè)計(jì)一個(gè)AI，你要設(shè)計(jì)的到底能計(jì)算多少，如果你給他的信息太多的話，這個(gè)信息會構(gòu)成很多復(fù)雜性，復(fù)雜性就會有情緒，如果AI有情緒的話，你就控制不了它了，人類也是很危險(xiǎn)的，會造成很多的情緒。

南都娛樂：這代表您對于AI是有擔(dān)憂的嗎？

雷德利?斯科特：其實(shí)這種演化我是不擔(dān)心的，如果受到控制可以，如果超出控制的話，則避免沖突，所以你要怎么樣來避免它超出控制，而且到底它會造成什么樣的局面，以及對于政府來說，怎么去處理這些事情。希望這部片子里^能夠讓我們來思考，這些外星人他們到底是怎么創(chuàng)造出來，剛剛邁克爾提到創(chuàng)造出來的東西是有問題的，因?yàn)樵煳镎邌柋辉斐鰜淼男挛锓N，你會死我不會死，造物者太聰明了，比如他說“大衛(wèi)，你給我倒一杯茶”，大衛(wèi)會認(rèn)為你自己會倒茶呀，為什么不倒呢，他不應(yīng)該有這樣的情緒，如果這樣的話，這個(gè)AI已經(jīng)有要反抗的意思，是一個(gè)掠奪者了。

南都娛樂：兩位仿生人一個(gè)叫大衛(wèi)、一個(gè)叫沃爾特，在第一部《異形》到現(xiàn)在為止，曾經(jīng)有兩位制片人一直深度參與過這個(gè)系列，其中一位叫大衛(wèi)?蓋勒，一位是沃爾特?希爾，他們對初期的劇本創(chuàng)作很有貢獻(xiàn)，這是一個(gè)巧合嗎？還是您有意而為之？

雷德利?斯科特：這個(gè)部分上是有意這樣安排的，這兩位制片人對這兩個(gè)角色做出了貢獻(xiàn)，尤其是大衛(wèi)?蓋勒。是有意這么安排的。

南都娛樂：如果沒有看過之前的《異形》系列和《普羅米修斯》，直接看這部電影能順利理解和看懂這部電影嗎？

有意思的電影范文第4篇

[關(guān)鍵詞] 四物湯；醇沉工藝；總評“歸一值”；星點(diǎn)設(shè)計(jì)；效應(yīng)面

[中圖分類號] R943.4[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號]1673-7210（2009）01（c）-017-03

The Study on the ethanol precipitation techniques of Four Herbs Decoction by central composite design/response surface methodology

WU Yong1, HE Fu-yuan2, CAO Yan3, SUN Zhi-liang1, ZHANG Ming-jun1, PENG Tao1

(1.Hunan Agricultural University Veterinary Faculty, Changsha410128, China; 2.School of Pharmacy, Hunan University of TCM, Changsha410007, China; 3.Yueyang Polytechnical College, Yueyang414000, China)

[Abstract] Objective: To determine the optimized ethanol precipitation techniques of Four Herbs Decoction by applying central composite design/response surface methodology to the experiment design and evaluation index. Methods: The ethanol precipitation technique of Four Herbs Decoction was optimized by central composite design after selecting experiment factors such as extracta concentration, alcohol content, standing time, and evaluation index such as the content of extracta, catalpol, peoniflorin, ferulic acid. Then a better ethanol precipitation technique was determined according to binomial fitting and 3D-response surface graphs. Results: The regression coefficient of the nonlinear estimation was 0.898. According to the optimum experimental conditions, an overall desirability of 0.781 6 was obtained. The bias between observed and predicted values of the overall desirability of the optimum formulation was -1.20%. Conclusion: The ethanol precipitation techniques of Four Herbs Decoction can be optimized more better by central composite design/response surface methodology.

[Key words] Four Herbs Decoction; Ethanol precipitation techniques; Overall desirability; Central composite design;Response surface

中藥提取液所含成分復(fù)雜與眾多，所得浸膏量比較多，不利于制劑，故在控制指標(biāo)成分的前提下進(jìn)行調(diào)成適當(dāng)濃度的乙醇溶液除雜，同時(shí)使浸膏量減少便于制劑。四物湯是中醫(yī)補(bǔ)血、養(yǎng)血的經(jīng)典藥方[1]，方由當(dāng)歸、川芎、芍藥、熟地四味藥組成，其有效成分有阿魏酸、芍藥苷、梓醇等。在四物湯水提濃縮液的醇沉工藝中，清膏濃度比、含醇量和靜置時(shí)間對醇沉效果影響較大，故選取這三個(gè)因素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)考察。在醇沉工藝最優(yōu)因素篩選中，常需考察多個(gè)因素的多個(gè)水平，為減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)并考察因素間的相互作用，需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。采用固定其他因素改變某一因素的單因素考察法能收到一定效果，但條件優(yōu)選憑經(jīng)驗(yàn)，且無法考察各因素間的相互作用。因素水平數(shù)較少時(shí)可采用析因設(shè)計(jì)；較多時(shí)，需采用實(shí)驗(yàn)次數(shù)較少的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化法。國內(nèi)常用均勻設(shè)計(jì)和正交設(shè)計(jì)進(jìn)行優(yōu)化，但此兩種方法基于線性模型，因此實(shí)驗(yàn)精度不夠，建立的數(shù)學(xué)模型預(yù)測性較差，不適于二次以上多項(xiàng)式模型。而選用集數(shù)學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)方法于一體的效應(yīng)面優(yōu)化法進(jìn)行優(yōu)化，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)[2-6]，則適用于非線性模型的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的優(yōu)化，相關(guān)系數(shù)能有很大的提高；且能指出某一因素的取值方向，求得極值，最佳條件下效應(yīng)的預(yù)測值和實(shí)測值偏差較小。故采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面優(yōu)化法應(yīng)用于四物湯水提濃縮液的醇沉工藝，為中藥方劑醇沉工藝的研究提供一條新的途徑。

1 材料與儀器

Waters高效液相色譜儀，Waters1500泵，Waters 2487雙波長檢測器，Breeze工作站（美國Waters公司）；ZK-82A型真空干燥箱（上海實(shí)驗(yàn)儀器總廠）；RE52-99型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)；Adventure分析天平（美國Ohaus公司）；阿魏酸、芍藥苷、梓醇對照品（購于中國藥品生物制品檢定所），甲醇、乙腈為色譜純，蒸餾水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純。處方：熟地黃15 g、當(dāng)歸10 g、白芍10 g、川芎6 g，其中熟地、當(dāng)歸、白芍、川芎均購于湖南中醫(yī)藥大學(xué)附屬一院中藥房，并按照2005年版《中國藥典》進(jìn)行鑒定，符合標(biāo)準(zhǔn)。

2 醇沉工藝優(yōu)選

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

依處方比例稱取藥材，按提取優(yōu)選工藝條件進(jìn)行提取，合并水提液。濃縮后加無水乙醇調(diào)至所設(shè)計(jì)醇濃度，靜置一段時(shí)間后，抽濾，醇液濃縮至50 ml備用。以浸膏得率、阿魏酸含量、芍藥苷含量、梓醇含量為考察指標(biāo)來優(yōu)選醇沉工藝。

2.2 浸膏得率的測定

精密量取醇液10 ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，置于105℃干燥3 h，移至干燥器中，冷卻30 min，迅速精密稱定質(zhì)量，計(jì)算即得。

2.3 含量測定

2.3.1色譜條件Alltech Apollo C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），測定芍藥苷、阿魏酸、梓醇的流動相分別為：乙腈-0.1%磷酸（16∶84）、乙腈-0.1%磷酸（22∶78）、乙腈-0.1%磷酸（2∶98）；檢測波長分別為：230 nm、316 nm和210 nm；流速：1.0 ml/min；柱溫：40℃。

2.3.2 對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品12.5 mg、梓醇對照品16.0 mg、阿魏酸對照品10.5 mg，置于10 ml容量瓶，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，再分別取芍藥苷甲醇液、梓醇甲醇液1 ml于25 ml容量瓶中，阿魏酸甲醇液1 ml于50 ml容量瓶中，加甲醇搖勻定容至刻度，即得0.050 mg/ml的芍藥苷對照品溶液、0.064 mg/ml的梓醇對照品溶液、0.021 mg/ml的阿魏酸對照品溶液。

2.3.3 供試品溶液的制備與測定取25 ml容量瓶，加入甲醇定容至刻度，精密稱取干浸膏，置于其中，超聲20 min，靜置，取部分上清液離心，精密量取離心液1 ml于25 ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度配成0.08 g/ml，用0.45 μm微孔薄膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。精密吸取對照品與供試品溶液適量，注入高效液相色譜儀，測定峰面積，計(jì)算即得。

2.4 星點(diǎn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇對醇沉工藝影響較大的因素[7]，即清膏濃度、含醇量、靜置時(shí)間，根據(jù)星點(diǎn)設(shè)計(jì)，清膏濃度、含醇量、靜置時(shí)間三個(gè)自變量的水平極值分別為，X1(清膏濃度比)：1∶0.5～1∶3.0（1∶0.5表示1 ml濃縮液相當(dāng)于0.5 g處方藥材量），X2(含醇量)：40%～70%，X3（靜置時(shí)間）：8～24 h。水平的安排遵循任意兩個(gè)物理量之間的差值與對應(yīng)代碼之間差值成等比的原則。如以X3為例，代碼1所對應(yīng)的物理量N的求算：

(N-8)/(24-8)=[-1-(-1.732)]/[1.732-(-1.732)]，

N=[-1-(-1.732)]/[1.732-(-1.732)]×(24-8)+8=10.6

三個(gè)因素的取值見表1，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)見表2。以浸膏收率、阿魏酸含量、芍藥苷含量、梓醇含量為考察指標(biāo)來優(yōu)選醇沉工藝，因素水平安排見表3。

2.5 醇沉工藝數(shù)據(jù)處理

以所選因素清膏濃度、含醇量、靜置時(shí)間進(jìn)行醇沉工藝研究，以浸膏量、芍藥苷、梓醇和阿魏酸的含量為指標(biāo)，每個(gè)指標(biāo)均標(biāo)準(zhǔn)化為0～1之間的“歸一值”， 各指標(biāo)“歸一值”求算幾何平均數(shù)，得總評“歸一值”。公式如下:

OD=(d1d2…dk)1/k（K為指標(biāo)數(shù)）

對取值越小越好的因素和取值越大越好的指標(biāo)，分別采用Hassan 方法分別進(jìn)行數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換求“歸一值”dmin和dmax，公式如下：

dmin=(Ymax -Yi)/(Ymax-Ymin)

dmax=（Yi-Ymin）/（Ymax-Ymin）

各指標(biāo)歸一值及總評歸一值計(jì)算結(jié)果見表3。

以總評“歸一值”對各因素進(jìn)行多元線性回歸，r2=0.143，擬合度較低，用二項(xiàng)式：Y=b0＋b1X1＋b2X2＋b3X3＋b4X12＋b5X22＋b6X32＋b7X1X2＋b8X1X3＋b9X2X3進(jìn)行擬合，r2=0.898，擬合度較高，方程式如下：OD=-8.152＋0.719X1＋0.274X2＋0.108X3－0.407X12－0.003 06X22－0.004 69X32＋0.020 37X1X2－0.029 2X1X3＋0.001 691X2X3。本實(shí)驗(yàn)以此方程作為分析及預(yù)測的模型，固定三個(gè)自變量之一為中值，以總評“歸一值”為因變量，相對于另兩個(gè)自變量的效應(yīng)面三維圖見圖1～3。

由圖1～3判斷，清膏濃度、含醇量、靜置時(shí)間在所試驗(yàn)的中值附近對總評“歸一值”較明顯;根據(jù)效應(yīng)面優(yōu)選的3個(gè)因素其較佳工藝范圍為，X1：1.5～2.0；X2：55%～61%；X3：17.6～20.8 h，運(yùn)用Matlab 6.5軟件計(jì)算得，當(dāng)X1為1.68、X2為58%、X3為19.2 h時(shí)總評“歸一值”O(jiān)D最大，為0.772 3，故采用X1：1.68、X2：58%、X3：19.2 h進(jìn)行醇沉驗(yàn)證，浸膏得率為12.1%、芍藥苷189.28 mg、梓醇20.53 mg和阿魏酸12.98 mg，其總評“歸一值”為0.781 6，預(yù)測值為0.772 3，偏差為(0.781 6－0.772 3)/0.772 3=1.20%，總評“歸一值”預(yù)測及實(shí)測值偏差較小，表明本實(shí)驗(yàn)建立的數(shù)學(xué)模型可用來預(yù)測四物湯其醇沉工藝的總評指標(biāo)，最佳醇沉工藝為提取液濃縮至1.68，調(diào)含醇量至58%，靜置19.2 h。

在醇沉工藝中，通常需兼顧多個(gè)影響因素及多個(gè)參考指標(biāo)，一般效應(yīng)值在最佳實(shí)驗(yàn)條件區(qū)域附近變化比較靈敏，實(shí)驗(yàn)條件的微小變化均可造成效應(yīng)值的大幅變化，用效應(yīng)面表示彎曲面，適合于用非線性模型擬合，并且隨著實(shí)驗(yàn)條件遠(yuǎn)離較優(yōu)區(qū)，效應(yīng)面彎曲度逐漸減小，愈遠(yuǎn)離，線性愈好，如果以均勻設(shè)計(jì)和正交設(shè)計(jì)法進(jìn)行模型擬合時(shí)，線性相關(guān)系數(shù)愈大，因素水平的選擇反而離最優(yōu)區(qū)愈遠(yuǎn)(效應(yīng)與因素之間關(guān)系呈線性的除外，但完全線性關(guān)系較少)，這與優(yōu)化的目的背道而馳，而星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面優(yōu)化法則適用于非線性模型，提高數(shù)學(xué)模型的預(yù)測性，能更好地體現(xiàn)各因素、指標(biāo)與效應(yīng)值的關(guān)系，因此，采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面優(yōu)化法能優(yōu)選條件，量化指標(biāo)，以提高優(yōu)化預(yù)測的準(zhǔn)確性，為研究中藥方劑的醇沉工藝研究提供了一條好途徑。

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