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快速記憶方法范文第1篇

1、實(shí)物識字法：實(shí)物識記就是讓孩子直接看到實(shí)物進(jìn)行認(rèn)字，使孩子了解字義，從而記住生字。如為了讓孩子記住“鈴鐺”這兩個(gè)字，父母可拿出一個(gè)小銅鈴鐺，讓它叮叮當(dāng)外地響。

2、表演識字法：根據(jù)字義做動(dòng)作，也有利于孩子識字。如學(xué)習(xí)“看”字，父母讓孩子把手放在眼睛(目)上方，表示可以看到很遠(yuǎn)的中央。

（來源：文章屋網(wǎng) ）

快速記憶方法范文第2篇

急性胰腺炎是常見外科急腹癥之一，病情兇險(xiǎn)，若不及時(shí)診斷治療，會(huì)嚴(yán)重危及病人生命，但其臨床表現(xiàn)可能是非特異性的。淀粉酶檢測是診斷急性胰腺炎的常見實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目，但是其檢測方法的敏感性和特異性不佳。CT檢查可靠且敏感，但費(fèi)用楊貴且應(yīng)用受到限制。本文將胰蛋白酶原-2試紙條的測定結(jié)果與尿淀粉酶測定結(jié)果作比較，以探討前者診斷急性胰腺炎的效能。

1 對象和方法

1.1對象

1.1.1病例組急性胰腺炎患者62例（男38例，女24例），平均年齡48歲。

1.1.2對照組非急性胰腺炎（急性腹痛）共68例（男50里女18例），平均年齡51歲。其中膽管炎32例，膽囊炎5例，膽結(jié)石21例急性闌尾炎6例，原因不明4例。

1.1.3診斷標(biāo)準(zhǔn)1996年中華醫(yī)學(xué)會(huì)外科分會(huì)急性胰腺炎臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1試劑尿胰蛋白酶原-2試紙條，芬蘭MedixBiochemica公司提供。Amy-u測定試劑。

1.2.2尿標(biāo)本在患者腹痛三天內(nèi)采集，均為晨尿。離心后取上清液進(jìn)行尿胰蛋白酶原-2和尿淀粉酶的測定。

1.2.3尿胰蛋白酶原-2的測定免疫層析法。原理：試紙條中含有2種人胰蛋白酶原-2的單克隆抗體，一種結(jié)合在藍(lán)色的乳膠粒子上，另一種固定于膜上。尿液接觸試紙條后，尿液中的胰蛋白酶原-2與抗體標(biāo)記的乳膠粒子結(jié)合并繼續(xù)移動(dòng)，另一種抗體捕獲該抗原抗體復(fù)合物并與之結(jié)合。若標(biāo)本中胰蛋白酶原-2超過50ug/L，則在5分鐘內(nèi)顯示一條藍(lán)線，即為陽性結(jié)果。操作正確應(yīng)顯示另一條藍(lán)線（質(zhì)控線），若無此質(zhì)控線則提示操作有誤或試劑失效。

1.2.4尿淀粉酶測定以EPS為底物的速率法。在OlympusAu640全自動(dòng)生化分析儀上按照儀器和試劑生產(chǎn)商提供的參數(shù)進(jìn)行測定。

2、結(jié)果

62例確診為急性胰腺炎患者的鳥胰蛋白酶原-2檢測結(jié)果為60例陽性（靈敏度96.8%）；而68例急性腹痛擔(dān)不是急性胰腺炎的病人中有1例陽性，該患者確診為膽囊炎；二組比較，差異有極顯著意義（表1）。與尿淀粉酶試驗(yàn)相比，尿胰蛋白酶原-2檢測診斷的敏感性和特異性均很高。尿胰蛋白酶原-2試紙條試驗(yàn)陰性預(yù)測值為97.0%，陽性預(yù)測值為96.8%（表2）。

3、討論

胰蛋白酶原是一種分子量25kd的蛋白，主要有胰蛋白酶原-1和胰蛋白酶原-2二種形式，生理情況下胰腺中的含量較高，僅有比列極少的一部分出現(xiàn)在外周血中[1,2].急性胰腺炎時(shí)胰腺組織細(xì)胞受損，胰蛋白酶原大量釋放入血。腎小管對胰蛋白酶原-2的重吸收率比胰蛋白酶原-1低，因此尿液中多為胰蛋白酶原-2.所以，測定尿中胰蛋白酶原-2可作為診斷急性胰腺炎的可靠性指標(biāo)。

尿胰蛋白酶原-2檢測出2例假陽性，確診為膽囊炎，曾有報(bào)道，胰蛋白酶原-2由膽道和周圍上皮擠壓而出[3].

在急診條件下，用快速檢測尿胰蛋白酶原-2試紙條作為診斷急性胰腺炎的方法，具有快速、簡便、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，便于作床旁試驗(yàn)，其靈敏度與特異性大大高于尿淀粉酶檢測。尿淀粉酶原-2檢測陰性者，在很大程度上可排除急性胰腺炎；對陽性者，則需作進(jìn)一步檢查。

參考文獻(xiàn):

[1] Steinberg W,Tenner W.AcutePancreatitis[J].N Eng J Med,1994,330(17):1198-1210.

[2] Petersson U,Appelros S,Borgstrom A,Differentpatterms inImmunoreactiveanionicandcationictrypsinogeninUrineandserrminhuman acute pancreatitis[J].Int JPancreatol,1999,25(3):165-170.

快速記憶方法范文第3篇

關(guān)鍵詞：遙感影像 K-平均算法 數(shù)學(xué)形態(tài)學(xué) 建筑物高度

中圖分類號：TP79 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2016）11（a）-0087-02

城市化l展包含了城市水平空間和垂直空間上的發(fā)展，而建筑物作為城市中最重要的組成部分，其高度的變化正是城市化垂直空間的體現(xiàn)。目前，隨著光學(xué)敏感元件的高精密集成技術(shù)，遙感影像分析精度的日益提升，因此，遙感影像得以廣泛應(yīng)用。何國金[1]等人也進(jìn)行建筑物高度的估算，針對北京市蜂窩電話網(wǎng)的布點(diǎn)建設(shè)要求進(jìn)行高度分級，并生成不同建筑物高度的分布圖，通過驗(yàn)證結(jié)果準(zhǔn)確率達(dá)到80%以上。以上方法雖然都對建筑物高度的提取提供了有效的方法，但過程相對復(fù)雜，必須提前獲知太陽及衛(wèi)星的各種角度。在未知太陽和衛(wèi)星的各種角度以及大批量處理數(shù)據(jù)時(shí)，使用這些方法誤差較大。

為了實(shí)現(xiàn)快速、精準(zhǔn)、有效地評價(jià)建筑物群的高度信息，該文使用“高分一號”遙感影像數(shù)據(jù)提取建筑物高度。首先對原始影像進(jìn)行預(yù)處理，其次利用K-平均算法聚類分析得到建筑物以及陰影區(qū)域；然后對陰影進(jìn)行腐蝕膨脹等處理，獲取準(zhǔn)確的陰影長度，通過其長度計(jì)算出建筑物的高度。該方法無需提前獲知太陽及衛(wèi)星的各種角度信息，操作便捷，提取方法快速、精準(zhǔn)，克服了獲取衛(wèi)星遙感信息所帶來的困難。

1 建筑物與陰影的提取

針對建筑物群的在遙感影像中的實(shí)際成像特點(diǎn)，我們可以得到，通過獲取的陰影信息來提取建筑物高度是該文的關(guān)鍵。由于原始影像成像時(shí)會(huì)受到大氣湍流、電磁波輻射等影響，導(dǎo)致遙感影像存在不同程度上的畸變、失真以及模糊等現(xiàn)象[2]。因此在提取建筑物和陰影之前首先對遙感影像進(jìn)行一定程度上的預(yù)處理操作，便于后續(xù)的影像圖像信息處理。然后利用K-平均算法分割出建筑物與陰影區(qū)域，并對陰影進(jìn)行數(shù)學(xué)形態(tài)學(xué)處理，使邊緣自然平滑。流程圖如下：

1.1 K-平均算法分割建筑物陰影

遙感影像預(yù)處理消除噪聲和畸變后，采用K-平均聚類算法[3]對建筑物和陰影進(jìn)行分割。K-平均算法的根本思路就是把個(gè)數(shù)據(jù)處理對象根據(jù)他們的屬性分為個(gè)分割。

其中，數(shù)據(jù)和之間的歐幾里得距離為，表示簇類個(gè)數(shù)，公式如下：

（1）

同一簇類的中心點(diǎn)表示為，公式如下：

（2）

聚類準(zhǔn)則函數(shù)定義如下：

（3）

為所有對象的誤差平方和，為空間中的任意一點(diǎn)，為聚類的期望值。

1.2 基于數(shù)學(xué)形態(tài)學(xué)的陰影處理

通過K-平均算法得到的陰影邊界有鋸齒化現(xiàn)象和由于遮擋等因素某些地方出現(xiàn)孔洞或斷點(diǎn)。因此利用數(shù)學(xué)形態(tài)學(xué)腐蝕、膨脹平滑陰影和建筑物邊界、填補(bǔ)孔洞和斷點(diǎn)。

腐蝕是指遍歷圖像的每一個(gè)像素，利用模板與覆蓋的二值圖像區(qū)域進(jìn)行邏輯“與”運(yùn)算。

對于集合對象和，集合被集合腐蝕，用表示，定義公式如下：

（4）

膨脹是指遍歷圖像的每一個(gè)像素，利用模板與覆蓋的二值圖像區(qū)域進(jìn)行邏輯“或”運(yùn)算。由于和是中的集合，被膨脹定義為：

（5）

首先對建筑物陰影區(qū)域進(jìn)行腐蝕，消去影像中孤立點(diǎn)和陰影對象邊緣的點(diǎn)，然后對腐蝕后的陰影區(qū)域進(jìn)行膨脹處理[4]，填充因遮擋或其他原因引起的孔洞。因此，我們可以得到較為清晰的影像信息。

2 陰影長度與建筑物高度的關(guān)系

一般情況下，我們無法獲知遙感影像拍攝時(shí)的時(shí)間，因此我們也無法獲取太陽、衛(wèi)星的各種角度信息。但是我們從衛(wèi)星成像和陰影形成原理得出，在同一時(shí)間拍攝的遙感影像上，陰影長度和建筑物高度的比值是固定的，公式如下：

（6）

式中，為同一時(shí)刻下所拍攝的建筑物高度與陰影長度之間的比值。因此，根據(jù)公式我們可以得知，通過實(shí)際測量任一棟建筑物的高度信息以及所對應(yīng)的陰影長度，根據(jù)兩者之間的映射關(guān)系即可獲得值。

根據(jù)遙感影像中建筑物高度與陰影長度的映射關(guān)系。實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)區(qū)任意選擇一棟建筑物進(jìn)行測量。其建筑物的高度為27.75 m，通過軟件獲得陰影在圖像上占18.45個(gè)像素。由公式（6）可求出值為 1.504，則公式可以修改為：

（7）

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析

為了更好地驗(yàn)證算法的準(zhǔn)確性，同時(shí)和其他文獻(xiàn)中的處理結(jié)果進(jìn)行比較，該文實(shí)驗(yàn)中使用的測試影像為“高分一號”遙感影像，選取吉林某家屬院為實(shí)驗(yàn)區(qū)進(jìn)行對其高度進(jìn)行提取。圖1所示兩幅圖像分別為原始影像以及提取后的建筑物和陰影檢測圖。利用公式（7）對實(shí)驗(yàn)區(qū)中的任意10棟建筑物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，其精度達(dá)到1.5 m以內(nèi)。

4 結(jié)語

在城市化進(jìn)程中，為了解決大規(guī)模城市建筑物提取時(shí)間長、計(jì)算量大等問題。該文提出了一種快速、準(zhǔn)確提取建筑物高度的方法。通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析得出，對比傳統(tǒng)的建筑物高度提取方法，該方法不僅簡單快速，而且精度達(dá)到1.5 m以內(nèi)，該方法滿足了大規(guī)模城市建筑物群高度的提取要求，具有一定的社會(huì)應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1] 何國金，陳剛，何曉云，等.利用SPOT圖象陰影提取城市建筑物高度及其分布信息[J].中國圖象圖形學(xué)，2001， 6（5）：425-428.

[2] 王昱，張廣友，等.衛(wèi)星遙感影像預(yù)處理中噪聲去除方法的研究[J].遙感技術(shù)與應(yīng)用，2007，22（3）：455-459.

快速記憶方法范文第4篇

關(guān)鍵詞：A3 數(shù)字航攝儀 影像 快速成圖

中圖分類號：P23 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3791（2014）08（a）-0029-01

為滿足天津某縣“十二五””基礎(chǔ)測繪服務(wù)城鄉(xiāng)規(guī)劃建設(shè)需要，2013年對該縣進(jìn)行航空攝影，采用新型A3數(shù)碼航攝儀，制作1∶2000真彩色數(shù)字正射影像圖（DOM）。

1 A3數(shù)碼航空攝影測量系統(tǒng)的組成和特點(diǎn)

A3數(shù)碼航空攝影測量系統(tǒng)是一整套不可分割航空數(shù)碼系統(tǒng)，主要包括空中和地面兩大部分?？罩性O(shè)備主要有：航攝儀、控制存儲設(shè)備、飛行導(dǎo)航管理系統(tǒng)。

地面數(shù)據(jù)后處理系統(tǒng)由后處理軟件和硬件組成，主要功能包括：飛行設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)下載、數(shù)據(jù)準(zhǔn)備、和數(shù)據(jù)處理。可自動(dòng)完成空中三角測量并生成DSM、DOM、傾斜影像、拼合后常規(guī)大幅面立體模型等產(chǎn)品。整套A3數(shù)碼航空攝影測量系統(tǒng)的特點(diǎn)：影像獲取非常高效，是同類數(shù)碼航空攝影系統(tǒng)的2～4倍。一次飛行可同時(shí)獲取垂直和傾斜影像。無需控制點(diǎn)和IMU設(shè)備就可獲取高精度結(jié)果。全自動(dòng)的空中三角測量、DTM、大面積正射影像成圖及鑲嵌。數(shù)據(jù)處理能力非常強(qiáng)大，可在2～5 d時(shí)間內(nèi)處理5000平方公里的影像數(shù)據(jù)。

2 正射影像生產(chǎn)實(shí)踐

常規(guī)攝影測量制作正射影像圖的流程一般為：航攝獲取影像數(shù)據(jù)、外業(yè)布置像控點(diǎn)、內(nèi)業(yè)空三加密解算、手工或半自動(dòng)獲取DEM數(shù)據(jù)、幾何糾正生成正射影像圖，從航攝到最終產(chǎn)品輸出需要幾個(gè)月甚至更長時(shí)間。A3自帶IMU/UPS輔助系統(tǒng)，獲取影像數(shù)據(jù)的同時(shí)，獲得每張像片高精度外方位元素，三線陣分別組成的立體像對自動(dòng)提取DEM數(shù)據(jù)，該方法能夠滿足1：2000比例尺正射影像圖精度要求，最大限度地減少外業(yè)工作量并在一定程度上降低內(nèi)業(yè)數(shù)據(jù)處理時(shí)間，縮短生產(chǎn)周期。具體正射影像制作流程如圖1所示。

2010年利用UCX航空影像數(shù)據(jù)源制作1∶2000正射影像部分區(qū)域如圖2所示，利用A3影像制作相應(yīng)區(qū)域正射影像如圖4所示。通過對比發(fā)現(xiàn)，A3正射影像紋理結(jié)構(gòu)信息更豐富，色彩真實(shí)、陰影等細(xì)節(jié)體現(xiàn)更好。

3 快速成圖方法研究

在大比例尺正射影像生產(chǎn)過程中，海量的數(shù)據(jù)組織、影像勻光勻色、鑲嵌方法的選擇、后期編輯檢查等問題均能直接影響數(shù)據(jù)生產(chǎn)質(zhì)量和效率。德國InPho公司的OrthoVista軟件模塊在多源數(shù)據(jù)的色彩調(diào)整、拼接勻色、鑲嵌編輯方面具有強(qiáng)大優(yōu)勢，該工程的影像拼接及鑲嵌等工序均在OrthoVista模塊下完成。

像片總數(shù)高達(dá)2300余張，總數(shù)據(jù)量超過10TB，測區(qū)內(nèi)存在大面積水域及云影，影像顏色不均勻等不利因素，因此探索快速成圖方法顯得尤為重要。針對具體生產(chǎn)實(shí)踐問題，探索出A3正射影像制作快速成圖規(guī)律與方法。

（1）采用基于InPho和SQL Server相結(jié)合的客戶端/服務(wù)器（C/S）生產(chǎn)模式。針對A3數(shù)據(jù)特點(diǎn)，選用InPho和SQL Server相結(jié)合應(yīng)用模式，數(shù)據(jù)組織時(shí)只需提交海量A3數(shù)據(jù)的存儲路徑信息，即可方便地進(jìn)行數(shù)據(jù)更新和工程的修改，在影像鑲嵌中，可以實(shí)時(shí)預(yù)覽不同成圖分辨率的影像拼接結(jié)果，根據(jù)不同需求及時(shí)修改編輯不合理接邊線信息，避免產(chǎn)生常規(guī)影像鑲嵌時(shí)大量中間冗余數(shù)據(jù)，很大程度上提高了生產(chǎn)效率。（2）分機(jī)批量勻色處理可縮短成圖時(shí)間。項(xiàng)目涉及天津市某縣域，范圍廣，地貌類型較復(fù)雜，包括城市及遠(yuǎn)城區(qū)居民地、水系、山體和植被等，顏色呈多樣化。為保證鑲嵌后正射影像色彩一致、均勻，需針對航攝過程中出現(xiàn)的色差，對生成A3 L2級正射影像進(jìn)行色彩處理，包括單影像色彩調(diào)整與多影像色彩均衡。影像的均值反映其色調(diào)和亮度，而標(biāo)準(zhǔn)偏差則反映其灰度動(dòng)態(tài)變化范圍，由于鑲嵌范圍內(nèi)地物具有相關(guān)性，理想情況下獲取的用于鑲嵌的不同影像應(yīng)該具有近似一致的均值與標(biāo)準(zhǔn)偏差。Wallis濾波器則可以將影像的局部灰度均值和方差映射到給定的灰度均值和方差值，因此采用Wallis濾波器整體勻色批處理。選取5個(gè)代表不同地貌的影像圖，進(jìn)行綜合處理，計(jì)算出符合整個(gè)測區(qū)的標(biāo)準(zhǔn)均值和方差。因?yàn)榇幚碛跋癖容^多，勻色時(shí)間消耗長，所以同時(shí)采用多臺計(jì)算機(jī)分機(jī)分步進(jìn)行勻色整體批處理，且盡量在夜間進(jìn)行，有效提高運(yùn)算效率，節(jié)約時(shí)間成本。（3）鑲嵌線自動(dòng)生成及二次重用。通常城區(qū)的建筑物密集，高層建筑在影像上容易產(chǎn)生投影差，導(dǎo)致在影像鑲嵌過程中極易出現(xiàn)拼接錯(cuò)位、邊緣模糊、有虛影等情況，因此在進(jìn)行城市居民地密集區(qū)A3正射影像生產(chǎn)中，鑲嵌拼接是影響產(chǎn)品質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。項(xiàng)目采用InPho拼接線自動(dòng)生成、輔以人工檢查的方法對影像進(jìn)行拼接，既保證了產(chǎn)品質(zhì)量，又確保了項(xiàng)目進(jìn)度。

4 結(jié)語

該項(xiàng)目數(shù)據(jù)量大、工期緊，采用A3數(shù)據(jù)源進(jìn)行大比例尺正射影像生產(chǎn)，成果通過了精度評定與質(zhì)量檢查，及時(shí)為天津市新農(nóng)村集體土地調(diào)查提供了遙感信息保障。實(shí)踐表明，采用基于InPho和SQI. Server相結(jié)合的網(wǎng)絡(luò)化生產(chǎn)模式，分機(jī)批量Wallis濾波器勻色處理及鑲嵌線自動(dòng)生成輔以人工編輯，不僅保證了A3正射影像產(chǎn)品質(zhì)量和精度，而且在海量數(shù)據(jù)存儲與組織、提高生產(chǎn)效率方面具有明顯優(yōu)勢。

參考文獻(xiàn)

快速記憶方法范文第5篇

【關(guān)鍵詞】 利福平；異煙肼；耐藥；基因突變；結(jié)核分枝桿菌；快速檢測

DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2016.09.115

利福平和異煙肼是結(jié)核病的最重要的一線抗結(jié)核藥物[1]。近年來結(jié)核分枝桿菌基因突變發(fā)生耐藥的情況也時(shí)有發(fā)生， 世界衛(wèi)生組織報(bào)道每年有新增48.9萬例耐多藥結(jié)核病， 其總量占結(jié)核病患者的4.8%， 而在我國則更為嚴(yán)重。耐多藥結(jié)核病的早期確診有利于患者的病情控制， 比例法藥敏試驗(yàn)雖然結(jié)果可靠， 且被公認(rèn)為判斷結(jié)核分枝桿菌耐藥的金標(biāo)準(zhǔn)， 但該方法需要細(xì)菌培養(yǎng)， 耗時(shí)2～4個(gè)月， 易貽誤病情。隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展， 為結(jié)核分枝桿菌耐藥性快速檢測提供可能。本中心采用PCR線性雜交酶顯色法建立利福平和異煙肼耐藥基因突變快速檢測方法對送檢的疑似耐藥結(jié)核病患者臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測， 并將結(jié)果與比例法藥敏試驗(yàn)進(jìn)行分析， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 取2013年10月～2015年5月送檢的疑似耐藥結(jié)核病患者臨床標(biāo)本88份， 其中痰65份， 肺泡灌洗23份。

1. 2 去污染處理 將1～2倍于痰及肺泡灌洗液樣本的4%NaOH放置于樣本中， 震蕩混勻， 靜置20 min， 再將pH=6.8的磷酸緩沖液加入樣本中， 3000 r/min離心1 min， 沉淀后去除上清液， 將1 ml磷酸緩沖液加入其中， 混勻， 獲得去污染樣本。

1. 3 方法

1. 3. 1 比例法藥敏試驗(yàn) 取適量去污染樣本在酸性固體羅氏培養(yǎng)基上接種， 在37℃溫度下培養(yǎng)7 d， 菌群鑒定采用齊-尼氏染色法， 共得結(jié)核分枝桿菌分離株64株。制備10-2 g/L和10-4 g/L菌懸液， 各取0.01 ml采用劃線法接種在含藥培養(yǎng)基及對照培養(yǎng)基表面， 37℃溫度下培養(yǎng)4周， ≤1%為敏感。

1. 3. 2 快速檢測方法的建立 采用PCR線性雜交酶顯色法建立快速檢測方法。取去污染樣本500 μl加入1.5 ml離心管， 以5600 r/min的速度離心15 min后去上清液， 加入去離子水500 μl， 再次以5600 r/min的速度離心15 min， 沸水浴20 min， 超聲裂解15 min， 取上清液5 μl為DNA模板。采用BLAST軟件對katG、inhA和rpoB基因合適的擴(kuò)增區(qū)域進(jìn)行引物擴(kuò)增， 其中katG基因2個(gè)探針， inhA基因2個(gè)探針， rpoB基因11個(gè)探針。PCR擴(kuò)增體系（引物1 μl， 2.5 mmol/L三磷酸脫氧核糖核苷混合物4 μl， 10×PCR緩沖液5 μl， MgCl2 3 μl， DNA聚合酶5.0 U， 去離子水3 μl， 提取的DNA模板5 μl）進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增條件：第一階段：95℃ 15 min， 95℃ 30 s， 58℃ 2 min， 10個(gè)循環(huán)；第二階段：95℃ 25 s， 53℃ 40 s， 70℃ 40 s， 30個(gè)循環(huán)；第三階段：70℃ 8 min。取20 μl PCR擴(kuò)增產(chǎn)物加入雜交盤中， 與20 μl變性裂解液混勻， 室溫靜置5 min后， 加入1 ml雜交緩沖液， 放入探針試條。將雜交盤放入GTblot-20全自動(dòng)雜交儀， 雜交成功后取出試紙吸水紙干燥， 判讀。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2 檢驗(yàn)。P

2 結(jié)果

比例法藥敏試驗(yàn)中僅對利福平耐藥26份， 僅對異煙肼耐藥23份， 對利福平和異煙肼均耐藥19份， 不耐藥20份。快速檢測方法中對利福平耐藥24份， 僅對異煙肼耐藥24份， 對利福平和異煙肼均耐藥22份， 不耐藥18份。以耐藥不耐藥作為分割點(diǎn)， 比例法藥敏試驗(yàn)結(jié)果為參考標(biāo)準(zhǔn)， 快速檢測方法的靈敏度100.0%（68/68）， 特異度90.0%（18/20）， 準(zhǔn)確度97.7%（86/88）， 兩種檢驗(yàn)方法一致性好（P=0.1573>0.05）。

3 討論

目前， 基于分子生物學(xué)研究的利福平和異煙肼耐藥基因突變快速檢測方法包括實(shí)時(shí)PCR單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析、實(shí)時(shí)PCR熔解曲線法、噬菌體法、基因芯片法及PCR線性雜交酶顯色法等， 后兩種方法應(yīng)用最為廣泛。這些方法預(yù)測耐藥表型均基于結(jié)核分枝桿菌的rpoB、katG和inhA基因特定區(qū)域或位點(diǎn)突變[2]。約96%的利福平耐藥性與rpoB突變相關(guān)， 30%～60%的異煙肼耐藥性與katG基因突變相關(guān)， 故上述基因區(qū)域可基本覆蓋耐藥基因突變情況， 為檢測技術(shù)的靈敏度和準(zhǔn)確性提供保障。PCR線性雜交酶顯色法也可見于慢性乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥研究[3]。該技術(shù)應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌的檢測時(shí)， 通過多重聚合酶鏈反應(yīng)結(jié)合反向雜交技術(shù)， 與固定在硝化纖維條帶上的特異基因雜交[4]， 顯色判讀。在此過程中PCR擴(kuò)增效果不受細(xì)菌存活量的影響、雜交后化學(xué)信號放大， 是PCR線性雜交酶顯色法的靈敏度高的主要原因。本研究結(jié)果顯示快速檢測方法的靈敏度100.0%， 特異度90.0%， 準(zhǔn)確度97.7%， 結(jié)果與李大登等[5]報(bào)道一致。本研究納入為疑似耐藥結(jié)核病患者， 故耐藥陽性檢出率為77.27%（68/88）， 遠(yuǎn)高于其他報(bào)道的總耐藥率29.14%[6]， 符合事實(shí)。此外， 與比例法藥敏試驗(yàn)相比， PCR線性雜交酶顯色法成本更低， 更利于在地市級結(jié)核病醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用[7]。另外本研究中PCR線性雜交酶顯色法整個(gè)操作過程≤6 h， 可做到當(dāng)天送檢當(dāng)天出結(jié)果， 符合快速檢測的要求。

綜上所述， 采用PCR線性雜交酶顯色法建立利福平和異煙肼耐藥基因突變快速檢測方法進(jìn)行檢測， 與比例法藥敏試驗(yàn)一致性好， 可信度高， 值得臨床推廣。

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