前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇實驗動物研究范文，相信會為您的寫作帶來幫助，發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。

實驗動物研究范文第1篇

【關(guān)鍵詞】 生物醫(yī)學；動物；實驗

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.09.785 文章編號：1004-7484（2013）-09-5430-01

近年來，生物醫(yī)學研究工作發(fā)展迅猛，實驗動物在生物醫(yī)學研究中的作用也愈發(fā)突顯出來。實驗動物的應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛，無論是在疾病的預(yù)防、診斷、治療方面還是藥品、器械的安全性評價方面都非常理想，為眾多生物醫(yī)學研究提供了可靠的保證。我國實驗動物應(yīng)用發(fā)展日臻成熟，但是在實驗動物管理工作中仍存在許多問題。如實驗動物設(shè)施管理不規(guī)范、實驗動物和標準化的實驗環(huán)境及條件不規(guī)范等問題仍然十分普遍。這些問題不僅會對實驗結(jié)果的準確性、可靠性和重復(fù)性產(chǎn)生較大影響，同時也嚴重違反實驗動物福利原則。因此，建立系列的實驗動物管理規(guī)范、開放專業(yè)動物實驗室、創(chuàng)建動物實驗服務(wù)技術(shù)平臺等需要在今后的工作中逐步完善。

1 實驗動物應(yīng)用規(guī)范化

規(guī)范的實驗動物模型的基本要求是能夠準確再現(xiàn)，對影響因素嚴格控制，保證各項指標的一致性。生物醫(yī)學研究中能夠影響實驗結(jié)果的因素主要有動物因素和環(huán)境因素，其中動物因素包括：遺傳、性別、年齡、健康狀況等；環(huán)境因素包括：營養(yǎng)、氣候、理化、居住等[1]。因此，規(guī)范實驗動物設(shè)施管理工作，對實驗結(jié)果的可靠性具有重要意義。

1.1 實驗動物設(shè)施規(guī)范建設(shè) 實驗動物科學是一門邊緣的、交叉的學科，需通多學科、多領(lǐng)域共同完成。在實驗動物設(shè)施建設(shè)中，實驗動物環(huán)境設(shè)施是核心任務(wù)，也是實驗生物的生存基礎(chǔ)。只有實驗動物設(shè)施規(guī)范建設(shè)工作規(guī)范化才能提高教學和科研的質(zhì)量，保證實驗結(jié)果可靠。

實驗動物環(huán)境設(shè)施按照功能的不同可分為實驗生產(chǎn)設(shè)備和動物實驗設(shè)施；在兩種設(shè)施中根據(jù)空氣凈化程度要求的不同分為普通環(huán)境設(shè)施、屏障環(huán)境設(shè)施、隔離環(huán)境設(shè)施；三種設(shè)施環(huán)境又從安全性的角度劃分為正壓環(huán)境和負壓環(huán)境[2]，見表1。

1.2 實驗動物消毒管理 不同的實驗動物的飼養(yǎng)環(huán)境會不同程度地影響其生長發(fā)育情況及各項生理指標，這些因此都會影響到實驗結(jié)果的準確性。因此，對實驗動物飼養(yǎng)和實驗過程中的消毒工作提出了非常高的要求。通過合理的人流、物流、動物流和氣流安排，結(jié)合完善的消毒滅菌制度可以有效防止動物實驗中發(fā)生交叉污染，保證動物實驗的質(zhì)量和可靠性。消毒工作[3]要以動物飼料、飲水、居住環(huán)境消毒為主，不斷加強及完善飼養(yǎng)人員的職業(yè)安全衛(wèi)生防護措施，規(guī)范操作流程。

1.3 人員管理 我院在實驗動物管理中非常注重的工作人員的管理。動物實驗設(shè)施工作的人員必須經(jīng)過嚴格的技能培訓(xùn)與考核，能夠熟練地掌握實驗中的無菌操作和各種儀器設(shè)備的使用，并且嚴格執(zhí)行標準操作規(guī)程（SOP），強化工作人員的無菌觀念。

2 實驗動物應(yīng)用現(xiàn)狀

2.1 實驗動物種類和品系選擇 目前生物醫(yī)學研究選取的動物種類主要有：大鼠、小鼠、豬、犬、猴、兔、貓、豚鼠、果蠅、兩棲類和魚等[4]。各種動物所占的比例大概為：小鼠占38%左右，大鼠占25%左右，兔子占7%左右，犬占6%左右，其他特種占24%左右。在最新的調(diào)查中顯示：大鼠的使用率呈下降趨勢，小鼠的使用率在2002年首次超過大鼠；非哺乳動物的使用率逐步升高，魚和果蠅的使用量也有所增加，雞的使用率變化不大。

2.2 轉(zhuǎn)基因動物應(yīng)用 轉(zhuǎn)基因動物（Transgenic Animals）是指可以用試驗導(dǎo)入的方法使其外源基因在染色體基因組內(nèi)穩(wěn)定的進行整合，并能通過遺傳復(fù)制給后代的動物。被導(dǎo)入動物基因組的外源基因被稱為轉(zhuǎn)基因（transgene）[5]。當外源基因在轉(zhuǎn)基因動物體內(nèi)表達并培育出表型與人類相似的動物模型，就被稱為轉(zhuǎn)基因動物模型。

目前，許多疾病很難通過人工定向培育的方法獲得實驗動物模型。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的出現(xiàn)為此提供了可能，轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以在動物原有遺傳基因基礎(chǔ)上，通過改變基因的表達水平以模擬人類疾病的動物模型。轉(zhuǎn)基因動物模型產(chǎn)生疾病的原因清楚、模型動物的癥狀與人類相似。因此，轉(zhuǎn)基因疾病動物模型在實驗中的應(yīng)用越來越廣泛。

3 總結(jié)

實驗動物對于人類健康的作用是不爭的事實，動物實驗是生物醫(yī)學研究領(lǐng)域中不可替代的技術(shù)之一。近年來，由于人類對動物保護意識的興起，實驗動物面臨嚴峻的倫理學問題日益突顯出來。因此，在動物實驗工作中要以人類健康為目的，在實驗過程中將對動物的傷害控制到最低程度才能符合社會的倫理道德要求。

另外，要積極開展實驗動物應(yīng)用研究，規(guī)范實驗動物工作，不斷提高實驗動物質(zhì)量，以滿足科研工作的快速發(fā)展；加強實驗動物技術(shù)人員的培訓(xùn)和考核制度，定期對技術(shù)人員進行系統(tǒng)的學習和培訓(xùn)，提高人員素質(zhì)。

參考文獻

[1] 龐萬勇，生，賀爭鳴，等.美國實驗動物醫(yī)學發(fā)展簡史——對中國實驗動物醫(yī)學發(fā)展的思考[J].中國比較醫(yī)學雜志，2011，21（10）：335-337.

[2] 張國偉，戾雪濤，彭濤，等.實驗動物替代技術(shù)在中國實驗動物部分調(diào)查初步報告[J].中國比較醫(yī)學雜志，2011，21（10）：1107-1109.

[3] 何宏星，黃黎玲，肖力，等.建立標準化動物實驗技術(shù)服務(wù)平臺的初探.實驗室科學[J].2009，8（4）：41-43.

實驗動物研究范文第2篇

【關(guān)鍵詞】心理應(yīng)激；束縛應(yīng)激；動物模型

近年來，隨著社會的發(fā)展和生活節(jié)奏的不斷加快，人們面臨的壓力（應(yīng)激）也越來越大，其中主要有生活、工作和職業(yè)、心理3個方面的壓力，對人類的身心健康造成了傷害。1936 年加拿大病理生理學家 Selye 第一次提出應(yīng)激（Stress）一詞，此后，這個詞便在世界范圍內(nèi)被廣泛采用。Selye將應(yīng)激描述為機體對外界或內(nèi)部各種非常刺激所產(chǎn)生的非特異性應(yīng)答反應(yīng)的總和。在典型情況下，應(yīng)激的發(fā)展可分為3個階段，即驚恐反應(yīng)或動員階段（stage of mobilization or alarm reaction）、抵御或適應(yīng)階段（stage of adaptation or resistance）、衰竭階段（stage of exhaustion）。心理應(yīng)激是有機體在某種環(huán)境刺激作用下由于客觀要求和應(yīng)付能力不平衡所產(chǎn)生的一種適應(yīng)環(huán)境的緊張反應(yīng)狀態(tài)，包括面對刺激時的情緒以及知覺反應(yīng)。心理應(yīng)激的產(chǎn)生可提高人的警覺水平，應(yīng)付各種環(huán)境變化的挑戰(zhàn)，但長時間的應(yīng)激則會損害人的身心健康。

隨著對應(yīng)激和應(yīng)激性疾病機制研究的深入，應(yīng)激動物模型也應(yīng)運而生，在眾多動物模型中，束縛應(yīng)激作為一種非損傷性刺激，與人類身心性疾病的過程有相似性，因而日益引起人們的關(guān)注，逐漸成為應(yīng)激研究領(lǐng)域中的熱點之一。有研究證明，女性更容易受應(yīng)激相關(guān)的心理疾病影響，其發(fā)生率是男性的 2 倍，束縛應(yīng)激對雌性生殖功能的影響大部分都集中在妊娠期間，主要研究束縛應(yīng)激對母體以及后代的影響。雌性動物慢性暴露在應(yīng)激條件下，更能模擬日常生活中女性所受的應(yīng)激方式，因此有必要進行詳細的研究。目前，BALB/c 小鼠和C57BL/6J小鼠被廣泛地應(yīng)用于行為和遺傳學研究[7]。此次研究擬以8周齡BALB/c 小鼠和C57BL/6J小鼠為研究對象，以急性（24h）以及慢性（8h/d，60d）束縛應(yīng)激為心理應(yīng)激模型，分別研究急性和慢性心理應(yīng)激對兩品系近交系小鼠的未經(jīng)產(chǎn)雌鼠的生理指標、繁殖性能以及其后代焦慮行為的影響。

1 心理應(yīng)激對雌性動物周期、排卵的影響

應(yīng)激可以引起人類、靈長類以及大鼠生殖功能發(fā)生改變。心理性應(yīng)激[8]、外部環(huán)境變化等條件[9]以及高強度運動[10]都會導(dǎo)致人的經(jīng)期發(fā)生紊亂。對于大鼠，長期暴露在生理應(yīng)激條件下（強迫游泳、限制進食、溫度應(yīng)激）會導(dǎo)致情期改變。束縛應(yīng)激是公認的心理應(yīng)激模型。CMS（chronic mild stress）引起雌性大鼠情期紊亂，主要表現(xiàn)為周期延長，前期以及情期對大鼠進行束縛應(yīng)激，周期紊亂持續(xù)時間最長，但是在性活動較弱期間或者后期應(yīng)激，大鼠可對應(yīng)激表現(xiàn)出一定的抵抗能力，而且周期紊亂持續(xù)的時間也較短。束縛應(yīng)激可破壞大鼠周期。Donadio研究了在前期當天的不同時間處理對卵母細胞以及的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)早上 10：00 處理（束縛 10min、1h 或者乙醚處理 1min），顯著降低了大鼠排卵數(shù)，但是對脊柱前凸商數(shù)（lordosis quotient：判斷雌性的指標，用于大鼠指標的研究）沒有影響，同時也降低了當天晚些時候（18：00）的 LH、孕酮以及催乳素水平。下午 16：00 處理對排卵數(shù)沒有影響，但是應(yīng)激 1h 顯著降低了脊柱前凸商數(shù)。

2 心理應(yīng)激對雄性動物激素水平以及繁殖性能的影響

許多形式的應(yīng)激，包括心理應(yīng)激，都會影響雄性的繁殖力和生殖。自主神經(jīng)系統(tǒng)以及腎上腺激素參與經(jīng)典的應(yīng)激反應(yīng)，可以影響生殖系統(tǒng)。試驗證明，中度以及劇烈的情緒應(yīng)激會抑制睪酮水平，甚至還可能干擾男性發(fā)生。在動物的社會應(yīng)激中，外科手術(shù)以及制動應(yīng)激會影響體重、睪酮水平以及行為，對形態(tài)也產(chǎn)生可變的影響。給予妊娠大鼠應(yīng)激會影響雄性后代的發(fā)育和。對大鼠給予急性（16h）和慢性（16h*7d）束縛應(yīng)激，檢測血液中 LH、FSH、睪酮、睪酮抑制素水平變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，應(yīng)激后 LH 水平顯著下降，慢性應(yīng)激后血液中睪酮含量下降的更顯著，但是，血液中 FSH 以及睪酮抑制素水平則不受影響。

3 妊娠期間心理應(yīng)激

大多數(shù)關(guān)于應(yīng)激對生殖健康的研究都集中在妊娠期間，研究不同的應(yīng)激方案對妊娠結(jié)局以及后代的影響。婦女在妊娠期間受到應(yīng)激后，短期容易引起流產(chǎn)、產(chǎn)科并發(fā)癥、較低的胎兒初生重、嬰兒死亡率增加、生長發(fā)生異常以及性別比例失調(diào)，慢性則會導(dǎo)致后代情緒與認知能力受到損傷。

對胎兒初生重的影響在女性，流行病學研究證明，妊娠期間應(yīng)激事件很可能引起流產(chǎn)或者難產(chǎn)、較低的胎兒初生重以及增加新生兒病理變化，妊娠期間應(yīng)激可導(dǎo)致胎兒早產(chǎn)和較低的胎兒體重。Lee等分別在妊娠的1～4d、5～8d、9～12d、13～16d對妊娠小鼠進行束縛應(yīng)激，每天12h，妊娠第18h進行剖腹產(chǎn)，對胎兒稱重和檢查形態(tài)缺陷。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，4d束縛應(yīng)激顯著降低了妊娠母鼠的體重，雖然終止應(yīng)激后體重能慢慢恢復(fù)，但是直到妊娠后期體重也沒有完全恢復(fù)；束縛應(yīng)激引起胎兒生長阻滯，體重顯著降低，增加了胚胎和胎兒的死亡率。1～4d、5～8d束縛對胚胎著床沒有影響，但是9～12d束縛則引起cleft palate（ 兔唇），5～8d引起胎兒脊椎異常。大多數(shù)在胎兒器官發(fā)生期間進行束縛應(yīng)激的研究發(fā)現(xiàn)，該階段應(yīng)激對胎兒初生重沒有影響。個別研究證明，束縛導(dǎo)致妊娠13d胎兒生長停滯；在妊娠18～20d束縛會降低子宮內(nèi)以及初生后雄性后代的生長性能，在妊娠前后用塑料管進行13d束縛會降低每窩的平均初生重；在妊娠晚期進行束縛并結(jié)合強光刺激會降低胎兒的初生重，特別是在妊娠晚期進行束縛，如果限制采食將更可能影響胎兒的快速生長。

1978年，Barlow分別在大鼠妊娠9～11d、12～14d、15～17d、18～20d進行束縛，每天束縛9h，連續(xù)束縛3d。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不論束縛發(fā)生在何時，初生后第1周以及第6周雄性后代體重均低于對照組。在隨后的試驗中，在妊娠18～20d進行束縛，不論后代是否由對照母鼠飼養(yǎng)，體重均低于對照。Ward發(fā)現(xiàn)，初生前應(yīng)激的雄性后代雄性特征消失且呈現(xiàn)雌性化。她將妊娠最后1周的大鼠給予光熱束縛應(yīng)激，結(jié)果發(fā)現(xiàn)成年雄性后代行為下降，脊柱前凸能力增加。Beckhardt and Ward在大鼠妊娠14～21d時給予光熱應(yīng)激，結(jié)果發(fā)現(xiàn)雌性后代情期、、妊娠、分娩以及幼仔成活、母性都沒有影響，妊娠晚期進行束縛聯(lián)合強光應(yīng)激，雌性大鼠后代能正常繁殖。但是，也有報道稱妊娠期束縛會影響雌性后代的繁殖力。在試驗中，對妊娠14～22d的大鼠進行每天3次、每次45min的束縛聯(lián)合強光，使得周圍溫度升高至34℃。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，1F代雌鼠繁殖力下降，妊娠周期延長，胎兒初生重下降，初生后存活率下降；睪酮在束縛應(yīng)激中對雌雄生殖力方面也有影響，妊娠后期束縛應(yīng)激會導(dǎo)致大鼠下降時間推遲[32]。妊娠晚期對小鼠束縛應(yīng)激研究較少。對于小鼠，妊娠期束縛聯(lián)合強光應(yīng)激可得到與大鼠一致的結(jié)果，增加雄性后代的脊柱前凸（雌性化），但是對行為沒有影響，對雄性后代繁殖能力影響還未見報道。在大鼠間期直到下個情期前進行仰位制動應(yīng)激，每天 2h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)情期推遲，然而一旦情期到來發(fā)生則繁殖力沒有影響。成年大鼠妊娠前以及妊娠過程中給予慢性束縛應(yīng)激會導(dǎo)致妊娠期延長和較低的胎兒初生重。因此，有必要進行詳細的研究，進而確定妊娠前應(yīng)激對雌性生殖以及后代行為的影響。

實驗動物研究范文第3篇

一、研究專題和期限

專題1、實驗動物比較、相關(guān)標準研究領(lǐng)域

研究目標：對常用嚙齒類實驗動物進行比較研究并建立數(shù)據(jù)庫；制定填補國內(nèi)空白的若干實驗動物地方標準；凡涉及本專題項目需將有關(guān)研究成果納入*實驗動物資源中心統(tǒng)一管理。

研究內(nèi)容：

1、對常用大、小鼠、豚鼠和地鼠進行比較生物學和比較醫(yī)學系統(tǒng)研究，提出各自在生物醫(yī)學等主要研究領(lǐng)域應(yīng)用和回避的依據(jù)、選擇原則、運用方法；

2、對常用實驗動物組織器官超微形態(tài)學結(jié)構(gòu)進行比較研究并建立數(shù)據(jù)庫；

3、建立兔、犬、猴心血管和心電圖數(shù)據(jù)庫并進行分析評價；

4、制定實驗用羊標準、嚙齒類實驗動物墊料標準，大、小鼠運輸標準（鼓勵多家單位聯(lián)合申報）。

進度要求：年9月30日前完成

專題2、實驗動物新技術(shù)的建立及應(yīng)用研究

研究目標：建立若干種實驗動物質(zhì)量檢測、遺傳工程和保種育種新技術(shù)；建立斑馬魚主要臟器三維電子圖像。

研究內(nèi)容：

1、從病原學、血清學以及分子生物學領(lǐng)域研究實驗動物中支原體、泰澤氏菌、螺桿菌、CAR桿菌的特性，確立先進、可靠的檢測方法；

2、以DNA和RNA各一種病毒的主要抗原基因進行真核表達，結(jié)合單克隆抗體技術(shù)建立診斷技術(shù)平臺，提升實驗動物質(zhì)量控制水平；

3、選擇4-6個品系作為供體和受體，構(gòu)建2-5個染色體替換的小鼠新品系，初步建立PCR-LDR小鼠基因分型技術(shù)平臺；

4、建立新的小鼠內(nèi)源基因修飾技術(shù)，實現(xiàn)對小鼠內(nèi)源基因的即時可逆調(diào)節(jié)，提高小鼠遺傳操作的效率，完善小鼠遺傳操作生物技術(shù)平臺的建設(shè)；

5、在組織學研究的基礎(chǔ)上，采用IT技術(shù)初步建立斑馬魚的某種三維電子臟器；

6、建立大鼠體外授精技術(shù)、冷凍技術(shù)、輔助體外受精技術(shù)（人工授精、ICSI）；

7、建立2-4種實驗動物人工哺乳和無菌技術(shù)，并培育2-4種無菌動物。

進度要求：年9月30日前完成

專題3、動物模型及其效果評價體系的建立與應(yīng)用研究

研究目標：建立若干種人類重要疾病的動物模型，并要求對每一種模型建立效果評價體系；凡涉及本專題項目需將有關(guān)研究成果納入*實驗動物資源中心統(tǒng)一管理。

研究內(nèi)容：

1、建立若干種人類重要疾病的動物模型，重點建立不育大鼠模型、大、小鼠腦卒中模型、前列腺疾病模型、小型豬腹壁拉鏈模型、原位大腸癌模型等，并要求對以上模型建立效果評價體系；

2、建立和完善腫瘤高轉(zhuǎn)移動物模型篩選技術(shù)。

進度要求：年9月30日前完成

二、申請方式

1)本指南公開。凡符合課題制要求、有意承擔研究任務(wù)的法人、自然人均可以從“*科技”網(wǎng)站上進入“在線受理科研計劃項目課題可行性方案”，并下載相關(guān)表格《*市科學技術(shù)委員會科研計劃項目課題可行性方案（*版）》，按照要求認真填寫。書面可行性報告要求同時附上相應(yīng)的知識產(chǎn)權(quán)狀況查新報告。鼓勵多家單位聯(lián)合申報，實行資源共享，并在申請材料中明確各自承擔的工作和職責，并附上合作協(xié)議或合同。

2)課題責任人年齡不限。鼓勵通過課題培養(yǎng)優(yōu)秀的中青年學術(shù)骨干。作為課題責任人和主要科研人員，不得同期參與承擔的863、973、國家科技攻關(guān)和*市重大、重點科研課題數(shù)超過三項。

3)每一課題的申請人可以提出不超過2名的擬回避自己課題評審的同行專家名單（名單可以隨課題可行性方案一同提交）。

4)本專項課題的申請起始日年7月4日，截止日期為年7月25日。課題申報時需提交書面可行性方案一式8份，并通過“*科技”網(wǎng)站提交可行性方案和所有表格。書面可行性方案集中受理時間為*年7月21日至7月25日，每個工作日上午9：00—下午4：30。所有書面文件請采用A4紙雙面印刷，普通紙質(zhì)材料作為封面，不采用膠圈、文件夾等帶有突出棱邊的裝訂方式。

5)網(wǎng)上填報備注：

1）登陸“*科技”網(wǎng)，進入網(wǎng)上辦事專欄；

2）點擊《科研計劃項目課題可行性方案》受理并進入申報頁面：

-【初次填寫】轉(zhuǎn)入申報指南頁面，點擊"專題名稱"中相應(yīng)的指南專題后開始申報項目（需要設(shè)置“項目名稱”、“依托單位”、“登錄密碼”）；

-【繼續(xù)填寫】輸入已申報的項目名稱、依托單位、密碼后繼續(xù)該項目的填報。

實驗動物研究范文第4篇

【關(guān)鍵詞】月乃湯；促進泌乳功能；超負荷哺乳模型；泌乳量

【中圖分類號】R285 【文獻標識碼】A 【文章編號】1004-7484（2013）03-0205-02

母乳是新生兒哺乳期最好的食品，母乳喂養(yǎng)是WHO和聯(lián)合國兒童基金會關(guān)于婦幼衛(wèi)生工作的一項重要內(nèi)容，全世界都在大力推廣。目前乳汁分泌不足的現(xiàn)象十分常見，婦嬰專家正在努力用中醫(yī)藥膳食療及理療、中藥治療缺乳癥。造成乳汁分泌不足的原因很多，主要因素有營養(yǎng)缺乏、情緒焦慮或激素水平等。我國傳統(tǒng)中醫(yī)理論認為，乳汁為血所化，氣血不固則乳汁不能生[1]。因此，在遣方用藥時，多用健脾行氣、舒經(jīng)通絡(luò)之品[2]。

月乃湯是廣禾堂草本生物科技（上海）有限公司研發(fā)的一種類似料理湯頭的食品，其中含米之精華液（米酒水提取物）、香櫞、肉桂、干姜、小薊、白芷、甘草等組分，組方符合中醫(yī)藥理論，科學合理。米酒行氣益血，甘甜芳醇，可健脾溫胃；臣以辛溫之香櫞、肉桂，共奏理氣解郁、暖胃通脈之功，協(xié)助米酒發(fā)揮滋補氣血之效；佐以驅(qū)寒暖脾之干姜，祛風除穢之白芷，散瘀消癰之小薊；甘草益氣和中，調(diào)和諸藥，是為佐使之用。

1 為考察月乃湯促進母鼠泌乳、增加仔鼠體重等作用，進行促進泌乳功能的動物功效實驗。

1.1 材料 KM種健康懷孕小鼠（第二胎，孕期17～18 d），購自南方醫(yī)科大學實驗動物中心，動物合格證號SCXK粵2011-0015。月乃湯，批號20120424，廣禾堂草本生物科技（上海）有限公司。

1.2 方法

1.2.1 樣品液配制

考慮到受試動物胃容量有限，將月乃湯低溫濃縮，低劑量組（月乃湯濃縮系數(shù)2510）；中劑量組（5010）；高劑量組（10010），空白組灌胃蒸餾水。各劑量組按10mL/kg BW灌胃給藥。

1.2.2 實驗動物分組

孕鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)，2～3 d內(nèi)開始分娩，按照母鼠窩別和所生仔鼠體重，將母鼠隨機分為4組，3個劑量組及1個空白組，每組8只母鼠，每只母鼠帶養(yǎng)10只仔鼠，造成“超負荷哺乳”模型，每只母鼠及其帶養(yǎng)仔鼠單籠飼養(yǎng)[3]。

1.2.3 指標測定

從母鼠分娩第1日起開始，灌胃給予母鼠相應(yīng)劑量的受試物，連續(xù)21 日，并每日定時觀察小鼠存活狀態(tài)，測定每只母鼠的泌乳量、仔鼠的體重和出生后第7、14、21天的體重增加數(shù)[4]。

（1）泌乳量測定：每日早11時將母鼠與仔鼠分別稱重后，將母、仔鼠隔離5 小時，再合籠哺乳1 小時，稱量哺乳前后仔鼠的體重，以兩者之差代表母鼠的泌乳量。

（2）母鼠的體重變化：每隔5日給母鼠稱重，觀察體重變化，以確定灌胃體積。

（3）仔鼠的體重變化：繪制子鼠體重生長變化曲線。

1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理 采用SPSS12. 0 軟件進行統(tǒng)計分析。若各組方差齊，采用單因素方差分析法（ one way-ANOVA），以α = 0. 05為檢驗水準，采用Dennett 法進行各劑量組與對照組之間的均數(shù)比較；若方差齊性不能滿足，采用Tamhane's T2 法統(tǒng)計或非參數(shù)秩和統(tǒng)計。

2 結(jié)果

2.1 泌乳量測定

實驗動物研究范文第5篇

【摘要】 目的創(chuàng)建大鼠濕困脾胃證動物模型，觀察大鼠濕困脾胃證動物模型胃腸功能的病理變化。方法建立大鼠濕困脾胃證動物模型，通過體重、飲食量、腹圍指數(shù)、胃腸運動吸收功能、胃腸激素水平、病理組織等方面觀察其胃腸功能的改變。結(jié)果模型動物飲食減少，體重下降，胃腸脹氣明顯，胃排空和小腸推動能力下降，胃腸吸收功能降低，胃腸激素水平紊亂，胃腸組織發(fā)生病理改變；經(jīng)平胃散治療后模型病變部分恢復(fù)，效果好于自然恢復(fù)組。結(jié)論大鼠濕困脾胃證動物模型胃腸功能異常，平胃散有改善作用。

【關(guān)鍵詞】 濕困脾胃 模型 胃腸運動 胃腸激素

Abstract：ObjectiveTo investigate the pathological changes in experimental rats of dampness retention in the spleen and stomach .MethodsThe function of stomach intestine was observed by measuring the body weight， appetite， abdomen circumference， movement and absorption of stomach intestine ， gut hormone level ， pathological tissue in experimental rats.ResultsThe appetite of the rats was reduced . And their body weight was descended .The tympanites of stomach intestine was manifest ， gastric emptying and small intestine impulsing capabilities were decreased ， stomach intestine absorptive function was cut down ， gut hormone level was disordered ， pathological changes were generated from stomach intestine tissue. But the pathology was partially recoved with Pingwei Powder ， and the effects were better than the spontaneous recovery group.ConclusionPingwei Powder can ameliorate the disfunction of stomach intestine in model rats of dampness retention in the spleen and stomach.

Key words：Retention of dampness in the spleen and stomach; Models; Gastrointestinal motility; Gut hormon

濕邪致病是傳統(tǒng)中醫(yī)病因病機學的一個重要內(nèi)容，具有多發(fā)性、復(fù)雜性、難治性、隱匿性與變異性等特點，根據(jù)中醫(yī) “諸濕腫滿，皆屬于脾”等理論，無論內(nèi)、外濕邪皆易損傷中焦脾胃，從而在臨床上多易導(dǎo)致中焦?jié)褡枳C的出現(xiàn)。胃和腸道是濕困脾胃證的主要病變中心。本實驗在對濕困脾胃證動物模型的研究中，探討其胃腸功能的病理變化。

1 材料

1.1 動物 SD大鼠40只，雌雄各半，體重180～220 g，由成都中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格證號：川實動管質(zhì)第8號，檢疫后備用。

1.2 藥物平胃散，配方：蒼術(shù)12 g，厚樸9 g，陳皮6 g，炙甘草3 g，均購自同仁堂成都分店。藥液由制劑室制備，先按照臨床用藥煎煮方法熬制成常規(guī)藥液，再低溫濃縮成含1 g生藥/ml的高濃度藥液。

1.3 試劑GastrinⅠEnzyme Immuno Assay，ADR DIAGNOSTICS，Batch No.：050504。胃動素（MTL）放射免疫分析試劑盒，解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心東亞免疫所提供，批號：0506。

2 方法

2.1 動物分組及造模實驗動物適應(yīng)飼養(yǎng)1周，自由攝食全價顆粒飼料，動物房溫度維持在18～25℃左右。按體重分層將大鼠隨機分為4組，即空白對照組、濕困脾胃模型組、濕困脾胃治療組、濕困脾胃自然恢復(fù)組，每組10只。

將大鼠放在溫度18～25℃濕度90%±5%的造模箱內(nèi)飼養(yǎng)；造模大鼠單日禁食并給予4℃冰水(2 ml/只)灌胃1次，雙日供應(yīng)充足飼料并給予豬油(4 ml/只)灌胃1次；每日8：00～16：00使大鼠站在4 cm深的水中，控制睡眠時間8 h。連續(xù)造模20 d。治療組造模20 d后，灌胃治療方藥(10 ml/kg)，共5 d。同時空白對照組和自然恢復(fù)組灌胃0.9%生理鹽水(10 ml/kg)。

2.2 指標及檢測方法

2.2.1 模型一般體征的觀察實驗過程中密切觀察大鼠的一般狀態(tài)，如：飲水攝食情況、生長情況、體重、皮毛色澤等，造模及治療結(jié)束后測量不同組大鼠體重、24h攝食量（代謝籠法）和腹圍指數(shù)。結(jié)果采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件處理，組間比較用單因素方差分析法（以下數(shù)據(jù)采用相同統(tǒng)計方法）。

2.2.2 胃腸相關(guān)指標的測定胃排空及小腸推進實驗采用半固體營養(yǎng)糊法，參照文獻法［1］改進。半固體營養(yǎng)糊：取羧甲基纖維素5 g，溶于125 ml蒸餾水中，然后依次加入奶粉8 g，白糖6 g，淀粉6 g，且每加1次攪拌1次，攪拌均勻后，再加入少量伊紅染料，攪拌均勻，最后配成150 ml含150 g營養(yǎng)糊的紅色混合物，放入4℃冰箱儲藏。使用前2 h取出，恢復(fù)至室溫。

胃排空試驗:按公式計算胃殘留百分比：胃殘留率（%）＝（第1次的胃總重-第2次的胃凈重）／2×100%

小腸推進試驗:按公式計算小腸推進營養(yǎng)糊的百分比：小腸推進率（%）＝營養(yǎng)糊在小腸中的推進距離(cm)/小腸全長(cm)×100%

胃腸激素測定：所有組動物動物處置前，采用股動脈放血法采血5 ml，置于試管中，不抗凝，室溫下靜置1 h，離心5 min，轉(zhuǎn)速2 000 r/min，分離取血清，置-20℃冰箱保存，待測胃泌素、胃動素。

2.2.3 胃腸組織形態(tài)學觀察所有組動物處置后取樣，打開腹腔，肉眼觀察胃腸組織形態(tài)，然后分別將胃、十二指腸、空腸、結(jié)腸取出，立即浸泡于10%的福爾馬林液中固定。常規(guī)HE染色，光學顯微鏡下觀測組織形態(tài)。

3 結(jié)果

3.1 模型一般體征的觀察造模后模型組大鼠出現(xiàn)食欲不振，飲食量減少，大便溏，皮毛色澤晦暗發(fā)黃，消瘦，腹脹，體重減輕等癥狀，造模第18天自然恢復(fù)組死亡1只大鼠。給藥后，治療組大鼠癥狀基本好轉(zhuǎn)，自然恢復(fù)組大鼠體征改善不明顯。實驗后體重、24 h攝食量及腹圍指數(shù)見表1。表1 體重、攝食量、腹圍指數(shù)變化與空白對照組比較，**P

轉(zhuǎn)貼于

由表1可見動物模型建成后體重大幅下降，有一定的自然恢復(fù)，但經(jīng)平胃散治療后體重恢復(fù)更為顯著。造模后動物24 h攝食量明顯降低，治療后逐步恢復(fù)。造模后動物腹圍指數(shù)明顯升高，治療后有降低趨勢。

3.2 胃排空及小腸推進率的測定結(jié)果見表2。表2 胃腸運動功能變化由表2可見模型建成后，模型組動物胃殘留率升高，胃排空能力降低，自然恢復(fù)過程中繼續(xù)降低，治療后組略好于自然恢復(fù)組；模型組小腸推進功能下降，經(jīng)平胃散治療后明顯改善。

3.3 血清胃泌素及胃動素含量的測定結(jié)果見表3。表3 胃泌素及胃動素含量變化與空白對照組比較，*P

由表3可見動物模型建成后血清胃泌素含量降低，經(jīng)平胃散治療后有一定程度恢復(fù)。造模后動物胃動素含量升高，自然恢復(fù)過程中繼續(xù)升高，治療組略好于自然恢復(fù)組。

3.4 胃腸組織病理觀察造模過程中有1只大鼠死亡，解剖后發(fā)現(xiàn)，胃腸脹氣明顯，胃腸壁明顯變薄，胃壁血管暴露，胃黏膜上有少量散在出血點。將模型組大鼠解剖時發(fā)現(xiàn)，多數(shù)動物胃腸脹氣明顯，胃內(nèi)殘留營養(yǎng)糊較多，營養(yǎng)糊在小腸內(nèi)推進距離較短。HE染色后，普通光學顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，模型組動物胃腸組織粘膜缺損，黏膜層有少量充血水腫，散在分布少量炎癥細胞，粘膜下層有大量炎癥細胞。治療組動物病變基本恢復(fù)，自然恢復(fù)組無明顯改變。

4 討論

本實驗根據(jù)目前濕阻模型研究現(xiàn)狀并結(jié)合中醫(yī)“濕阻中焦證”的發(fā)病機制，采用“外濕過盛、飲食不節(jié)、情志不遂”三大因素相結(jié)合的綜合法進行造模［2，3］。在“外濕過盛”方面，我們將造模箱內(nèi)濕度控制在90％左右，并且使模型大鼠每天在淺水中刺激8 h。在“飲食不節(jié)”方面，我們在動物飽食的情況下灌胃大劑量豬油，在動物饑餓的情況下灌胃大劑量冰水，將“肥甘厚味、過食生冷、饑飽失常”結(jié)合起來。另外我們在以前研究中發(fā)現(xiàn)大鼠站在淺水中不能進行有效的睡眠，結(jié)合本實驗對外濕環(huán)境的要求，在正常睡眠期間我們將模型大鼠置于淺水中，控制其睡眠時間打亂其生物鐘，從而造成其“情志不遂”。我們將造模時間定為20 d，比以前學者采取綜合法的造模時間延長了15 d左右［4］。

胃腸運動在食物消化吸收中起著重要作用，既能運送食物、研磨食物，使食物與消化液充分混合，轉(zhuǎn)變成易溶解和可被吸收的形式，又能使食物與消化管壁緊密接觸，以便吸收。胃腸運動過快過慢均不利于食物的消化吸收。胃腸運動過快，食物在腸道停留時間過短，不利于消化吸收；胃腸運動過慢，缺乏動力，不僅不利于食物的運送、研磨，而且不利于食物與消化液的混合、腸壁的接觸，從而影響消化吸收。實驗結(jié)果表明模型動物胃排空和小腸推進功能下降。胃腸運動吸收功能的異?？赡苁菍?dǎo)致模型動物出現(xiàn)攝食減少、體重下降、腹圍指數(shù)增加等癥狀的直接原因。

本實驗研究表明濕困脾胃模型動物胃動素含量增加，明顯高于空白對照組；模型動物胃泌素水平下降，與空白對照組動物比較有顯著意義，以前的大多數(shù)學者也曾有過近似的報道。胃動素和胃泌素是調(diào)節(jié)胃腸運動的重要激素［5］，所以這兩種激素水平的改變以及胃腸實質(zhì)的病理變化可能是濕困脾胃動物胃腸運動吸收功能異常的重要原因之一。

本實驗研究結(jié)果顯示，模型組動物出現(xiàn)攝食減少、體重下降、腹圍指數(shù)增加等癥狀基本接近濕困脾胃證中濕邪困阻中焦的癥狀表現(xiàn)。模型動物胃腸運動吸收功能、激素水平的改變以及胃腸組織的病理變化，在一定程度上揭示了本模型以中焦脾胃為病變中心的實質(zhì)。經(jīng)平胃散治療后［6］，效果明顯好于自然恢復(fù)組動物，大多數(shù)指標明顯改善接近正常。經(jīng)平胃散治療后，胃動素和胃泌素兩項指標雖然效果好于自然恢復(fù)組，但改善并不十分明顯，說明動物體內(nèi)激素水平可能需要延長治療時間才能很好地恢復(fù)，在一定程度上體現(xiàn)了濕性黏膩濕邪難以速去的特點。

參考文獻

［1］ 王 楓，羅文紀，連建偉.小半夏湯對小鼠胃排空、小腸推進的影響［J］.浙江中醫(yī)學院學報， 2001 ，25(2):48.

［2］ 劉 偉，黃秀深，羅玉熙，等.濕阻證動物模型的研究進展［J］.四川中醫(yī)，2006，24（4）：35.

［3］ 孔祥華，黃 萍，吳清和.濕阻中焦證研究進展［J］.甘肅中醫(yī)，2004，17（9）：5.

［4］ 郝 悅，夏光明，周潤鎖. 睡眠剝奪對大鼠胃動力及胃粘膜損傷的影響［J］.解放軍醫(yī)學雜志，2004，15(2):96.