前言：本站為你精心整理了銀鯽養(yǎng)殖論文：銀鯽病原菌試驗研究范文，希望能為你的創(chuàng)作提供參考價值，我們的客服老師可以幫助你提供個性化的參考范文，歡迎咨詢。

本文作者：夏飛1,2梁利國2謝駿2作者單位：1南京農業(yè)大學無錫漁業(yè)學院2中國水產(chǎn)科學研究院淡水漁業(yè)研究中心

菌落形態(tài)特征

以肝胰腺為樣本劃線接種于LB瓊脂平板上，30℃培養(yǎng)18h，培養(yǎng)基上長出大量白色菌落，直徑1.5mm，表面光滑，中央隆起。

回歸感染試驗結果

用分離菌株DF-1進行人工回感試驗結果見表1。菌液濃度為4×108CFU/mL時試驗魚死亡率為100%，菌液濃度為4×107CFU/mL時試驗魚只有部分死亡。菌液濃度為4×109CFU/mL時試驗魚8h開始死亡，20h時全部死亡，發(fā)病魚體表現(xiàn)出自然發(fā)病的癥狀。解剖病魚取肝胰腺分離到優(yōu)勢菌落，經(jīng)細菌學鑒定為維氏氣單胞菌。

生理生化特性

對分離菌株DF-1的生化特性的測定結果歸納見表2。

16SrRNA基因序列及系統(tǒng)進化關系

分離菌株DF-1在GenBank的登錄號為:JQ301790，基因序列測序結果16SrRNA基因長度為1453bp。將菌株所擴增的16SrRNA基因序列在NCBI通過Blast進行同源性檢索，結果其與氣單胞菌屬細菌16SrRNA基因序列自然聚類，且與維氏氣單胞菌聚為一個分支，采用鄰接法構建菌株分子發(fā)育樹如圖1，分離菌株在系統(tǒng)發(fā)育樹上與維氏氣單胞菌(登錄號:JN083778)屬同一支，同源性達99%以上。結合形態(tài)學和生理生化特征將所分離菌株鑒定為維氏氣單胞菌。

藥敏試驗結果

分離菌DF-1對37種抗生素的藥敏試驗結果見表3。該菌對甲哌利福霉素、鏈霉素、卡那霉素、阿米卡星、慶大霉素、妥布霉素、新生霉素、氟苯尼考等16種抗生素敏感;對青霉素G、氨芐西林、苯唑西林、紅霉素、萬古霉素、羅紅霉素、氟羅沙星等15種抗生素表現(xiàn)出耐藥性;對O/129弧菌抑制劑不敏感。

本研究分離得到菌株DF-1，進行人工感染試驗，該菌株表現(xiàn)出較強的致病力，能使健康鯽出現(xiàn)和自然病魚相似的病癥，并從病魚體中分離病原菌，菌體形態(tài)特征與菌株DF-1相同，同時生理生化反應以及16SrRNA鑒定為維氏氣單胞菌。目前對于水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的疾病大多仍采用抗菌藥物防治的辦法來控制其發(fā)生和流行?；瘜W藥物防治容易導致病原菌產(chǎn)生耐藥性，甚至是多重耐藥性［12］。本試驗以37種抗菌藥物對維氏氣單胞菌進行了藥物敏感性測定，結果發(fā)現(xiàn)試驗菌株對甲哌利福霉素、鏈霉素、卡那霉素等16種藥中度敏感;而對青霉素、苯唑西林、氨芐西林等15種藥物表現(xiàn)出耐藥性;對弧菌抑制劑O/129不敏感。藥敏試驗結果與唐毅等［13］的結果有所差異，這可能是由于細菌對抗生素類藥物的耐藥性具有頻繁的變異性，加之同一種菌在不同的環(huán)境條件下會有不同的藥物敏感性。因此應根據(jù)藥敏試驗結果和維氏氣單胞菌的耐藥性合理選擇抗菌藥物進行治療，以減少耐藥菌株的產(chǎn)生。