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平面模特用工合同茲由甲方聘請(qǐng)乙方拍攝品牌等產(chǎn)品的平面廣告事宜,經(jīng)雙方協(xié)商一致,簽訂本合同如下:一、工作范圍:乙方按甲方要求進(jìn)行廣告攝影。拍攝時(shí)間為xx年7月5日。二、合約有效期及肖像使用范圍:乙方肖像將使用于上述產(chǎn)品的包裝及廣告推廣作品中。
外國(guó)文教專家用工合同一、______________ 聘請(qǐng)_______________ 籍,____________________________(外文姓名)________(譯名)女士(先生)為_______。雙方本著友好合作精 神,自愿簽訂本合同并保證認(rèn)真履行合同中約定的各項(xiàng)義務(wù)。
盲人保健按摩師用工合同������(以下簡(jiǎn)稱甲方)盲人保健按摩師(以下簡(jiǎn)稱乙方)合同期限自���年� 月� 日至����年� 月�
最新汽修廠用工合同根據(jù)《中華人民共和國(guó)勞動(dòng)法》,甲乙雙方經(jīng)平等協(xié)商,自愿簽訂本合同,共同遵守本合同所列條款。一、合同期限甲方聘用乙方在甲方 (部門)擔(dān)任臨時(shí)崗位工作。合同期限為一年,自 年 月 日至 年 月 日。
飯店用工合同文本甲方__________________________________經(jīng)營(yíng)地址______________________________乙方___________ 居民身份證號(hào)___________________出生日期_____年_____月_____日家庭住址_________________________________________郵政編碼___________
保安用工合同文本甲方:石首市實(shí)驗(yàn)小學(xué) (簡(jiǎn)稱甲方)乙方: (簡(jiǎn)稱乙方)為加強(qiáng)學(xué)校的安全管理,維護(hù)正常的教學(xué)工作和生活秩序,確保全校師生的人身財(cái)產(chǎn)安全,控制校園安全事故和治安案件的發(fā)生,乙方向甲方提供保安服務(wù),為維護(hù)甲、乙雙方的權(quán)利,經(jīng)雙方協(xié)商,
保姆用工合同模板保姆用工合同為滿足參與者需求,甲、乙、丙三方在平等、自愿的基礎(chǔ)上,經(jīng)協(xié)商一致同意簽訂本合同。由乙方對(duì)甲方提供家政服務(wù)、甲方支付勞務(wù)費(fèi)、丙方對(duì)乙方擔(dān)保的形式訂立家政勞務(wù)合同:一、合同期限:自______年____月____日至______年__
最新公司用工合同范本公司用工合同××有限公司勞動(dòng)合同有限責(zé)任公司(以下簡(jiǎn)稱甲方)系中外合資經(jīng)營(yíng)企業(yè),現(xiàn)聘用 (以下簡(jiǎn)稱乙方)為甲方勞動(dòng)合同制職工。
事業(yè)單位用工合同樣本事業(yè)單位用工合同甲方(聘用單位)名稱:法定代表人:所有制性質(zhì): 主管部門:地址:乙方(受聘人員)姓名: 性別: 民族:出生年月: 參加工作年月: 學(xué)歷:何時(shí)畢業(yè)于何校何專業(yè):何時(shí)獲何專業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格:何時(shí)獲何技工等級(jí)任職資格:
企業(yè)臨時(shí)用工合同范本編號(hào):_________甲方(單位)名稱:_________所有制性質(zhì):_________地址:_________法人代表:_________乙方(工人)姓名:_________性別:_________年齡:_________民族:_________文化程度:_________籍貫:_________省_________市現(xiàn)住址:
汽修廠用工合同范文汽修廠用工合同范文:根據(jù)《中華人民共和國(guó)勞動(dòng)法》,甲乙雙方經(jīng)平等協(xié)商,自愿簽訂本合同,共同遵守本合同所列條款。一、合同期限甲方聘用乙方在甲方 (部門)擔(dān)任臨時(shí)崗位工作。合同期限為一年,自 年 月 日至 年 月 日。
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短期用工合同甲方(用人單位):名稱經(jīng)濟(jì)類型經(jīng)濟(jì)類型法定代表人(單位負(fù)責(zé)人)電話地址乙方(勞動(dòng)者):姓名性別年齡文化程度身份證號(hào)碼就業(yè)證號(hào)碼住址市(縣)街、巷(鄉(xiāng))號(hào)(村)甲乙雙方根據(jù)《勞動(dòng)法》及《寧夏回族自治區(qū)外來(lái)勞動(dòng)力就業(yè)管理辦法》規(guī)定,平
非全日制用工協(xié)議書甲方(用人單位)名稱: 地址: 性質(zhì): 法定代表人(委托人): 乙方(勞動(dòng)者)姓名: 性別: 出生年月: 家庭住址: 居民身份證號(hào)碼: 甲乙雙方在平等自愿、協(xié)商一致的基礎(chǔ)上,同意訂立本協(xié)議,共同遵守本協(xié)議所列條款。
飯店用工合同甲方__________________________________經(jīng)營(yíng)地址______________________________乙方___________ 居民身份證號(hào)___________________出生日期_____年_____月_____日家庭住址_________________________________________郵政編碼___________
保安用工合同范本甲方:石首市實(shí)驗(yàn)小學(xué) (簡(jiǎn)稱甲方)乙方: (簡(jiǎn)稱乙方)為加強(qiáng)學(xué)校的安全管理,維護(hù)正常的教學(xué)工作和生活秩序,確保全校師生的人身財(cái)產(chǎn)安全,控制校園安全事故和治安案件的發(fā)生,乙方向甲方提供保安服務(wù),為維護(hù)甲、乙雙方的權(quán)利,經(jīng)雙方協(xié)
家政用工協(xié)議為滿足參與者需求,甲、乙、丙三方在平等、自愿的基礎(chǔ)上,經(jīng)協(xié)商一致同意簽訂本合同。由乙方對(duì)甲方提供家政服務(wù)、甲方支付勞務(wù)費(fèi)、丙方對(duì)乙方擔(dān)保的形式訂立家政勞務(wù)合同:一、合同期限:自______年____月____日至______年____月____日止
用工合同協(xié)議書根據(jù)《中華人民共和國(guó)勞動(dòng)法》、《中華人民共和國(guó)勞動(dòng)合同法》和有關(guān)法律、法規(guī),甲乙雙方經(jīng)平等自愿、協(xié)商一致簽訂本合同,共同遵守本合同所列條款。
公司用工合同范本企 業(yè) 類 別:___________________________甲方(用人單元)稱號(hào):___________________________法 定 代 表 人:____________職務(wù)___________地 址:___________________________乙方(休息者)姓名:______________年齡:__________性別:_________
臨時(shí)工聘用合同書聘用單位(甲方):_________受聘人(乙方):_________身份證號(hào)碼:_________受聘人的擔(dān)保人(丙方):_________身份證號(hào)碼:_________茲有聘用單位(甲方)_________決定聘用乙方(受聘人)_________從事相關(guān)工作,經(jīng)甲、乙雙方協(xié)商一致
天津市臨時(shí)勞動(dòng)協(xié)議書甲方(用人單位)名稱:_________企業(yè)類別:_________法定代表人:_________職務(wù):_________地址:_________乙方(勞動(dòng)者)姓名:_________ 年齡:_________性別:_________ 民族:_________現(xiàn) 住 址:_________原 工 作 單
臨時(shí)用工合同書根據(jù)《_________》的規(guī)定,單位(以下簡(jiǎn)稱甲方)因生產(chǎn)、工作需要招用_________同志(以下簡(jiǎn)稱乙方)為臨時(shí)工,經(jīng)雙方協(xié)商同意,簽訂本勞動(dòng)合同。
臨時(shí)用工合同編號(hào):_________甲方(單位)名稱:_________所有制性質(zhì):_________地址:_________法人代表:_________乙方(工人)姓名:_________性別:_________年齡:_________民族:_________文化程度:_________籍貫:_________省_________市現(xiàn)住
臨時(shí)促銷活動(dòng)協(xié)議經(jīng)友好平等協(xié)商,_________(以下簡(jiǎn)稱甲方)和_________(以下簡(jiǎn)稱乙方)就甲方推薦_________參加乙方組織的_________促銷活動(dòng)以及活動(dòng)中須事先明確的事達(dá)成共識(shí),簽定本文件備忘。
寧夏回族自治區(qū)短期用工勞動(dòng)合同書甲方(用人單位)名稱:_________經(jīng)濟(jì)類型:_________法定代表人(單位負(fù)責(zé)人):_________電話:_________地址:_________乙方(勞動(dòng)者):_________姓名:_________性別:_________年齡:_________文化程度:_________身份證號(hào)碼:____
用工合同范本__________(公司(以下稱甲方)因工作需要,按照國(guó)家、北京市有關(guān)勞動(dòng)法律法規(guī)、規(guī)章規(guī)定,聘用__________(以下稱乙方)為我公司員工。
非全日制用工合同根據(jù)國(guó)家、省、市有關(guān)規(guī)定,甲方招用乙方并實(shí)行非全日制用工形式,經(jīng)雙方協(xié)商一致,同意簽訂本合同。甲方: 乙方: 性別: 法定代表人: 身份證號(hào): 單位地址: 現(xiàn)居住地: 一、合同期限自 年 月 日至 年 月 日止。
幼兒園用工合同xx中心幼兒園(以下簡(jiǎn)稱甲方)經(jīng)考核,決定錄用__________(以下簡(jiǎn)稱乙方)為正式員工,經(jīng)雙方協(xié)商,訂立合同如下:1、雙方合同期為三年,從 年9 月 1 日起至 年 8月 30日止。其中,從 年9 月 1日起至 年 12 月30 日為試用期。
企業(yè)公司用工合同甲方:乙方:甲方因經(jīng)營(yíng)管理需要,經(jīng)過(guò)考核,聘請(qǐng)乙方為公司管理人員,遵照國(guó)家有關(guān)勞動(dòng)法律法規(guī),經(jīng)雙方友好協(xié) 商,達(dá)成以下聘用協(xié)議:一、甲方聘請(qǐng)乙方為公司的 。二、聘用合同期限從乙方到甲方工作時(shí)起至退休時(shí) 止。三、乙方的**待遇。
工廠用工合同甲方(加工廠):___________________乙方(員工):_____________________由于_______xx加工廠(以下簡(jiǎn)稱甲方)工作的需要,聘請(qǐng)______(以下簡(jiǎn)稱乙方)到甲方工廠工作。本著平等互利的原則,經(jīng)過(guò)雙方協(xié)商同意,達(dá)成以下12條協(xié)議。
司機(jī)駕駛員用工合同編號(hào):甲方:乙方:簽訂日期 年 月 日北京市勞動(dòng)局制甲方 乙方姓名 性別法定代表人文化程度出生日期 年 月 日居民身份證號(hào)碼單位地址家庭住址郵政編碼所屬街道辦事處根據(jù)《中華人民共和國(guó)勞動(dòng)法》,甲乙雙方經(jīng)平等協(xié)商,自愿簽訂本合同,
電腦公司用工合同甲方:乙方(雇請(qǐng)人):甲方因生產(chǎn)(工作)需要,雇請(qǐng)乙方。經(jīng)雙方自愿協(xié)商同意,訂立本合同。一、合同期自 年 月 日起至 年 月 日止。其中試用期二個(gè)月,試用期間工資為XXX元(其中生活費(fèi),房租,水電費(fèi)每月XX元)。
建筑用工合同甲方 法定代表人 營(yíng)業(yè)執(zhí)照注冊(cè)號(hào) 資質(zhì)等級(jí) 在川通訊地址 郵編 乙方 性別 電話 居民身份證號(hào)碼 家庭住址 郵政編碼 戶口所在地 ?。ㄊ校?區(qū)(縣) 鄉(xiāng)鎮(zhèn) 村根據(jù)《中華人民共和國(guó)勞動(dòng)法》和有關(guān)規(guī)定,甲乙雙方經(jīng)平等協(xié)商一致,自愿簽訂本合同
食堂用工合同xx中心校食堂:(以下簡(jiǎn)稱甲方):(以下簡(jiǎn)稱乙方)甲方聘用乙方為食堂工作人員,甲乙雙方經(jīng)過(guò)平等協(xié)商特立協(xié)議如下:1、 乙方在被聘用期間,服從學(xué)校和食堂的工作安排,嚴(yán)格遵守學(xué)校的規(guī)章制度,做好自我保護(hù)。
餐飲用工合同(酒店、餐廳、飯店)本合同使用作為酒店用工、餐廳用工、飯店用工等餐飲業(yè)合同。甲方__________________________________經(jīng)營(yíng)地址______________________________乙方___________ 居民身份證號(hào)___________________出生日期_____年_____月_____日家庭住址____
民辦學(xué)校用工合同甲方(用人單位):________________民辦學(xué)校名稱:____________________民辦學(xué)校住所:____________________法定代表人或負(fù)責(zé)人:______________乙方(勞動(dòng)者):__________________姓名:____________________________性別:__________
1、普卡
授信額度:0—10000元不等,通常不會(huì)高于一萬(wàn)元人民幣。
年費(fèi):幾十至幾百之間,通??梢韵硎苊饽曩M(fèi)政策。例如,刷卡滿6次免除次年年費(fèi),積分兌換年費(fèi)減免。
服務(wù)標(biāo)準(zhǔn):享受銀行普通的優(yōu)惠政策,通常無(wú)特殊權(quán)益。
2、白金卡
授權(quán)信額:通常在5萬(wàn)到100萬(wàn)元之間,小白金的授權(quán)信額也可能為2、3萬(wàn)元。
年費(fèi):400-3000元左右,通常不可免除。
法定代表人:_________
地 址:_________
乙方(勞動(dòng)者) 姓名:_________年齡:_________
性別:_________ 民族:_________
戶籍所在地:_________省_________市_________縣(區(qū))
_________鄉(xiāng)(鎮(zhèn))_________村(街)
居民身份證號(hào)碼:_________
現(xiàn)住址:_________
根據(jù)《中華人民共和國(guó)勞動(dòng)法》和《天津市實(shí)施勞動(dòng)合同制度規(guī)定》等規(guī)定,甲乙雙方在平等自愿、協(xié)商一致的基礎(chǔ)上簽訂本合同。
第一條 合同期限
本合同期限執(zhí)行下列_________款
一、有固定期限。本合同期限為_________年(月),自_________年_________月_________日起至_________年_________月_________日止。其中試用期為_________月(日)。
二、無(wú)固定期限,自_________年_________月_________日始,其中試用期為_________月(日)。
終止勞動(dòng)合同條件約定如下:
(一):_________。
(二):_________。
(三):_________。
三、以完成一定的工作為期限,甲乙雙方具體約定如下:
_________。
第二條 工作內(nèi)容
甲方根據(jù)生產(chǎn)工作需要,安排乙方在_________崗位工作,乙方應(yīng)服從甲方安排,完成本崗位所要求的工作。
第三條 勞動(dòng)報(bào)酬
一、甲方按照國(guó)家和本市有關(guān)規(guī)定,按月支付乙方的工資報(bào)酬,工資報(bào)酬不低于本市規(guī)定的最低工資標(biāo)準(zhǔn)。
二、甲方每月____日以貨幣形式支付工資。無(wú)故拖欠或不支付工資的,除全額支付工資報(bào)酬外,還需加發(fā)相當(dāng)于工資報(bào)酬百分之二十五的經(jīng)濟(jì)補(bǔ)償。
三、工資具體支付辦法、標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)內(nèi)容約定如下:
(一):_________。
(二):_________。
(三):_________。
第四條 社會(huì)保險(xiǎn)和福利待遇
甲方按規(guī)定為乙方參加工傷、醫(yī)療社會(huì)保險(xiǎn)并履行繳費(fèi)義務(wù)。按規(guī)定應(yīng)由乙方交納的社會(huì)保險(xiǎn)費(fèi),由甲方代為扣繳。
其他保險(xiǎn)和福利待遇約定如下:_________。
第五條 勞動(dòng)保護(hù)和勞動(dòng)條件
一、甲方根據(jù)國(guó)家法律和本市的有關(guān)規(guī)定,給乙方提供安全衛(wèi)生的勞動(dòng)條件,發(fā)給乙方必要的勞動(dòng)保護(hù)用品。
二、甲方對(duì)乙方進(jìn)行安全教育和必要的培訓(xùn);乙方從事特種作業(yè)的必須經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)并取得特種作業(yè)資格后持證上崗。
三、乙方在勞動(dòng)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵守勞動(dòng)安全衛(wèi)生規(guī)定和操作規(guī)程,有權(quán)拒絕違章指揮,對(duì)甲方及其管理人員漠視職工安全和健康的行為有權(quán)檢舉、控告。
第六條 勞動(dòng)紀(jì)律
一、乙方應(yīng)遵守甲方依法制定的各項(xiàng)規(guī)章制度和勞動(dòng)紀(jì)律。
二、甲方有權(quán)依據(jù)國(guó)家和天津市的有關(guān)規(guī)定及企業(yè)的規(guī)章制度和勞動(dòng)紀(jì)律對(duì)乙方實(shí)行管理。
第七條 本合同的解除、變更、終止
一、經(jīng)甲乙雙方協(xié)商一致,本合同可以變更或解除。
二、以完成一定的工作為期限的勞動(dòng)合同,工作完成勞動(dòng)合同終止。
三、有固定期限的勞動(dòng)合同,合同期滿甲乙雙方任何一方不再續(xù)訂的,勞動(dòng)合同終止。
第八條 違反本合同的責(zé)任及雙方約定的其他事項(xiàng):
_________。
第九條 勞動(dòng)爭(zhēng)議處理
甲乙雙方因履行本合同發(fā)生勞動(dòng)爭(zhēng)議時(shí),應(yīng)協(xié)商解決;協(xié)商無(wú)效的,任何一方可向有管轄權(quán)的勞動(dòng)爭(zhēng)議仲裁委員會(huì)申請(qǐng)仲裁;甲乙雙方任何一方也可以直接向勞動(dòng)爭(zhēng)議仲裁委員會(huì)申請(qǐng)仲裁。對(duì)仲裁裁決不服的,可以向有管轄權(quán)的人民法院提起訴訟。
第十條 其他事項(xiàng)
一、本合同未盡事宜按國(guó)家和天津市的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。
二、本合同甲乙雙方簽字蓋章后,雙方必須嚴(yán)格遵照?qǐng)?zhí)行。本合同一式兩份,甲乙雙方各執(zhí)一份。
甲方(蓋章):_________乙方(簽字):_________
法定代表人
或委托人(簽字或蓋章):_________
_________年___月___日 _________年___月___日
經(jīng)審查,本合同符合國(guó)家和本市有關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章規(guī)定,予以鑒證。
鑒證機(jī)關(guān)(蓋章):_________鑒證人(蓋章):_________
鑒證日期:_________年___月___日
附件
續(xù)訂勞動(dòng)合同
經(jīng)雙方協(xié)商同意,續(xù)訂本合同。
(一)續(xù)訂期限執(zhí)行下列第_________款:
1、有固定期限勞動(dòng)合同。本合同期限為_________年(月),自_________年_________月_________日起,至_________年_________月_________日止。
2、無(wú)固定期限,自_________年_________月_________日始,終止合同條件約定如下:
_________。
(二)補(bǔ)充約定事項(xiàng):
_________。
甲方(蓋章):_________乙方(簽字):_________
法定代表人
或委托人(簽字或蓋章):_________
_________年___月___日 _________年___月___日
經(jīng)審查,本合同符合國(guó)家和本市有關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章規(guī)定,予以鑒證。
鑒證機(jī)關(guān)(蓋章):_________鑒證人(蓋章):_________
鑒證日期:_________年___月___日
變更勞動(dòng)合同
經(jīng)甲乙雙方協(xié)商同意,對(duì)本合同作出如下變更:
(一)_________。
(二)_________。
(三)_________。
(四)_________。
甲方(蓋章):_________乙方(簽字):_________
法定代表人
或委托人(簽字或蓋章):_________
_________年___月___日 _________年___月___日
經(jīng)審查,本合同符合國(guó)家和本市有關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章規(guī)定,予以鑒證。
[關(guān)鍵詞]黃酮;抑菌活性;協(xié)同作用;構(gòu)效關(guān)系;作用機(jī)制
[收稿日期]2013-05-21
[基金項(xiàng)目]國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-22);廣東省自然科學(xué)基金團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(粵科基字[2009]2號(hào));廣東省自然科學(xué)基金博士啟動(dòng)項(xiàng)目(粵科基字[2010]3號(hào));廣東省農(nóng)科院院長(zhǎng)基金(201006);廣州市珠江科技新星專項(xiàng)(201387)
[通信作者]*廖森泰,研究員,碩士生導(dǎo)師,Tel:(020)87596248,E-mail: liaost@163、com;*劉凡,博士,助理研究員,Tel: (020)87236897,E-mail: liufan1234@126、com
[作者簡(jiǎn)介]游庭活,碩士研究生,Tel:13602429365,E-mail: youtinghuo@126、com由于抗生素的濫用,病原菌日益廣泛的耐藥性已經(jīng)成為21世紀(jì)全球公共衛(wèi)生面臨的最嚴(yán)峻挑戰(zhàn)之一[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì),一種新的抗菌藥物從研制到臨床應(yīng)用一般需要5~10年,而細(xì)菌產(chǎn)生耐藥僅需2~3年。因此,研發(fā)新的抗菌藥物已經(jīng)成為醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)面臨的迫切任務(wù)?;谀壳翱咕幬锏难芯楷F(xiàn)狀,天然產(chǎn)物的抑菌作用受到了普遍關(guān)注,尤其是黃酮類化合物,已經(jīng)成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)之一[2]。大量文獻(xiàn)證明,自然界中從低等植物到高等植物,源自植物的花、葉、種子、果實(shí)以及根、莖中提取的許多類黃酮,均具有抑菌作用[3-5]。關(guān)于黃酮類化合物抑菌活性的研究也有較多綜述,而本文重點(diǎn)對(duì)自2005年以來(lái)在黃酮類化合物的抑菌活性、構(gòu)效關(guān)系及作用機(jī)制等方面取得的研究進(jìn)展作一綜述。
1黃酮結(jié)構(gòu)特征與分類
黃酮類化合物是廣泛存在于自然界的一大類化合物。黃酮類化合物是指2個(gè)苯環(huán)(A環(huán)與B環(huán))通過(guò)C3連接而成的一系列化合物,也就是具有C6-C3-C6結(jié)構(gòu),并且是以2-苯基色原酮為母核的化合物?,F(xiàn)代研究證實(shí),黃酮的基本骨架中A環(huán)源于3個(gè)丙二酰輔酶A,而B環(huán)由桂皮酰輔酶A生物合成而來(lái)[6]。自然界中黃酮類化合物多以苷類形式存在,由于苷元不同,以及糖的種類、數(shù)量、連接位置和連接方式的不同,使自然界中形成了數(shù)目眾多、結(jié)構(gòu)各異的黃酮類化合物。
根據(jù)黃酮類化合物A環(huán)和B環(huán)中間的C3鏈的氧化程度、C3鏈?zhǔn)欠癯森h(huán)等結(jié)構(gòu)特征,可將黃酮類化合物分為:黃酮(flavone)、二氫黃酮(flavonone) 、黃酮醇(flavonol)、二氫黃酮醇(flavanonol)、異黃酮(isoflavone)、二氫異黃酮(isoflavanone)、查耳酮(chalcone)、二氫查耳酮(dihydrochalcone)、橙酮 (aurone)、花色素(anthocyanidins)、黃烷-3-醇(flavan-3-ol)、黃烷-3,4二醇(flavan-3,4-diols)、雙苯吡喃酮(xanthone)和雙黃酮(biflavonoids)等[7]。黃酮類化合物的主要化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。
2黃酮類化合物直接抑菌作用
2、1黃酮類化合物直接抑菌活性
自20世紀(jì)60年代以來(lái),關(guān)于天然產(chǎn)物中黃酮類化合物抑菌活性的研究報(bào)道日益豐富。進(jìn)入21世紀(jì)后,特別是最近幾年,對(duì)黃酮類化合物抑菌活性的研究更加廣泛、深入。有研究表明,某些從植物或蜂膠中獲得的黃酮提取物具有很強(qiáng)的抑菌活性,其最低抑菌濃度(MIC)甚至小于1、0 mg? L-1 [8-10]。黃酮類化合物在抑菌作用方面表現(xiàn)出的良好活性,吸引了越來(lái)越多的科研人員開展相關(guān)研究。李國(guó)章等[5]研究發(fā)現(xiàn)超臨界CO2萃取的桑椹子總黃酮提取物對(duì)細(xì)菌和霉菌均具有抑制作用,對(duì)細(xì)菌的抑制作用更強(qiáng)。陳乃東等[4]還比較了不同提取溶劑對(duì)春花胡枝子總黃酮提取率及抑菌活性的影響??虏傻萚11]采用濾紙片法對(duì)從番石榴葉中得到的黃酮類化合物――槲皮素進(jìn)行了抑菌活性研究,發(fā)現(xiàn)槲皮素對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、志賀氏菌及枯草芽孢桿菌均有抑制作用,其中對(duì)大腸桿菌和沙門氏菌的抑制作用最強(qiáng)。魏福華等[12]研究發(fā)現(xiàn)大豆異黃酮及其水解苷元對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和沙門氏菌均有一定的抑菌活性,且存在濃度依賴效應(yīng),大豆異黃酮對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的抑制效果優(yōu)于革蘭陰性菌。
2、2構(gòu)效關(guān)系研究
總體來(lái)說(shuō),關(guān)于黃酮類化合物抑菌活性構(gòu)效關(guān)系的研究報(bào)道相對(duì)較少。2005年,Cushnie等[13]對(duì)此前黃酮類化合物
圖1黃酮類化合物的主要結(jié)構(gòu)
Fig、1Skeleton structures of the main classes of flavonoids
抑菌活性構(gòu)效關(guān)系的研究進(jìn)行了綜述。近年來(lái),對(duì)于黃酮化合物抑菌活性的構(gòu)效關(guān)系有了更為深入的研究。從結(jié)構(gòu)特征上可以發(fā)現(xiàn),查耳酮(包括二氫查耳酮)具有其他黃酮類化合物所沒(méi)有的C3鏈開環(huán)結(jié)構(gòu)。雖然很多研究結(jié)果表明,對(duì)開環(huán)結(jié)構(gòu)的查耳酮具有活性增益效果的結(jié)構(gòu)單元對(duì)其他黃酮類化合物同樣具有增效作用,但是為了更為清晰地闡明黃酮類化合物抑菌活性的構(gòu)效關(guān)系,本文仍將黃酮類化合物分為查耳酮(包括二氫查耳酮)和其他黃酮類化合物分別進(jìn)行闡述。
2、2、1查耳酮類對(duì)于A環(huán):綜觀前人研究可以發(fā)現(xiàn),A環(huán)的羥基化及親脂性對(duì)查耳酮的抑菌活性很重要。Avila等[14]研究證明,查耳酮A環(huán)的2′位的羥基化能增強(qiáng)其抑菌活性,并發(fā)現(xiàn)這種增效作用可能是通過(guò)促進(jìn)查耳酮結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性而間接實(shí)現(xiàn)的。Liu X L等[15]發(fā)現(xiàn),A環(huán)4′位的羥基化也能提高查耳酮的抑菌活性。Alvarez M D等[16]研究表明,A環(huán)其他位置的羥基化也能提高查耳酮的抑菌活性。Avila[14]和Batovska等[17]的研究都表明,A環(huán)的親脂性對(duì)于查耳酮的抑菌活性很重要。A環(huán)上3′位的異戊二烯基取代能顯著增強(qiáng)查耳酮的抑菌活性,而A環(huán)2′位的乙酰氧基化或甲氧基化以及A環(huán)3′和5′位的氟取代都會(huì)降低查耳酮的抑菌活性。但奇特的是,Nielsen[18]發(fā)現(xiàn)A環(huán)4′位的羰基化能提高查耳酮的水溶性近60倍,卻對(duì)其抑菌活性影響很小。
對(duì)于B環(huán):在B環(huán)4位上的取代對(duì)于查耳酮的抑菌作用十分重要。Nowakowska等[19]研究表明,B環(huán)4位上的C6鏈烷基取代、哌啶基取代或羥基取代能增強(qiáng)查耳酮的抑菌活性。Batovska等[17]研究表明,相對(duì)于A環(huán)的親脂性,查耳酮B環(huán)上的羥基化對(duì)其抑菌活性的增效作用并不明顯。B環(huán)3位或5位上的三氟甲基或三溴甲基取代也能提高查耳酮的抑菌活性。
2、2、2其他黃酮類化合物對(duì)于A環(huán):7位上O-?;〈鶾20]或O-烷胺基取代[21]都能提高這類黃酮化合物的抑菌活性。Smejkal等[22]研究表明,A環(huán)5位上的羥基化對(duì)增強(qiáng)黃酮類化合物的抑菌活性同樣重要。Li H Q等[23]發(fā)現(xiàn)A環(huán)的6位或者8位上的親脂性取代基團(tuán)也能增強(qiáng)黃酮類化合物的抑菌活性。
對(duì)于B環(huán)上取代基的構(gòu)效關(guān)系研究相對(duì)較少。Smejkal[22]等的研究表明,B環(huán)上的甲氧基取代會(huì)削弱黃酮類化合物的抑菌活性。
對(duì)于C環(huán),3位上的羥基化能增強(qiáng)黃酮類化合物的抑菌活性。越來(lái)越多的研究表明,3位上的O-酰基取代或O-烷基取代能增強(qiáng)黃酮類化合物的抑菌活性[24-25]。Mughal等[26]研究表明,C環(huán)4位上的O被S或N取代,能明顯增強(qiáng)黃酮類化合物的抑菌活性。
2、3作用機(jī)制研究
2005年之前的研究中,大致將黃酮類化合物的直接抑菌作用機(jī)制歸納為3種:一是降低膜的流動(dòng)性或者膜穿孔而導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜的損傷[27-28];二是抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶活性進(jìn)而抑制細(xì)菌核酸的合成[29];三是抑制NADH-細(xì)胞色素C還原酶活性而抑制細(xì)菌的能量代謝[30]。
近年來(lái),對(duì)于黃酮類化合物的直接抑菌作用機(jī)制有了更進(jìn)一步的研究。越來(lái)越多的研究再次證明了以上3種作用機(jī)制。研究表明,黃酮醇類、黃烷-3-醇類和黃烷酮類能通過(guò)過(guò)氧化氫途徑破壞細(xì)胞質(zhì)膜從而抑制細(xì)菌生長(zhǎng)[31-33],黃烷-3-酯與異黃酮類則可通過(guò)抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶活性[34]或抑制二氫葉酸還原酶活性[35]來(lái)抑制細(xì)菌核酸的合成。Chinnam N等[36]證實(shí)黃烷-3-醇和黃酮類的抑菌機(jī)制是通過(guò)抑制ATP合成酶活性,進(jìn)而抑制細(xì)菌的能量代謝來(lái)產(chǎn)生抑菌活性。另外,近期的研究還提出了2種新的作用機(jī)制:一是通過(guò)抑制D-丙氨酸-D-丙氨酸連接酶活性[37]而抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成;二是通過(guò)抑制FabG,F(xiàn)abI,F(xiàn)abZ,Rv0636,KAS III等關(guān)鍵酶的活性[38-41],而抑制細(xì)菌細(xì)胞膜的合成。
至此,作者認(rèn)為黃酮類化合物抑菌作用機(jī)制可以擴(kuò)展為5種:一是損傷細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜;二是抑制細(xì)菌核酸的合成;三是抑制細(xì)菌的能量代謝;四是抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成;五是抑制細(xì)菌細(xì)胞膜的合成。
但是,上述大多數(shù)研究只是針對(duì)一、兩個(gè)化合物進(jìn)行的。因此,在很長(zhǎng)一段時(shí)間里,對(duì)于黃酮類化合物是否: ①每種不同結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物具有其獨(dú)立抑菌作用機(jī)制;②所有的黃酮類化合物都有多途徑的抑菌作用機(jī)制;③所有的黃酮類化合物都具有同樣的單一途徑抑菌作用機(jī)制,仍然還有爭(zhēng)論。
由于大多數(shù)黃酮類化合物在結(jié)構(gòu)上存在很大的相似性,研究者們普遍認(rèn)為關(guān)于每種不同結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物具有其獨(dú)立抑菌作用機(jī)制的假說(shuō)成立的可能性最小。此外,近年來(lái)對(duì)于黃酮類化合物的抑菌活性研究進(jìn)展較快,越來(lái)越多的活性黃酮如槲皮素被多次研究,并且得出了多種作用機(jī)制。這就使得另外2種假說(shuō),所有的黃酮類化合物都具有多途徑的抑菌作用機(jī)制或者具有同樣的單一作用機(jī)制,更能為人們所接受。
盡管許多研究都認(rèn)為黃酮類化合物應(yīng)該具有多途徑的抑菌作用機(jī)制[42],但是最近的研究進(jìn)展表明多途徑作用機(jī)制假說(shuō)并不一定可靠。例如,Li B H等[43]研究發(fā)現(xiàn)表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)對(duì)從大腸桿菌中分離提取的FabG酶有聚集作用,但是目前尚不清楚EGCG是否對(duì)其他的酶也有聚集效果或其他的黃酮類化合物對(duì)類似酶也有同樣的聚集作用。更重要的是,這一研究結(jié)果,更加使人們對(duì)通過(guò)體外純化的酶抑制試驗(yàn)來(lái)探討黃酮類化合物的抑菌作用機(jī)制的結(jié)果產(chǎn)生懷疑:黃酮類化合物抑菌作用可能源于引起相關(guān)酶的聚集,而非對(duì)酶的特異性抑制。
此外,在一些關(guān)于抑菌作用機(jī)制的研究中,可能存在著“因果關(guān)系”的混淆。例如,如果一個(gè)抑菌藥物破壞了細(xì)菌的細(xì)胞質(zhì)膜,那么必將引起質(zhì)子動(dòng)力勢(shì)的混亂,繼而影響ATP的生成和胞內(nèi)外物質(zhì)的運(yùn)輸。又例如,如果細(xì)菌細(xì)胞能量代謝或營(yíng)養(yǎng)代謝的能力降低,那么其合成DNA及肽聚糖的能力也將減弱。在這種情況下,人們很容易將一個(gè)單一途徑的抑菌作用機(jī)制誤認(rèn)為多途徑的抑菌作用機(jī)制。同樣地,如果一個(gè)抑菌藥物抑制了細(xì)菌DNA回旋酶的活性,那么可能引發(fā)細(xì)菌細(xì)胞的程序性死亡與自溶。在這種情況下,抑制細(xì)菌核酸合成途徑的抑菌作用機(jī)制很有可能被誤認(rèn)為是破壞細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜途徑的作用機(jī)制。
3黃酮類化合物的協(xié)同抑菌作用
3、1黃酮類化合物的協(xié)同抑菌活性研究
近年來(lái),有很多關(guān)于黃酮類化合物增強(qiáng)抗生素抑菌活性的研究報(bào)道。盡管研究所采用的方法不盡相同,但是都通過(guò)部分抑菌濃度指數(shù)(FICI)分析表明,黃酮類化合物對(duì)抗生素抑菌活性的增效作用是真正的協(xié)同作用而非簡(jiǎn)單的加和作用[44-46]。在所有黃酮類化合物中,黃烷-3-醇類化合物的抑菌協(xié)同作用最受關(guān)注,也研究的最為深入。Stapleton等[47]研究發(fā)現(xiàn)沒(méi)食子酰基黃烷-3-醇類,如(-)-表兒茶素沒(méi)食子酸酯能夠增強(qiáng)β-內(nèi)酰胺類抗生素對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的抑菌活性約512倍。農(nóng)朝贊等[48]研究證實(shí)黃酮類化合物與大環(huán)內(nèi)酯類抗生素具有協(xié)同抗菌作用,其作用機(jī)制可能是兩者化學(xué)結(jié)構(gòu)上具有互補(bǔ)性,有望成為藥物工業(yè)生產(chǎn)抗菌新藥的根據(jù)。
3、2構(gòu)效關(guān)系研究
相對(duì)于直接抑菌作用,黃酮類化合物協(xié)同抑菌作用的構(gòu)效關(guān)系研究還較少。然而,關(guān)于黃烷-3-醇的研究結(jié)果明確證實(shí),沒(méi)食子?;驔](méi)食子酸酯基團(tuán)對(duì)于黃烷-3-醇增強(qiáng)β-內(nèi)酰胺酶對(duì)MRSA的抑制活性至關(guān)重要[47]。另外,有研究表明,在A環(huán)5位、7位以及B環(huán)上的羥基化對(duì)于黃酮類、黃酮醇類、黃烷酮或黃烷-3-醇類化合物增強(qiáng)異煙肼對(duì)結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)的抑菌活性具有重要作用[44]。
3、3作用機(jī)制研究
研究表明,沒(méi)食子酰黃烷-3-醇可能通過(guò)減弱細(xì)菌細(xì)胞壁磷壁酸的D-丙氨?;饔?,或致使青霉素結(jié)合蛋白2a (PBP2a)失活及離位,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)β-內(nèi)酰胺抑菌活性的調(diào)節(jié)[49-50]。其作用機(jī)制可能是抑制了PBP2a的表達(dá)或促進(jìn)了黃烷-3-醇與肽聚糖的結(jié)合[51]。對(duì)于其他黃酮類化合物,如黃酮、異黃酮、黃酮醇、黃烷酮等,有研究表明,這些化合物可能通過(guò)導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞外排泵失活,或干擾細(xì)胞質(zhì)膜穩(wěn)定性,或阻斷PBP2a的合成,或抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶活性等途徑來(lái)增強(qiáng)β-內(nèi)酰胺類抗生素的抑菌活性[52-53]。
4黃酮類化合物對(duì)細(xì)菌致病性的影響
4、1抑制分選酶的活性
許多革蘭陽(yáng)性菌的表面蛋白都是經(jīng)過(guò)分選酶的催化作用而組裝、錨定到細(xì)胞壁上, 由于表面蛋白在病原菌的致病性方面起關(guān)鍵作用, 所以分選酶有可能成為降低革蘭陽(yáng)性菌致病性的重要藥物靶標(biāo)[54]。Kang等[55]在細(xì)胞水平上研究了桑色素對(duì)金黃色葡萄球菌分選酶A和分選酶B的活性,結(jié)果表明,經(jīng)桑色素處理后,金黃色葡萄球菌與纖維蛋白原的結(jié)合能力明顯下降,進(jìn)而導(dǎo)致其致病性明顯減弱。同時(shí)還表明,桑色素對(duì)細(xì)菌分選酶的抑制作用是特異性的。這也證明,對(duì)分選酶的抑制作用可能是黃酮類化合物(如黃烷3-醇,黃烷酮)抑制革蘭陽(yáng)性菌感染的重要途徑。
4、2中和細(xì)菌毒素
細(xì)菌毒素在細(xì)菌致病性方面發(fā)揮著重要作用,甚至在細(xì)菌本身死亡后細(xì)菌毒素仍能發(fā)揮作用。最新研究表明,黃酮類化合物能夠中和細(xì)菌毒素從而抑制細(xì)菌致病性。Choi等[56]通過(guò)體內(nèi)、體外試驗(yàn)證實(shí),兒茶素多聚體能夠中和金黃色葡萄球菌毒素。Oh等[57]研究表明,異黃酮也能中和細(xì)菌毒素,如經(jīng)過(guò)金雀異黃素(genistein)處理過(guò)的HeLa細(xì)胞能夠防御創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)毒素RtxA1的損傷。動(dòng)物試驗(yàn)也證實(shí),金雀異黃素對(duì)創(chuàng)傷弧菌在CD-1小鼠體內(nèi)感染也有一定的保護(hù)作用。此外,Delehanty等[58]研究表明,兒茶素和表兒茶素的聚合物能夠中和內(nèi)毒素即脂多糖(LPS)。并且在膿毒性休克的發(fā)展早期,類黃酮化合物能阻斷LPS和其受體TLR4/MD2,CD14之間的相互作用。
4、3抑制致病因子的分泌
金黃色葡萄球菌致病性與其分泌相關(guān)的酶和毒素密切相關(guān)。最近研究表明,黃酮類化合物能夠抑制這些致病因子的分泌。Shah等[59]通過(guò)檢測(cè)處理過(guò)的金黃色葡萄球菌上清液對(duì)血漿的凝固能力及對(duì)紅細(xì)胞的溶解能力,發(fā)現(xiàn)表兒茶素沒(méi)食子酸酯能夠抑制細(xì)菌凝固酶和毒素的分泌。Qiu等[60-61]研究表明,甘草查爾酮A也能抑制金黃色葡萄球菌α-毒素的分泌,并能減少腸毒素的分泌。通過(guò)實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在抑制細(xì)菌毒素分泌的同時(shí)伴隨著agrA基因轉(zhuǎn)錄水平的下降。這說(shuō)明甘草查爾酮A抑制金黃色葡萄球菌α-毒素的分泌至少部分是通過(guò)抑制agrA雙組分系統(tǒng)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
5結(jié)論
自2005年以來(lái),黃酮類化合物抗菌活性的研究取得了很大進(jìn)展,使得有必要對(duì)前人的研究成果及時(shí)地進(jìn)行梳理和總結(jié),以便更好地指導(dǎo)今后的研究工作。本文簡(jiǎn)單介紹了黃酮類化合物的直接抑菌活性、協(xié)同抑菌活性及其對(duì)細(xì)菌毒性的影響。在今后的黃酮類化合物研究中,在測(cè)定黃酮類化合物抑菌活性基礎(chǔ)上,確定其活性是否具有選擇性,探明其構(gòu)效關(guān)系,分析其可能的作用機(jī)制是值得努力的方向。隨著細(xì)菌耐藥性的日益嚴(yán)重,研究新抗菌藥的任務(wù)也越來(lái)越迫切,黃酮類化合物抑菌活性的研究將對(duì)今后抑菌新藥物的研制提供了一個(gè)重要方向。
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Advance in studies on antibacterial effect of flavonoids
YOU Ting-huo1, 2, LIU Fan22*, WEN Lu1, ZOU Yu-xiao 2, LIAO Sen-tai2*, XIAO Geng-sheng2,
(1、Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China;
2、 Key Laboratory of Agro-Food Processing of Guangdong Province, Sericulture and Agro-Food Research Institute of
Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510610, China)
[Abstract]As antibiotic drug resistance has become one of the most serious threats to global public health, there is a pressing need to look for new effective therapeutic drugs、 Flavonoids are a large class of chemicals widely exist in plants, and have such effects as direct antibiotics, synergistic antibiotics and inhibition of bacterial activity、 In this article, we made a summary for the advance in studies on the antibacterial effects of flavonoids and their mechanism、
2004年12月,原告與被告張清簽定購(gòu)房合同。雙方約定:原告將自有的住房一套出賣給被告,價(jià)款8萬(wàn)元。被告先付定金1000元,同時(shí)預(yù)付房款2 萬(wàn)元,余款在原告辦妥房屋產(chǎn)權(quán)過(guò)戶手續(xù)后3日內(nèi)付清。雙方當(dāng)日簽定合同后,被告依約將預(yù)付款、定金共計(jì)2.1萬(wàn)元給付原告,原告也于當(dāng)日將房屋交付給被告,被告隨即遷往入住。2005年1月,被告因?qū)λ?gòu)房屋不滿意,就搬了出來(lái)。并向原告明確表示,自己不要房屋了,只要求原告退還預(yù)付房款2萬(wàn)元,定金就算了。原告以辦理房屋產(chǎn)權(quán)過(guò)戶手續(xù)過(guò)程中已產(chǎn)生稅、費(fèi)等3000余元,要求被告賠償。雙方協(xié)商未果,原告訴至瀘縣人民法院。
如何處理本案有三種觀點(diǎn):第一種觀點(diǎn)認(rèn)為,原被告簽定的房屋買賣合同及其中的定金條款真實(shí)合法有效,合同履行過(guò)程中,被告以犧牲定金為代價(jià)拒絕履行合同,原告只能獲得被告的1000元定金,被告的2萬(wàn)元預(yù)付款應(yīng)予以退還,而對(duì)原告產(chǎn)生的稅費(fèi)等損失,被告不應(yīng)賠償;第二種觀點(diǎn)認(rèn)為,原被告簽定的房屋買賣合同及其中的定金條款真實(shí)合法有效,雙方均應(yīng)依約履行各自的義務(wù)。合同履行過(guò)程中,被告明確表示將不履行合同,被告已嚴(yán)重違約,被告除無(wú)權(quán)要求退還定金外,還應(yīng)賠償原告辦證過(guò)程中產(chǎn)生的損失3000元;第三種觀點(diǎn)認(rèn)為,定金罰則和賠償實(shí)際損失不能同時(shí)適用,但是如果定金罰則不能完全彌補(bǔ)守約方的實(shí)際損失時(shí),可以適用賠償實(shí)際損失的責(zé)任。具體到本案,被告應(yīng)當(dāng)賠償原告造成的實(shí)際損失3000元。
筆者贊同第三種觀點(diǎn),分述如下:
根據(jù)我國(guó)《合同法》的有關(guān)理論,定金作為一種債的擔(dān)保方式,分為立約定金、訂約定金、證約定金、解約定金、違約定金等。我國(guó)《合同法》上規(guī)定的是什么性質(zhì)的定金?法律未明確規(guī)定。大多數(shù)人認(rèn)為是解約定金和違約定金。上述第一種觀點(diǎn)就是把定金作為解約定金看待的。被告以犧牲定金為代價(jià),取得解除合同的權(quán)利。但當(dāng)雙方約定的定金較少,而守約方因違約而產(chǎn)生的損失較大時(shí),采取這種觀點(diǎn)處理,顯然對(duì)守約方不利;第二種觀點(diǎn)把定金作為違約定金,認(rèn)為被告已嚴(yán)重違約,被告除要犧牲定金為代價(jià)外, 還應(yīng)賠償原告的損失。這種觀點(diǎn)在讓被告承擔(dān)定金罰則責(zé)任的同時(shí),又讓被告賠償實(shí)際損失,其實(shí)是使被告受到了雙重處罰,顯然于被告不公;第三種觀點(diǎn)在確認(rèn)被告違約的同時(shí),不是簡(jiǎn)單地適用定金罰則或者同時(shí)適用賠償實(shí)際損失,而是根據(jù)實(shí)際情況具體分析。當(dāng)定金與實(shí)際損失相當(dāng)時(shí),由原告選擇適用。當(dāng)造成的損失較定金較多時(shí),應(yīng)當(dāng)以賠償實(shí)際損失為限。采用這種觀點(diǎn)處理本案較為妥當(dāng)。
四川省瀘縣人民法院·鄭紅英 毛啟軍