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體液免疫范文第1篇

【關(guān)鍵詞】 手足口?。?免疫球蛋白類； 補(bǔ)體； 體液免疫

手足口?。℉and-Foot-Mouth diease, HFMD），是由腸道病毒引起的常見傳染病，四季均可發(fā)生，夏秋季節(jié)多見，多發(fā)于5歲以下兒童，尤以3歲以下兒童發(fā)病率最高，臨床表現(xiàn)輕重不一，主要表現(xiàn)為發(fā)熱和手、足、口腔部位的皰疹，少數(shù)重病患兒可出現(xiàn)心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜腦炎等并發(fā)癥［1］。為了解手足口病患兒體液免疫狀況，對123例手足口病患兒血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）及補(bǔ)體C3、C4進(jìn)行檢測。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2008年5月～2011年7月收集在筆者所在醫(yī)院傳染科住院的123例患兒，所有病例均符合衛(wèi)生部的《手足口病預(yù)防控制之南（2008年版）》臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男69例，年齡在5個(gè)月～6歲，女54例，年齡在6個(gè)月～9歲，平均年齡2.2歲；對照組為同期本院兒科門診健康兒童45例，其中男26例，女19例，年齡6個(gè)月～6歲，平均2.4歲。

1.2 方法 檢測標(biāo)本為入院第1天靜脈血標(biāo)本，HFMD患兒和對照組兒童常規(guī)靜脈采血2 ml于促凝血管中，離心分離血清，避免溶血，采用散射速率比濁法，儀器為美國Beckman Coulter公司的IMMAGE特定蛋白分析儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 檢測結(jié)果用SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，以P

2 結(jié)果

兩組兒童血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）及補(bǔ)體C3、C4水平測定結(jié)果顯示，HFMD患兒免疫球蛋白中IgG、IgA水平與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），見表1。

3 討論

HFMD是由腸道病毒引起的嬰幼兒常見傳染病之一，引發(fā)HFMD的腸道病毒有70多種（型），柯薩奇病毒A組的16、4、5、7、10型，B組的2、5型，以及腸道病毒71型均為手足口病較常見的病原體，其中以柯薩奇病毒A16型（CoxA16）和腸道病毒71型（EV71）最為常見，兩種病毒感染常交替出現(xiàn)，成為手足口病的重要病原體。人群對腸道病毒普遍易感，各年齡組均可發(fā)病，但以3歲以下兒童發(fā)病率最高。占發(fā)病總數(shù)的85%～95%，筆者所在醫(yī)院123例HFMD患兒中3歲以下占89%，與以上數(shù)據(jù)相符。大部分患兒癥狀平和，1周內(nèi)可以痊愈，少數(shù)患兒患有腦炎、肺水腫等并發(fā)癥［1］。

人類IgG是唯一能通過胎盤的免疫球蛋白，對新生兒抗感染具有重大意義，IgG是血清和細(xì)胞外液中含量最高的抗體，約占血清總抗體的75%～80%，是再次免疫應(yīng)答的主要抗體，在體內(nèi)分布廣泛，具有重要的免疫效應(yīng)。IgG（IgG1、IgG2、IgG3）的CH2能通過經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體，并可與巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞表面Fc受體結(jié)合，發(fā)揮調(diào)理作用、ADCC作用等。手足口病是由腸道病毒引起的疾病，抗病毒抗體均屬于IgG，IgG水平低下降低了機(jī)體抗病毒的免疫能力。本研究結(jié)果顯示，手足口病患兒血清免疫球蛋白中IgG明顯偏低，說明手足口病患兒對病毒的抵抗能力較低。分泌型IgA主要存在于胃腸道和支氣管分泌液中，參與黏膜局部免疫，通過與相應(yīng)的病原微生物（細(xì)菌，病毒等）結(jié)合，阻止病原體粘附到細(xì)胞表面，從而在局部感染中發(fā)揮重要作用，分泌型IgA在黏膜表面也有中和毒素的作用。本研究結(jié)果顯示，手足口病患兒IgA水平下降，降低了胃腸道和呼吸道防御能力，使病毒更容易侵入機(jī)體而致病。IgM是初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體，在血中含量在很短時(shí)間內(nèi)消失，可用于感染的早期診斷。補(bǔ)體是血清蛋白的正常組成部分，也是抗體發(fā)揮免疫效應(yīng)的主要機(jī)制之一，并對免疫系統(tǒng)的功能具有調(diào)節(jié)作用。在本研究中手足口病患兒血清IgG、IgA明顯降低，IgM無明顯改變，與王躍飛等［2］研究一致，認(rèn)為血清IgM未見明顯升高可能與患兒的B淋巴細(xì)胞功能不完善有關(guān)。補(bǔ)體C3、C4水平未見明顯改變，與劉亞敏等［3］報(bào)道一致，可能是由于患兒IgG水平低下，無法通過經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體，導(dǎo)致補(bǔ)體C3、C4水平無明顯改變，其機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

通過對123例HFMD患兒血清免疫球蛋白和補(bǔ)體C3、C4水平檢測結(jié)果分析，顯示IgG、IgA明顯偏低，IgM、補(bǔ)體C3、C4水平未見明顯改變，說明手足口病患兒由于病毒感染引起機(jī)體免疫功能異常，存在體液免疫的改變。提示在手足口病的診治中應(yīng)該注意免疫功能的改變，在治療中，除采取對癥處理和抗病毒治療外，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)機(jī)，應(yīng)使用丙種球蛋白和免疫調(diào)節(jié)藥物治療，以促進(jìn)病情恢復(fù)和預(yù)防并發(fā)癥的發(fā)生。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 中華人民共和國衛(wèi)生部.手足口病預(yù)防控制指南（2008年版）.中國實(shí)用鄉(xiāng)村醫(yī)生雜志,2008,15(6):46-48.

［2］ 王躍飛,鄭瑞,陳葆國,等.手足口病相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)檢測的病例對照研究.浙江預(yù)防醫(yī)學(xué),2010,22(10):15-21.

體液免疫范文第2篇

【摘要】 目的 研究鵝絨藤總生物堿(Cynanchum Chinense Total Alkaloid，CCTA)對正常小鼠體液免疫的影響。方法 給正常小鼠腹腔注射高(12.96mg/kg)、中(6.48mg/kg)、低(3.24mg/kg)3個(gè)劑量的CCTA，每天1次，連續(xù)7 d，于末次給藥后12h，眼球取血并取脾臟，定量溶血分光光度試驗(yàn)進(jìn)行小鼠脾臟抗體形成細(xì)胞檢測，對小鼠血清溶血素進(jìn)行測定。結(jié)果 CCTA高、中劑量組抗體形成細(xì)胞OD值及血清溶血素HC50明顯高于免疫小鼠對照組(P＜0.05，P＜0.01)；與CCTA低劑量組比較，CCTA高、中劑量組抗體形成細(xì)胞OD值升高(P＜0.05)，血清溶血素HC50升高(P＜0.01)。結(jié)論 CCTA有提高正常小鼠體液免疫的作用。

【關(guān)鍵詞】 鵝絨藤；生物堿；抗體形成細(xì)胞；小鼠

鵝絨藤(Cynanchum Chinense)為蘿摩科鵝絨藤屬(Cynanchum Chinense R.Br.)植物。野生于寧夏川區(qū)各地，資源極為豐富，夏、秋間隨用隨采。鵝絨藤味苦、性寒，具祛風(fēng)解毒、健胃止痛之功效，全株具白色乳汁，民間常用鵝絨藤乳汁治療尋常性疣贅，也有用于治療耳乳突狀瘤和甲癬的報(bào)道［1-2］。國內(nèi)外現(xiàn)有研究表明，鵝絨藤水浸膏有明顯的降壓作用，其莖干乳汁凍干粉對蛙心和豚鼠離體心房表現(xiàn)明顯的正性肌力(強(qiáng)心)作用，鵝絨藤全草水提物和氯仿提取物對實(shí)驗(yàn)小鼠有鎮(zhèn)靜催眠作用及中樞藥理作用，而其正丁醇提取物可增強(qiáng)正常小鼠細(xì)胞免疫功能［3-6］。我們從鵝絨藤全草中提取了鵝絨藤總生物堿(Cynanchum Chinense Total Alkaloid，CCTA)，研究CCTA對正常小鼠體液免疫功能的影響，旨在對鵝絨藤的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ICR小鼠，體重(20±2)g，雌雄各半，由寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證編號為2007019，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號為SCXK(寧)2005-001。

1.2 儀器和藥物 低溫冷凍離心機(jī)(Beckman，美國)、VIS-7220N可見分光光度計(jì)(北京瑞利分析儀器公司)、恒溫水浴箱、100目不銹鋼網(wǎng)、手術(shù)器械。RPMI-1640 培養(yǎng)基為美國Sigma 公司產(chǎn)品，CCTA由本?；瘜W(xué)教研室指導(dǎo)提取并鑒定，鵝絨藤生藥提取CCTA的得率為0.097‰。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與給藥 ICR小鼠(4～6周齡，體重20±2g，雌雄各半)50只，隨機(jī)分為正常小鼠對照組，免疫小鼠對照組，CCTA高劑量(12.96mg/kg)組、中劑量(6.48mg/kg)組、低劑量(3.24mg/kg)組5組，每組10只。正常小鼠對照組和免疫小鼠對照組每天1次腹腔注射(ip)生理鹽水0.2mL，CCTA高、中、低劑量組小鼠分別ip CCTA 12.96、6.48、3.24mg/kg，每日1次，連續(xù)7日。于給藥的第3天除正常小鼠對照組以外的其余4組小鼠均一次性腹腔注射5%的綿羊紅細(xì)胞(SRBC)0.2mL。第8天處死各組小鼠，體外測定各項(xiàng)指標(biāo)。

1.3.2 小鼠血清和脾細(xì)胞懸液的制備 眼球取血，室溫靜置30min，2000 r/min離心10 min，吸取血清分裝，-20℃保存。取血后頸椎脫臼法致死小鼠，剪開腹部各層，取出脾臟，剔除脂肪和結(jié)締組織，放在尼綸網(wǎng)上，將尼綸網(wǎng)置于盛有Hank's液的平皿中，輕輕壓擠脾組織，使單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)網(wǎng)進(jìn)入平皿的Hank's液中，吸取平皿中的Hank's液于15mL離心管中，離心2000 r/min，5 min，棄上清。加入1mL三蒸水50s左右裂解紅細(xì)胞，再用等量1.8% NS調(diào)至等滲，離心2000 r/min，5 min，棄上清。隨后加Hank's液，離心2000 r/min，5 min，反復(fù)2次，去除血小板。最后將沉淀細(xì)胞用1 mL完全RPMI-1640培養(yǎng)液重懸，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，并且用2%臺盼藍(lán)檢測活性細(xì)胞百分比(活細(xì)胞數(shù)大于95%)，調(diào)整脾細(xì)胞懸液濃度為5×106個(gè)/mL。

1.4 檢測指標(biāo)及方法

1.4.1 定量溶血分光光度法(QHS)［7］測定抗體形成細(xì)胞 在5mL的一次性離心管中加入1mL(5×106個(gè)/mL)的脾細(xì)胞懸液，0.2%SRBC懸液1mL，及1∶10的補(bǔ)體稀釋液1mL，搖勻后置37℃水浴60min(孵育期間輕搖2次，避免細(xì)胞下沉)。取出后3000 r/min離心3min，取上清，分光光度計(jì)上波長413nm讀吸光度(OD)值。

1.4.2 血清溶血素測定［8-9］ 小鼠血清做1∶50稀釋。在5mL的一次性離心管中依次加入經(jīng)1∶50稀釋的小鼠血清1mL、5%SRBC 0.5mL、10%補(bǔ)體1mL，置37℃恒溫水浴中孵育30min，然后移至冰浴中終止反應(yīng)，1500rpm離心5min，取上清1mL，加都氏試劑3mL，搖勻放置10min，分光光度計(jì)于540nm波長比色讀取OD值。另取5%SRBC 0.25mL，加入都氏試劑4mL，比色讀取OD值，即為實(shí)驗(yàn)中所用SRBC半數(shù)溶血時(shí)的OD值。

血清溶血素含量以半數(shù)溶血值CH50表示，樣品管中半數(shù)溶血值CH50按下式計(jì)算：

每只小鼠的血清CH50＝(樣品的OD值/SRBC半數(shù)溶血時(shí)的OD值)×稀釋倍數(shù)

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 運(yùn)用SPSS 11.5軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，各組間采用方差分析進(jìn)行兩兩比較。

2 結(jié)果

與免疫小鼠對照組比較，CCTA高、中劑量組抗體形成細(xì)胞OD值增高(P＜0.05，P＜0.01)，血清溶血素HC50也升高(P＜0.01)；與CCTA低劑量組比較，CCTA高、中劑量組抗體形成細(xì)胞OD值升高(P＜0.05)，血清溶血素HC50升高(P＜0.01)，見表1。表1 CCTA對小鼠抗體形成細(xì)胞和血清溶血素產(chǎn)生的影響 與正常對照組比較**P＜0.01；與免疫對照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；與低劑量組比較，P＜0.05，P＜0.01

3 討論

鵝絨藤主含甾體皂甙和生物堿，可能是其具有祛風(fēng)解毒、健骨止痛功效以及外用治療尋常性疣贅的主要成分。生物堿(alkaloid)是存在于植物中的堿性含氮化合物，往往是許多藥用植物的有效成份，多具有明顯的生物學(xué)活性，如免疫調(diào)節(jié)作用、抗腫瘤作用及抗菌抗病毒作用等［10］。

本研究發(fā)現(xiàn)CCTA高劑量組(12.96mg/kg)和中劑量組(6.48mg/kg)小鼠的抗體形成細(xì)胞OD值明顯高于對照組(P＜0.01或P＜0.05)，同時(shí)高、中劑量組小鼠的血清溶血素半數(shù)溶血值CH50也明顯高于對照組(P＜0.01)，提示高、中劑量的CCTA可促進(jìn)正常小鼠脾臟抗體形成細(xì)胞的形成和血清溶血素的合成、分泌，且其促進(jìn)脾臟抗體形成細(xì)胞形成與提高血清溶血素合成分泌的效果是一致的?？贵w形成細(xì)胞和血清溶血素是代表機(jī)體體液免疫功能的可靠指標(biāo)，因此，本研究提示，高、中劑量的CCTA可提高正常小鼠體液免疫水平。

現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)許多中藥或其活性成分對機(jī)體免疫功能呈雙向調(diào)節(jié)作用，表現(xiàn)為小劑量(或低濃度)促進(jìn)機(jī)體免疫功能，大劑量(或高濃度)抑制機(jī)體免疫功能。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，CCTA高、中劑量組之間的上述免疫學(xué)指標(biāo)未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，提示隨著CCTA劑量的增加，其正向調(diào)節(jié)小鼠體液免疫功能的生物學(xué)活性不再增強(qiáng)，但是否會出現(xiàn)抑制作用，還要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)以證實(shí)。曾有研究表明［6］，鵝絨藤全植株正丁醇提取物可增強(qiáng)正常小鼠細(xì)胞免疫功能，但其增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞免疫的活性成份與本實(shí)驗(yàn)中的增強(qiáng)體液免疫的活性成份是否相同，調(diào)節(jié)機(jī)制如何，還須進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

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［2］ 王淑珍.鵝絨藤治療甲癬的療效觀察［J］.天津藥學(xué)，1996，8(3)：49.

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體液免疫范文第3篇

關(guān)鍵詞：體液免疫;抗原;吞噬細(xì)胞;B細(xì)胞;T細(xì)胞

在人教版普通高中生物教材必修3《穩(wěn)態(tài)與環(huán)境》的教學(xué)過程中，學(xué)生往往對體液免疫示意圖產(chǎn)生這樣的疑問：是否某一種類的抗原可以通過吞噬細(xì)胞和T細(xì)胞的呈遞來活化B細(xì)胞，同時(shí)也可以運(yùn)用直接刺激B細(xì)胞的方式來進(jìn)行活化？針對這樣的疑問，通過抗原的分類來進(jìn)行簡要分析。

1問題的產(chǎn)生

關(guān)于同一種的抗原是否既可以通過吞噬細(xì)胞和T細(xì)胞的呈遞來活化B細(xì)胞，同時(shí)也可以運(yùn)用直接刺激B細(xì)胞的方式來進(jìn)行活化，這一疑問的產(chǎn)生主要是由于人教版普通高中生物必修3《穩(wěn)態(tài)與環(huán)境》教材中37頁圖2-15“體液免疫示意圖”引出的。如圖：

圖一 體液免疫示意圖

2問題的解析

由于示意圖帶來的困惑與知識混亂，如何讓學(xué)生能夠清晰區(qū)分體液免疫中B細(xì)胞被活化的具體過程，關(guān)鍵要讓學(xué)生對于抗原及其分類有個(gè)直觀的認(rèn)識。

2.1抗原的特性

人教版高中教材上對于抗原的定義為：能夠引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)的物質(zhì)。并舉例病毒、細(xì)菌燈病原體表面的蛋白質(zhì)等物質(zhì)，都可以作為引起免疫反應(yīng)的抗原。同時(shí)根據(jù)現(xiàn)代抗原的概念，抗原必須具備二種特性，即免疫原性和抗原性。

抗原的免疫原性（immunogenicity）是指抗原分子能誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的特性。它涉及到了抗原分子與免疫細(xì)胞間的相互作用，也就是說它必須經(jīng)過抗原呈遞細(xì)胞的加工、處理和呈遞作用，以及可以被T細(xì)胞和B細(xì)胞的抗原識別受體所識別。因此抗原的免疫原性與抗原分子的化學(xué)性質(zhì)相關(guān)，更與機(jī)體的免疫應(yīng)答特性相關(guān)。

另一方面，抗原的抗原性（antigenicity）是指抗原分子能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物，即抗體或效應(yīng)T細(xì)胞發(fā)生特異反應(yīng)的特性，故亦稱之為抗原的反應(yīng)（reactivity）。它只涉及抗原分子與抗體分子或T細(xì)胞的抗原受體分子（TCR）間的相互作用，即分子與分子間的相互作用。只是抗原分子表面的有限部位能與抗體分子結(jié)合，稱此部位為抗原決定簇（antigendeterminant）或表位（epitope）。因此抗原的抗原性主要決定于抗原分子的化學(xué)性質(zhì)。如抗原為蛋白質(zhì)分子，其抗原性可決定于其氨基酸序列或其空間構(gòu)型。

2.2抗原的分類

由于抗原具有以上的特性，通?？梢詫⒖乖譃樘烊豢乖⑷斯た乖?、胸腺依賴抗原與胸腺非依賴抗原和超抗原四種類型。其中胸腺依賴抗原與胸腺非依賴抗原就是解決我們上述教學(xué)過程中遇到問題的關(guān)鍵。

實(shí)驗(yàn)證明，由抗原激發(fā)的免疫應(yīng)答是多細(xì)胞相互作用的結(jié)果，也就是由抗原呈遞細(xì)胞、T細(xì)胞和B細(xì)胞共同參與予完成的。

大多數(shù)抗原激發(fā)的體液免疫應(yīng)答，必須有輔T細(xì)胞（helperTcell），簡稱TH細(xì)胞的參予才能完成，稱這種抗原為胸腺依賴抗原（thymus-dependentantigen，TDAg），該抗原由T表位和B表位組成，可以刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫。

但是也有少數(shù)抗原物質(zhì)，不需要TH細(xì)胞的參與，就可以單獨(dú)刺激B細(xì)胞來產(chǎn)生抗體，稱這種抗原為胸腺非依賴抗原（thymusindependentantigen，TIAg），該抗原由B細(xì)胞絲裂原及多個(gè)重復(fù)的B表位組成，可使不成熟及成熟的B細(xì)胞應(yīng)答，只產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答不產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答。

這二種抗原的區(qū)別主要在于其抗原決定簇的結(jié)構(gòu)不同所致。TD抗原在其分子結(jié)構(gòu)上，既具有載體功能的決定簇，也具有抗原性決定簇。且在其分子表面出現(xiàn)多種不同抗原決定簇，但缺乏重復(fù)出現(xiàn)的同一決定簇，TD抗原主要是大分子蛋白質(zhì)。而TI抗原多數(shù)為大分子多聚體，帶有重復(fù)出現(xiàn)的同一抗原決定簇，且降解緩慢，故不需要TH參加即能直接刺激B細(xì)胞，TI抗原主要是多糖類物質(zhì)。

3問題的結(jié)論

由以上關(guān)于抗原的特性及分類特點(diǎn)可知，于人教版普通高中生物必修3《穩(wěn)態(tài)與環(huán)境》教材中37頁圖2-15“體液免疫示意圖”所示的體液免疫中同一種的抗原是否既可以通過吞噬細(xì)胞和T細(xì)胞的呈遞來活化B細(xì)胞，同時(shí)也可以運(yùn)用直接刺激B細(xì)胞的方式來進(jìn)行活化這一問題的答案是否定的，少數(shù)抗原可被B淋巴細(xì)胞直接識別，其他的抗原需要抗原提呈細(xì)胞處理后才可以。

4教學(xué)建議

在高中生物的課堂上，可以簡單跟學(xué)生介紹一下抗原的分類，分為胸腺依賴抗原與胸腺非依賴抗原。而兩種抗原的特點(diǎn)就是前者對于B細(xì)胞的刺激需要T細(xì)胞的參與而后者不需要。那么根據(jù)這樣的特點(diǎn)就很容易理解每一個(gè)抗原要么需要T細(xì)胞要么不需要T細(xì)胞的傳遞過程，因此不可能同一種抗原有兩條不同的刺激B細(xì)胞的路徑。

參考文獻(xiàn)：

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體液免疫范文第4篇

[關(guān)鍵詞] 腹腔鏡；膽管手術(shù)；應(yīng)激；免疫

[中圖分類號] R619 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2013）01（a）-0044-03

[Key words] Laparoscopy； Biliary tract surgery； Stress； Immune腹腔鏡自20世紀(jì)應(yīng)用于膽管疾病治療以來，稱為微創(chuàng)外科的腹腔鏡手術(shù)進(jìn)入飛速發(fā)展時(shí)期，手術(shù)適應(yīng)證由最初的診斷探查，膽囊切除等發(fā)展為現(xiàn)在包括多種腹部器官與組織的手術(shù)[1]。而隨著腹腔鏡技術(shù)的不斷發(fā)展，人們開始關(guān)注它對機(jī)體的影響，尤其對于膽管手術(shù)，腹腔鏡下操作難度相對較大，操作時(shí)間長，這就需要我們客觀評價(jià)腹腔鏡在膽管手術(shù)在臨床上的應(yīng)用價(jià)值[2]。其中膽管腹腔鏡手術(shù)創(chuàng)傷會造成機(jī)體免疫功能的改變，比如術(shù)后免疫功能的抑制，而這一抑制情況與膽管手術(shù)應(yīng)激的嚴(yán)重程度密切相關(guān)[3]。本文為此具體探討了腹腔鏡下膽管手術(shù)對機(jī)體的應(yīng)激及體液免疫功能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選擇2009年5月～2011年12月經(jīng)電子胃腸鏡檢查并行活檢病理學(xué)檢查明確診斷為急性結(jié)石性膽囊炎，在我科行腹腔鏡下膽管手術(shù)的患者80例，臨床表現(xiàn)為右上腹疼痛和右上腹壓痛。所有患者都知情同意且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會通過。根據(jù)治療方法的不同，把上述患者平分為治療組與對照組，各40例。治療組中男28例，女12例；年齡33～77歲，平均（54.42±2.22）歲；體質(zhì)量指數(shù)（BMI）16.85～26.50 kg/m2，平均（21.03±0.26） kg/m2。對照組中男25例，女15例；年齡32～79歲，平均（54.44±6.24）歲；BMI為16.91～26.45 kg/m2，平均（21.11±1.25） kg/m2。兩組一般人口學(xué)資料與流行病學(xué)資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

治療組患者采用腹腔鏡下手術(shù)治療：采用臥位與氣管靜脈復(fù)合全麻，取臍下緣1 cm為切口，氣腹針穿刺進(jìn)入腹腔，以CO2經(jīng)氣腹機(jī)建立人工氣腹，10 cm Trocar分別置于臍下緣、劍突右下，5 cm Trocar分別置于右側(cè)肋緣下鎖骨中線和腋前線，放入電視攝像系統(tǒng)探查腹腔情況，行膽囊減壓，立即以吸引器將膽汁完全洗出，分離膽囊三角區(qū)。盡量將膽囊管結(jié)石向膽囊方向推動(dòng)，取出結(jié)石，緊靠近端鈦夾再以一枚鈦夾夾閉膽囊管，完全切斷膽囊管。以電凝勾沿粘膜下層分離、切除膽囊，完成手術(shù)后再次腹腔鏡進(jìn)腹探查吻合口情況及全腹情況，若無異常，則手術(shù)結(jié)束。對照組患者采用傳統(tǒng)開腹治療：具體方法見參考文獻(xiàn)[4]。兩組術(shù)后常規(guī)給予靜脈補(bǔ)液和第三代頭孢抗生素抗感染，鼓勵(lì)早期下床活動(dòng)、早期進(jìn)食。

1.3 觀察指標(biāo)

常規(guī)指標(biāo)：觀察兩組的術(shù)后引流量、排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間與住院時(shí)間。應(yīng)激指標(biāo)：觀察兩組C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）、白介素6（IL-6）、腫瘤因子α（TNF-α）在治療前后的變化，采用速率比濁法測定。免疫指標(biāo)：觀察兩組在治療前后外周血淋巴細(xì)胞CD3、CD4的變化，采用流式細(xì)胞術(shù)測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)錄入SPSS 19.0軟件完成分析統(tǒng)計(jì)，常規(guī)指標(biāo)、應(yīng)激指標(biāo)與免疫指標(biāo)等數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，重復(fù)測量的計(jì)量資料采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 常規(guī)指標(biāo)比較

經(jīng)過觀察，治療組的術(shù)后引流量、排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間與住院時(shí)間均明顯少于對照組（均P < 0.05）。見表1。

2.2 應(yīng)激指標(biāo)變化

經(jīng)過觀察，兩組術(shù)后第1天CRP、IL-6和TNF-α值均有明顯提高（均P < 0.05），治療組到術(shù)后第3天逐漸恢復(fù)，而對照組無明顯變化。見表2。

2.3 免疫指標(biāo)變化

經(jīng)過觀察，治療組在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)CD3與CD4值變化差異不明顯，而對照組則有明顯波動(dòng)（P < 0.05）。見表3。

3 討論

自1987年腹腔鏡應(yīng)用于膽囊切除術(shù)以來，由于其切口創(chuàng)傷小、術(shù)后疼痛輕、恢復(fù)快、腹壁美容效果好等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用范圍逐漸擴(kuò)展到外科的各個(gè)領(lǐng)域[5]。本文結(jié)果顯示，治療組的術(shù)后引流量、排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間與住院時(shí)間都明顯少于對照組（P < 0.05）。

眾所周知，對創(chuàng)傷的應(yīng)激反應(yīng)是維持機(jī)體在自然界生存的適應(yīng)性反應(yīng)，膽管手術(shù)所致的應(yīng)激反應(yīng)會不同程度地干擾機(jī)體的功能[6]。腹腔鏡手術(shù)雖然切口微小，其創(chuàng)傷仍會刺激相應(yīng)的應(yīng)激反應(yīng)系統(tǒng)，促進(jìn)相關(guān)激素與炎癥因子，如促腎上腺皮質(zhì)激素、皮質(zhì)醇、CRP、IL-6和TNF-α等的釋放[7]。研究表明，腹腔鏡手術(shù)的手術(shù)應(yīng)激遠(yuǎn)小于開放手術(shù)[8-11]。本文結(jié)果顯示，兩組術(shù)后第1天CRP、IL-6和TNF-α值均有明顯提高（P < 0.05），治療組到術(shù)后第3天逐漸恢復(fù)，而對照組無明顯變化。

術(shù)后機(jī)體免疫功能和代謝的變化是一種迅速涉及全身各系統(tǒng)、組織細(xì)胞及分子水平的保護(hù)性反應(yīng)，如這種反應(yīng)過于激烈或調(diào)節(jié)失衡便會造成自身損害，出現(xiàn)各種術(shù)后并發(fā)癥。CD3細(xì)胞代表所有的外周成熟的T淋巴細(xì)胞，能協(xié)助T淋巴細(xì)胞抗原受體（TCR）識別抗原提呈細(xì)胞（APC）上的主要組織相容復(fù)合物[12]。CD4細(xì)胞是輔和誘導(dǎo)性T細(xì)胞，能輔助功能并且是TCR信號傳導(dǎo)的協(xié)同受體，增強(qiáng)抗腫瘤效應(yīng)[13]。本文結(jié)果顯示，治療組在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)CD3與CD4值變化差異不明顯，而對照組則有明顯波動(dòng)（P < 0.05）。

總之，腹腔鏡膽管手術(shù)比傳統(tǒng)開放手術(shù)除了能夠有利于術(shù)后恢復(fù)，同時(shí)在應(yīng)激保護(hù)與免疫功能保護(hù)上更具優(yōu)勢，值得推廣應(yīng)用。

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體液免疫范文第5篇

【摘要】

目的： 探討竹蓀提取液對As2O3引起小鼠免疫毒性的防護(hù)作用。方法： 建立As2O3急性砷中毒模型小鼠，研究竹蓀提取液對小鼠體重、臟器系數(shù)、總補(bǔ)體溶血活性（CH50）、淋巴細(xì)胞增殖、巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響。結(jié)果： 與正常對照組相比，砷中毒組小鼠體重、臟器指數(shù)無明顯改變；CH50、淋巴細(xì)胞增殖、巨噬細(xì)胞吞噬率及吞噬指數(shù)明顯降低，差異有顯著性（P

【關(guān)鍵詞】 免疫力； 竹蓀； 砷中毒； 體重； 補(bǔ)體溶血活性測定； 淋巴細(xì)胞； 巨噬細(xì)胞； 吞噬作用

［Abstract］ Objective: T o investigate the protective effects possibly exist in extract from Dictyophora( EXD) on immunosystem of mice against the injury caused by As2O3. Methods: Acute immunotoxicity model of mice was made with As2O3. The effect of EXD on body weight， organ indexes， total hemolysin complement levels (CH50)， lymphocyte accruing rates， and macrophocyte phagocytosis of mice were observed. Results： In acute experiment， there was no significant difference of body weight or organ indexes between the normal control and arsenic poisoning groups；while the CH50 level， lymphocyte accruing rate， phagocytosis rate and macrophagocyte index in arsenic poisoning group were significantly lower (P

［Key words］ immunity; Dictyophora; arsenic poisoning; body weight; complement hemolytic activity assay; lymphocytes; macrophages; phagocytosis

地方性砷中毒是一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病，可以引起神經(jīng)、泌尿、消化、心血管、免疫、內(nèi)分泌等多系統(tǒng)、多器官的損傷，甚至可以引起腫瘤的發(fā)生[1，2]。竹蓀是一種食、藥兩用真菌，有學(xué)者觀察到竹蓀托蓋液對輻射損傷大鼠免疫系統(tǒng)有一定的修復(fù)作用[3]，但對砷引起的免疫損傷是否具有保護(hù)作用卻未見報(bào)道。在既往竹蓀提取液抗突變和抗氧化損傷研究的基礎(chǔ)上[4，5]，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究竹蓀提取液對急性砷中毒小鼠免疫系統(tǒng)的損傷是否具有保護(hù)作用，為地方性砷中毒的防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要儀器

酶標(biāo)儀MQX200（美國BiO-TEK公司）、CO2培養(yǎng)箱（日本三洋公司）、TGLL-18臺式高速離心機(jī)（北京長源實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠）、HH-8恒溫水浴箱（上海申化儀表自控公司）。

1.2 主要試劑

As2O3(AR)由公共衛(wèi)生學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室提供，溶血素由浙江省玉環(huán)縣南方試劑廠生產(chǎn)，小牛血清由杭州四季青有限公司生產(chǎn)，細(xì)胞培養(yǎng)液RPMI1640由Hyclome公司生產(chǎn)。

1.3 竹蓀提取液竹蓀干品由貴州省野生資源開發(fā)保護(hù)研究中心生產(chǎn)。準(zhǔn)確稱取竹蓀干品50 g加500 ml雙蒸水浸泡3 h，制成勻漿，煮沸30 min后用200目濾篩過濾，將濾液濃縮至200 ml，所得竹蓀提取液濃度為0.25 g/ml，4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1．4 動(dòng)物及分組健康昆明種小鼠180只，雌雄各半，體重28～32 g，由貴陽醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。平均分為3批，每批60只，每批隨機(jī)分為6組，每組10只；每批分組及劑量均相同。正常對照組，竹蓀高劑量、低劑量組（10 g/kg、5 g/kg），砷中毒模型組(As2O3 5 mg/kg)，竹蓀治療高劑量和低劑量組（竹蓀10 g/kg、5 g/kg）。砷中毒模型組和竹蓀治療組用As2O3按5 mg/kg標(biāo)準(zhǔn)造模，1次/d，連續(xù)7 d；竹蓀治療組在造模的每天下午給竹蓀治療，灌胃量0.02 ml/g。

1.5 實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑的配制

1.5.1 綿羊紅細(xì)胞懸液(SRBC)

健康成年綿羊頸靜脈處局部消毒采血，加入等體積阿氏細(xì)胞保存液(Alsever's)，4 ℃保存。臨用前用巴比妥緩沖液洗滌3次，2 000 r/min離心5 min，棄上清液。

1.5.2 巴比妥緩沖液（BBS）

準(zhǔn)確稱取NaCl 85 g、巴比妥 5.75 g、巴比妥鈉 3.75 g、MgCl21.017 g、無水CaCl2 20.066 g，將巴比妥鈉溶于雙蒸餾水中，依次溶解上述試劑，雙蒸餾水定容至1 000 ml，高壓蒸氣滅菌20 min，4 ℃冰箱中保存。

1.5.3 營養(yǎng)肉湯及6%淀粉肉湯配制

牛肉浸膏0.3 g、蛋白胨1.0 g、NaCl 0.5 g，加入100 ml雙蒸餾水中，微火加熱溶解，高壓蒸汽滅菌20 min，4℃冰箱中保存。在營養(yǎng)肉湯中加入可溶性淀粉6 g。

1.6 觀察指標(biāo)

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)準(zhǔn)確稱量實(shí)驗(yàn)小鼠體重，頸椎脫臼法處死小鼠，取肝臟、腎臟、脾臟并稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。用分光光度比色法檢測CH50活性，四甲基偶氮唑鹽（MTT）比色法檢測T淋巴細(xì)胞的增殖功能，顯微計(jì)數(shù)法檢測并計(jì)算巨噬細(xì)胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)。

1.7 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果用（x±s）表示，采用方差分析及t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 小鼠體重和臟器指數(shù)各組小鼠的體重、肝臟、脾臟和腎臟指數(shù)均無顯著性差異。見表1。表1 各組上鼠小鼠體重及臟器指數(shù)比較（略）注：臟器指數(shù)=[臟器重量(g)/小鼠體重(g)]×100%。

2.2 CH50淋巴細(xì)胞增殖、吞噬率及吞噬指數(shù)

由表2可見，與正常對照組相比，砷中毒組CH50顯著降低，差異具有顯著性（t =3.345，P=0.032

3 討論

砷對機(jī)體的先天免疫、體液免疫、細(xì)胞免疫以及非特異性免疫產(chǎn)生一定程度的毒性作用，也可以影響機(jī)體免疫器官的發(fā)育。本次實(shí)驗(yàn)采用As2O3對小鼠經(jīng)口灌胃染毒7 d并檢測免疫系統(tǒng)的相關(guān)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與正常對照組比較，砷中毒組小鼠體液免疫、細(xì)胞免疫和非特異性免疫功能均降低，差異具有顯著性，說明砷中毒小鼠免疫損傷模型建立成功。

肝臟和腎臟不僅在物質(zhì)代謝過程中具有重要作用，而且有分泌、排泄和生物轉(zhuǎn)化的功能；脾臟既是T、B淋巴細(xì)胞發(fā)育的場所，含有大量的漿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等，還具有產(chǎn)生吞噬細(xì)胞增強(qiáng)激素，起到增強(qiáng)巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的吞噬功能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各組在肝臟、腎臟、脾臟系數(shù)指標(biāo)上均無顯著性差異?？紤]其原因，可能是本次實(shí)驗(yàn)染毒時(shí)間短，進(jìn)入體內(nèi)的大部分砷隨尿液和糞便排出體外，尚不能對機(jī)體和免疫器官發(fā)育產(chǎn)生明顯的影響，這與文獻(xiàn)報(bào)道相一致[6]。

CH50是具有酶樣活性的球蛋白，廣泛參與機(jī)體的抗感染防御反應(yīng)，具有介導(dǎo)細(xì)胞溶解、調(diào)理吞噬、免疫黏附以及參與炎癥反應(yīng)等引起機(jī)體免疫損傷的作用。T淋巴細(xì)胞是細(xì)胞免疫的執(zhí)行者，其數(shù)量及活性的變化可以反映機(jī)體免疫功能變化。吞噬細(xì)胞具有多種生物學(xué)功能，能夠產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，參與機(jī)體的免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)，其吞噬能力是衡量機(jī)體非特異性免疫功能的指標(biāo)之一。通過測定巨噬細(xì)胞對綿羊紅細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)可以反映其吞噬功能的強(qiáng)弱。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與正常對照組比較，竹蓀組CH50、淋巴細(xì)胞增殖率、吞噬百分率、吞噬指數(shù)無顯著性差異，表明竹蓀提取液對小鼠免疫指標(biāo)在短期內(nèi)無明顯影響；而砷中毒組小鼠CH50、淋巴細(xì)胞增殖率、吞噬、吞噬指數(shù)均降低，有顯著性差異(P

目前對砷中毒的治療還缺乏有效的手段，排砷藥物、中藥制劑、拮抗劑等是常用的治療藥物。竹蓀含有豐富的多糖、糖蛋白、微量元素、維生素和人體必需氨基酸，具有增強(qiáng)人體免疫力、抗氧化損傷和抗腫瘤的活性[12]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，竹蓀治療5 g組淋巴細(xì)胞增殖功能、CH50和巨噬細(xì)胞吞噬功能無明顯變化，竹蓀治療10 g組的淋巴細(xì)胞增殖功能、CH50以及巨噬細(xì)胞吞噬功能均顯著升高，說明在一定劑量條件下，竹蓀通過促進(jìn)砷中毒小鼠淋巴細(xì)胞增殖、增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞功能、提高補(bǔ)體活性來增強(qiáng)體液免疫功能；還通過增加巨噬細(xì)胞數(shù)量或活力而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬功能，對砷中毒小鼠的免疫損傷具有一定的防護(hù)作用，降低砷誘發(fā)的免疫毒性作用。

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