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主題詞: 卵黃囊抗體
中圖分類號:R657.7+3
卵黃囊抗體即卵黃免疫球蛋白(Egg Yolk Immunoglobulin,IgY)是抗原免疫禽類后由卵黃中分離得到的特異性抗體。與哺乳動物來源的IgG比較,卵黃囊抗體具有取材方便、分離純化方法簡單、產(chǎn)量高,同時具有特異性高、穩(wěn)定性較好等優(yōu)點,在疾病診斷、防治等諸多方面得到了廣泛的應(yīng)用,一直是生命科學(xué)相關(guān)科研領(lǐng)域的研究熱點。
與哺乳動物血清免疫球蛋白相似,卵黃囊抗體的基本結(jié)構(gòu)包括2條輕鏈和2條重鏈,分子量約為180kD。卵黃囊抗體的疏水性大于IgG。Lee和Kim等研究表明,卵黃囊抗體具有良好的穩(wěn)定性,對pH及酶等作用引起的失活效應(yīng)有較強的抵抗力。
一、卵黃免疫球蛋白的制備
1、 實驗動物的免疫 Schwarzkopf等研究結(jié)果表明:經(jīng)皮下注射的方法比肌肉注射能產(chǎn)生更高滴度的抗體,免疫間隔時間對抗體的產(chǎn)生影響較大。通常,初次免疫與第一次加強免疫之間的時間間隔至少4周。另有研究分別于第0d,10周及15周免疫產(chǎn)蛋雞,獲得了高達1∶160000的抗體滴度。
2、 卵黃囊抗體的分離 從卵黃液中分離卵黃囊抗體的關(guān)鍵是除去卵黃中高含量的脂肪及脂蛋白,以獲得水溶性組分(Water Soluble Fraction,WSF)。根據(jù)純度要求、技術(shù)工藝以及對環(huán)境的影響等因素,可以選擇不同的分離方法。常見分離方法包括以下幾種。
1) 水稀釋法 先將卵黃液用蒸餾水稀釋10倍,調(diào)整pH值至50~52,4℃靜置6h以上,上清液即為水溶性組分。水稀釋法工藝簡單,若采用適當?shù)姆椒ㄟM行純化,可獲得較高的回收率和純度。
2) 有機物沉淀法 聚乙二醇(PEG)法是較常用的方法。Bizanov和Normantiene用仙臺病毒免疫產(chǎn)蛋母雞,收獲高免雞蛋。以TBS作為緩沖液,將卵黃液稀釋4倍后,加入35%的聚乙二醇6000,沉淀脂類,卵黃囊抗體保留在上清液中。應(yīng)用這種方法從每毫升卵黃液中獲得約45mg的特異性卵黃囊抗體,純度達95%。
3) 有機溶劑抽提法 脂類易溶于有機溶劑,可采用氯仿、丙酮等有機溶劑進行分離。用經(jīng)TBS沖洗過的雞蛋黃制成15ml蛋黃液,加入40ml TBS充分混勻后加入40ml氯仿,冷凍離心,分三相。棄去氯仿層,保留水層,中間的半固體相用40ml TBS萃取,取水層,與前一步水層合并即為水溶性組分。
4) 天然膠法 一些天然膠如卡拉膠和黃原膠等可用于卵黃抗體分離。將9倍體積的01%(w/v)卡拉膠溶液與卵黃混合,離心得到水溶性組分。也可將卵黃先用雙蒸水稀釋1倍后再與4倍體積的黃原膠混勻,離心即得水溶性組分。使用天然膠法去除脂類效果較好,獲得的水溶液中脂類含量少于04%。
5) 中鏈脂肪酸法 辛酸是用于卵黃囊抗體分離最常用的中鏈脂肪酸。蛋黃用去離子水稀釋75倍,混勻,離心,上清液再用醋酸鹽緩沖液稀釋2倍,調(diào)pH值至50,加辛酸至終濃度為1%,靜置分層,卵黃囊抗體在水層中。
6 ) 去污劑分離法 Sriram等比較了幾種去污劑包括陰離子、陽離子和非離子型去污劑,發(fā)現(xiàn)用溴化十六烷基三甲銨進行分離,脂類的殘留量不足3%,而用十二烷基磺酸鈉分離殘留量最高,為14%~35%。用非離子型去污劑辛苯聚醇8(TRITON.RTM.X114)分離時,蛋白回收率可達85%~95%。Stalberg等利用TX100進行分離,蛋白回收率可達97%。
7) 超臨界氣體提取法 該法的基本原理是在高壓下二氧化碳液化,將卵黃中的脂溶性物質(zhì)溶解在其中,并隨氣流帶走。將卵黃粉末裝入超臨界氣體抽提裝置,通入300kg/cm2,40℃二氧化碳超臨界氣體與卵黃粉末混合,在60kg/cm2,40℃的減壓條件下,被抽提出的雜質(zhì)與超臨界氣體分開而進入分離室,即可得到去除脂類的卵黃粉末。將去脂的卵黃粉末溶于20倍磷酸鹽緩沖液中,攪拌,離心,即可得水溶性組分。
3、 卵黃囊抗體的提取方法 提取的目的是將大量卵黃囊抗體從水溶液中分離出來,得到卵黃抗體。目前主要通過超濾法或沉淀法來實現(xiàn)。沉淀法所用的沉淀劑包括無機物、有機物或有機溶劑,也可以采用多種方法聯(lián)合沉淀,或者沉淀法和超濾法相結(jié)合的方法提取卵黃囊抗體。
超濾法 超濾法具有濃縮、除鹽、分級和純化作用。卵黃囊抗體的分子量約為180kD,在提取時可采用截流值為100kD的超濾膜。研究表明,在水稀釋法分離后經(jīng)硫酸鈉沉淀,超濾,回收率為98mg卵黃囊抗體/ml蛋黃,純度94%。超濾法具有所需設(shè)備較簡單、操作方法簡便等優(yōu)點,適合大規(guī)模 工業(yè) 化提取卵黃囊抗體。
4、 卵黃囊抗體的純化方法 為了滿足不同的使用目的,許多情況下需對提取的卵黃囊抗體進一步純化,除去其中的雜蛋白、鹽或其他雜質(zhì),獲得高純度的卵黃囊抗體。目前主要采用層析方法純化卵黃囊抗體,包括凝膠過濾層析、離子交換層析以及親和層析等。
凝膠過濾層析 主要利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠分子篩作用,可根據(jù)被分離物的分子大小不同選擇不同的凝膠介質(zhì)進行層析。卵黃囊抗體純化時,常用交聯(lián)葡聚糖作為凝膠層析介質(zhì)。研究人員對PEG法分離獲得的卵黃抗體采用疏水層析(HIC)和凝膠過濾(GF)兩步法純化,產(chǎn)物純度較高。1ml含58mg卵黃抗體的稀釋液,經(jīng)過PEG分離、HIC和GF處理后,卵黃抗體含量依次為35,47和12mg。
離子交換層析 純化卵黃囊抗體時多采用以葡聚糖交聯(lián)的弱堿性陰離子交換劑DEAE為載體,磷酸鹽緩沖液作為吸附洗脫體系進行分離純化。用DEAESephacel柱層析可獲得純度為98%卵黃囊抗體,每個雞蛋黃可收獲70~100mg卵黃囊抗體。
親和層析 純化卵黃囊抗體采用的親和層析方法包括親硫?qū)游?、固相金屬離子親和層析、合成配體親和層析以及免疫親和層析等。
方法應(yīng)用比較 綜上所述,經(jīng)過分離和提取方法通常就可以得到純度較高的卵黃抗體。衡量一個制備方法的優(yōu)劣要考慮分離、提取和純化的全過程,從工藝路線、工藝條件以及回收率和純度等方面綜合評價。從工藝路線上看,水稀釋法(WD法)、卡拉膠法(CAR法)、超臨界氣體提取法(SFE法)和硫酸銨法(AMS法)工藝路線較短,而其他方法需兩步或更多步驟獲得沉淀;工藝條件方面,AMS法需-20℃冷凍,SFE法需要超臨界氣體抽提設(shè)備,對設(shè)備要求較高;從原材料成本看,CAR法采用的是天然膠,成本較高;從回收率和純度方面看,WD法和SFE法的產(chǎn)品純度和回收率都較高。綜合上述因素,認為WD法和SFE法具有工藝簡便、生產(chǎn)成本較低、產(chǎn)品純度和回收率高等優(yōu)點,適合于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
【關(guān)鍵詞】β2-微球蛋白;微量白蛋白;糖尿病腎病
【中圖分類號】R-0 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2015)05-0257-01
糖尿病腎病(DN)是糖尿病常見并發(fā)癥之一,如果不及時治療會導(dǎo)致腎功能下降,腎功能衰竭,嚴重會致死[1]。大多數(shù)腎損害起病隱匿,進展緩慢。早期診斷較困難,依靠血肌酐、尿素氮、尿蛋白作診斷時往往預(yù)示腎臟病變已進展到相當程度,因此早期診斷、早期治療尤為重要。我院于2015年5月~2015年8月對尿病患者及健康體檢者聯(lián)合檢測β2-MG、尿MALB,具體結(jié)果分析如下。
1 資料和方法
1.1 一般資料 本組50例糖尿病患者,其中男25例,女25例。年齡40~60歲,平均年齡48.5歲。均符合WHO規(guī)定的糖尿病診斷標準;正常健康體檢對照組50例,男25例,女25例。年齡40~60歲。所有研究對象均已排除有原發(fā)性腎臟病、繼發(fā)性高血壓、急性感染、創(chuàng)傷、腫瘤、妊娠、心肝疾病、惡性腫瘤等疾病?;炇覚z測血肌酐、尿素氮、尿常規(guī)蛋白定性為陰性。
1.2方法 所有患者晨起留取第1次中段尿,立即送檢,加樣前離心10min,在室溫下1h內(nèi)檢測完畢。采用日本產(chǎn)奧林巴斯AU400全自動生化分析儀。MALB采用免疫比濁法。β2-MG采用終點法。MALB
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析,用χ2檢驗,P
2結(jié)果
糖尿病組:尿微量白蛋白及β2-微球蛋白陽性例數(shù)分別為27例、24例。檢測值范圍分別為28-115 mg/L、0.8-5.6 mg/L;健康體檢組:尿微量白蛋白及β2-微球蛋白陽性例數(shù)分別為1例(22 mg/L)、0例。糖尿病組的尿MALB和β2-MG均顯著高于健康體檢組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P
3 討論
隨著人們生活水平的提高,糖尿病患者逐年增加,DN是DM常見的微血管并發(fā)癥之一,因其發(fā)病隱匿,常規(guī)的尿蛋白及腎功能檢查難以發(fā)現(xiàn)早期腎損傷,故對糖尿病腎病的早期診斷愈來愈受到重視,因此探討DM的病因、發(fā)展、早期診斷有著重要意義。糖尿病腎?。―N)的主要衡量指標為蛋白尿,是糖尿病患者能夠生存下來并且減少其并發(fā)癥發(fā)生的主要影響因素[2]。蛋白尿的發(fā)生機制是由于腎小球濾膜的通透性增大,致使血漿蛋白特別是白蛋白大量漏出,超過近端腎小管對蛋白的重吸收能力而形成的。持續(xù)和大量蛋白尿造成腎臟高灌注、高濾過狀態(tài),促進腎小球硬化或間質(zhì)纖維化的發(fā)展,因而成為腎臟原有病理改變加重的因素。
微量白蛋白分子量中等,帶負電荷,在正常情況下由于腎小球濾過膜電荷選擇性屏障的靜電同性相斥作用,絕大部分不能通過腎小球濾過膜。當腎小球受到炎癥、毒素等的損害,引起腎小球毛細血管壁通透性增加,濾出較多的血漿蛋白,超過了腎小管重吸收能力,尿中含量增大,但又未達到臨床蛋白尿的標準。研究顯示當濾過膜通透性增加時, 血中的蛋白質(zhì)可從腎小球濾過,主要為MALB[3],是腎小球損害早期診斷的指標,也稱為腎小球性蛋白尿。尿微量白蛋白(mAlb)作為腎小球微血管病變最早期的客觀指標,對糖尿病腎病的早期診斷有重要意義[4]。β2-MG廣泛分布于體內(nèi)所有細胞中,分子量11.8 KD ,主要由肝臟合成。正常人體內(nèi)的 β2-M能自由通過腎小球濾過膜,原尿中的99. 9 %的β2-MG可被近端腎小管上皮細胞重吸收和降解,不再返回血循環(huán),從而保證血液中β2-MG濃度恒定, 所以正常人尿中只有痕跡量。當腎近曲小管輕微受損時,對β2-MG的重吸收下降, 尿β2-MG含量就增加。所以當DN影響到腎小管重吸收功能時尿β2-MG升高[5]。β2-MG在尿中含量增大,是早期判斷腎小管損傷的敏感指標,因此也被稱為腎小管性蛋白尿。多次檢測β2-MG超過正常,尤其是逐漸升高者,盡管尿素氮、肌酐和尿常規(guī)結(jié)果仍正常,多表示腎功能已有損害,所以測定有精確、靈敏、特異性強等優(yōu)點[6]。
由此可見,尿液的微量白蛋白和β2-微球蛋白含量能較靈敏地反映出腎小球的濾過功能和腎近端小管的重吸收功能,有利于糖尿病腎病的早期診斷,預(yù)防控制DN并發(fā)癥的發(fā)生。
參考文獻:
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[關(guān)鍵詞] 尿白蛋白;免疫球蛋白G;β2微球蛋白;老年糖尿病
[中圖分類號] R587.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-4062(2016)06(b)-0095-02
Clinical Significance of Detection of Urinary Albumin, Immunoglobulin G and Beta 2 Micro Spheres in Elderly Patients with Diabetes Mellitus
GAO Hong-guo, LI Lu, CUI Ying
Department of Laboratory, General Hospital of Daqing Oil Field, Daqing,Heilongjiang Province, 163001 China
[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of detection of urinary albumin, immunoglobulin G and beta 2 microglobulin in the treatment of elderly patients with diabetes. Methods In our hospital from January 2014 to June 2015 were 60 cases of elderly patients with diabetes as the observation group, select the same period 60 cases of physical examination in our hospital as the control group. The detection of urine two groups of patients with albumin, immunoglobulin G and beta 2 microglobulin, test content and positive rate in the control group. Results The beta 2 microglobulin, urinary albumin and immunoglobulin G detection was lower than the observation group, the difference was significant (P < 0.05); the control group of beta 2 microglobulin in urine. Albumin and immunoglobulin G positive rates were 5%, 15%, 10%, lower than the patients in the observation group were 73.3%, 61.7%, 66.7%, significant difference(P < 0.05). Conclusion Beta 2 microglobulin, and the content of urinary albumin and immunoglobulin G Positive detection rate results, can provide a basis for clinical diagnosis and treatment of elderly patients with diabetes, has a certain clinical significance.
[Key words] Urinary albumin; Immunoglobulin G; Beta 2 micro albumin; Aged diabetes mellitus
糖尿病是一種以高血糖為特征代謝性疾病,是因胰島素作用缺陷或分泌異常造成,病發(fā)率高。糖尿病多發(fā)于中老年患者,多伴有高血壓、動脈硬化及血脂異常等疾病?;颊卟“l(fā)常伴隨疲乏無力、肥胖、多食、多飲、多尿及消瘦等并發(fā)癥,降低患者的生活質(zhì)量[1]。目前臨床針對糖尿病的發(fā)病機制與病因尚不明確。隨著患者年齡的增大、機體免疫力下降,導(dǎo)致患者體內(nèi)蛋白質(zhì)、碳水化合物及脂肪代謝紊亂,損害患者的神經(jīng)、血管、心臟及肝腎等器官組織,導(dǎo)致器官組織功能下降,從而引發(fā)病變或衰竭,危害患者的生命安全[2-3]。臨床研究表明[4],糖尿病患者檢查結(jié)果易出現(xiàn)β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G含量變高現(xiàn)象。該研究為論證上述結(jié)論,對老年糖尿病患者的尿白蛋白、免疫球蛋白G及β2微球蛋白水平進行檢查,并分析其對臨床診斷治療的意義,現(xiàn)報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取該院2014年1月―2015年6月收治的老年糖尿病患者60例作為觀察組。其中男32例,女28例,年齡53~75歲,平均年齡(63.2±4.8)歲。選擇同期來該院健康體檢的60例人員作為對照組,其中男34例,女26例,年齡51~73歲,平均年齡(65.3±4.6)歲。所有患者均無糖尿病合并癥及藥物過敏史,且對該研究均知情,并簽署同意書。兩組患者在年齡、性別等一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
1.2 方法
在所有患者處于空腹及靜息的狀態(tài)下,采集兩組患者晨起后的首次小便尿液,作為尿液標本,并利用免疫學(xué)實驗法檢測所得標本。檢測對照組及治療組患者的β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G含量,統(tǒng)計兩組人員陽性檢出率。
1.3 診斷標準
臨床檢查蛋白尿的診斷標準為:尿液中尿β2微球蛋白含量≤154 μg/L,免疫球蛋白G含量≤5.45 g/L,尿蛋白含量≤14.8 mg/L,若檢測結(jié)果顯示高于正常值范圍,為檢查陽性。
1.4 統(tǒng)計方法
數(shù)據(jù)均用統(tǒng)計軟件SPSS19.0處理分析,計量資料用(x±s)表示,采用t檢驗,計數(shù)資料用n(%)表示,行χ2檢驗,P
2 結(jié)果
2.1 兩組患者β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G檢出率對比
檢測結(jié)果顯示,對照組健康體檢人員的β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G陽性檢出率分別為5.0%、15.0%、10.0%,低于觀察組患者73.3%、61.7%、66.7%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P
2.2 兩組患者β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G檢測含量對比
檢測結(jié)果表明,對照組健康人員β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G檢測含量低于觀察組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P
3 討論
糖尿病是由多種病因?qū)е碌囊月愿哐菫樘卣鞯慕K身性代謝疾病。患者因長期血糖偏高,對其心、腦、腎、眼睛、足及周圍神經(jīng)具有一定的損傷,嚴重危害患者的身心健康及生命安全。而環(huán)境因素和遺傳因素等因素共同作用是造成糖尿病病發(fā)的主要原因[5]。胰島β細胞分泌與合成胰島素,經(jīng)血循環(huán)到達患者體內(nèi)的各器官組織的靶細胞與特意性受體結(jié)合,增強細胞內(nèi)物質(zhì)代謝作用,若整個作用過程中任意一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常均會引發(fā)糖尿病[6]。且當患者病情應(yīng)激或加重時,易引發(fā)嚴重的急性代謝紊亂癥狀,可對患者的腎臟造成不可逆性損傷,病發(fā)率與致死率高。故及早發(fā)現(xiàn)糖尿病病癥,及時診斷并給予對癥治療,對控制糖尿病的發(fā)生與發(fā)展至關(guān)重要[7-8]。
代謝紊亂癥狀群是老年糖尿病患者的主要臨床表現(xiàn),伴有視力模糊、肢體無力及皮膚瘙癢等癥狀。因傳統(tǒng)檢測的血糖值常為瞬間血糖狀態(tài),故臨床診斷需檢測患者的靜脈血漿,操作不便。該研究采集糖尿病患者及健康體檢人員的尿液標本,檢測尿液中的β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G含量含量。檢測結(jié)果顯示,對照組健康體檢人員的β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G陽性檢出率與含量均低于觀察組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P
綜上所述,檢測老年的糖尿病患者的尿白蛋白、免疫球蛋白G及β2微球蛋白,可作為臨床診斷治療糖尿病患者的指標,結(jié)果可靠,操作簡便,值得臨床推廣使用。
[參考文獻]
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關(guān)鍵詞: 特異性人免疫球蛋白 HBIG TIG 穩(wěn)定性試驗
特異性人免疫球蛋白是用疫苗或毒素免疫人體使其血漿產(chǎn)生高效價抗體,經(jīng)低溫乙醇蛋白分離法制備并經(jīng)低pH放孵病毒滅活處理的特異性免疫球蛋白制劑,與抗毒素及抗血清相比,特異性人免疫球蛋白在使用過程中不會發(fā)生因注射異種蛋白而產(chǎn)生嚴重的過敏反應(yīng),其抗體在患者體內(nèi)維持時間較長。隨著我國醫(yī)療及健康水平的不斷提高,特異性人免疫球蛋白在臨床上的使用越來越受到關(guān)注[1,2]。特異性人免疫球蛋白主要使用成分是IgG,含有針對各種不同抗原的抗體,本文對其穩(wěn)定性的觀察是以抗體活性變化作為主要考察指標,并以HBIG、TIG兩種制品為代表,通過制品在不同溫度下放置一定時間后,檢測其抗體效價等項指標的變化來了解制品的穩(wěn)定性,以確定其有效期,現(xiàn)將有關(guān)試驗方法及結(jié)果報告如下。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 特異性人免疫球蛋白(HBIG、TIG) 均由蘭州生物制品研究所采用低溫乙醇工藝結(jié)合低pH放孵滅活病毒步驟制備而成(批號分別為HBIG:20030701、20030702、20030703,200IU/支;TIG:20070401、20070402、20070403,250IU/支,均為液體劑型)。
1.1.2 乙型肝炎表面抗體 抗-HBs放射免疫分析試劑盒:3V診斷技術(shù)公司提供。
1.1.3 抗-HBs、TIG標準品 均由中國藥品生物制品檢定所提供。
1.1.4 儀器設(shè)備 γ-計數(shù)器,2008G型,國營二六二廠生產(chǎn);HPLC色譜柱:日本產(chǎn)G3000SW,規(guī)格7.5mm×300mm;紫外可見分光光度計:U-2001,日本日立公司。
1.2 方法
1.2.1 抗-HBs效價 按2000年版《中國生物制品規(guī)程》制定,各樣品測定均重復(fù)1次,按均值計算。
1.2.2 抗-TT效價 按《中華人民共和國藥典》2005年版(三部)附錄ⅪF破傷風(fēng)抗毒素效價測定法進行,并將其檢測結(jié)果與ELISA法測定結(jié)果進行比較。
1.2.3 HBIG、TIG的單體加二聚體的檢查 均按《中華人民共和國藥典》2005年版(三部)的要求進行。
1.2.4 留樣觀察法 將蘭州生物制品研究所制備的HBIG制品置于2℃~8℃、(24±1)℃、(37±1)℃,分別于0、3、6、12、18、24及36個月取出,檢測其有關(guān)質(zhì)量指標,同樣將上述來源的破傷風(fēng)人免疫球蛋白的(TIG)置于(6±2)℃,于0、3、6、9、12個月取樣,置于(25±2)℃,于0、1、2、3、6個月取樣,檢測其有關(guān)質(zhì)量指標。 2 結(jié)果
2.1 抗體效價
2.1.1 抗-HBs效價 乙型肝炎人免疫球蛋白的抗-HBs效價在不同放置條件下的變化結(jié)果見表1。結(jié)果顯示,制品在2℃~8℃存放3年時,抗-HBs效價無明顯改變,在(24±1)℃存放1年半時,抗-HBs效價平均下降 32.8%,在(37±1)℃存放3個月后,抗-HBs效價開始明顯降低。表1 HBIG在不同放置條件下的抗-HBs效價
2.1.2 抗-TT效價 破傷風(fēng)人免疫球蛋白的抗-TT效價在不同放置條件下的變化結(jié)果見表2,結(jié)果顯示,該制品在(6±2)℃存放1年時,破傷風(fēng)抗體效價無明顯改變;在(25±2)℃存放半年時,破傷風(fēng)抗體效價平均下降10.41%。
2.2 IgG單體加雙體 特異性人免疫球蛋白中的IgG易于聚合,其中HBIG在2℃~8℃存放3年后,IgG單體加雙體平均下降了1.26%;TIG在(6±2)℃存放1年后,IgG單體加雙體平均下降了1.14%。但上述兩種制品在(24±1)℃存放6個月后單體加雙體的總和開始明顯下降,其變化情況分別見表3、表4。表2 TIG在不同放置條件下的抗-TT效價表3 HBIG IgG單體加雙體在不同條件下放置后的變化表4 TIG IgG單體加雙體在不同條件下放置后的變化
2.3 蛋白質(zhì)含量及純度 HBIG、TIG蛋白質(zhì)含量及純度的穩(wěn)定性分別見表5、表6、表7、表8。從表中的情況反映出,HBIG樣品在不同溫度下[2℃~8℃、(24±1)℃、(37±1)℃]分別放置1年、2年及3年時,TIG樣品在(6±2)℃和(25±2)℃下分別放置半年和1年時,蛋白質(zhì)含量和純度基本上沒有發(fā)生改變,均說明這兩項指標較為穩(wěn)定。 表5 HBIG不同放置條件蛋白質(zhì)含量變化情況 表6 HBIG不同放置條件下蛋白質(zhì)純度變化表7 TIG不同放置條件蛋白質(zhì)含量變化情況表8 TIG不同放置條件下蛋白質(zhì)純度變化
【關(guān)鍵詞】內(nèi)科治療原發(fā)性巨球蛋白血癥
原發(fā)性巨球蛋白血癥又名華氏巨球蛋白血癥,以合成及分泌大量單克隆LgM蛋白的淋巴樣漿細胞惡性增生、積聚為特點,臨床表現(xiàn)為高黏滯綜合征,部分病例的臨床表現(xiàn)與淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤和慢性淋巴細胞性白血病相似。本病男性多見,發(fā)病年齡多在50歲以上。目前病因不明??赡芘c潰傳、慢性感染及一些腫瘤疾病有關(guān)。
一、臨床資料
10例病例中,男2例,女8例,發(fā)病年齡70~75歲,平均年齡72歲.發(fā)病開始至確診時間最短時間2個月,最長10個月.4例均以貧血為主要癥狀,2例以發(fā)熱為首發(fā)表現(xiàn),明顯消瘦2例.肝脾腫大1例,眼底出血、滲出1例。
二、診斷
(1)臨床表現(xiàn):①老年患者有不明原因貧血及出血傾向;②有高黏滯綜合征表現(xiàn)(視力障礙、腎功能損害、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀等)或雷諾現(xiàn)象;③肝、脾、淋巴結(jié)腫大。
(2)實驗室檢查:①血清中單克隆LgM>10g/L;②可有貧血、白細胞及血小板減少,③骨髓、肝、脾、淋巴結(jié)中有淋巴樣漿細胞浸潤。免疫熒光法檢查可見該細胞胞漿及表面含1gM;④血液黏滯度增高;發(fā)病年齡、血清中單克隆LgM>10g/L及骨髓中漿細胞樣淋巴細胞浸潤是診斷本病的必要依據(jù)。
三、治療
無癥狀的患者病情??杀3侄嗄攴€(wěn)定而不需要治療,但應(yīng)嚴密隨訪。出現(xiàn)進行性貧血、出血和高黏滯綜合征應(yīng)進行治療??筛鶕?jù)疾病的嚴重程度調(diào)節(jié)治療,當疾病隱匿、IgM水平較低或沒有器官浸潤、缺乏高黏滯綜合征表現(xiàn)時可不治療或給予小劑量烷化劑藥物,以使患者維持在無癥狀的狀態(tài)。如果疾病的唯一癥狀是高黏滯綜合征時,可采用血漿置換術(shù),如血漿置換頻繁,可加上化療藥物。苯丁酸氮芥(瘤可寧)是主要的治療藥物,有效率約50%,IgM的降低速度較慢,需觀察幾個月才能確定其療效。抗代謝藥物氟達拉濱(FludambLne)和CladrLbLne治療巨球蛋白血癥的有效率在70%以上,其主要的不良反應(yīng)是骨髓抑制和免疫抑制。超級秘書網(wǎng)
四、預(yù)后
多數(shù)患者病情進展緩慢,中位生存期為2~6年,約20%的患者生存期可超過10年。影響預(yù)后的因素尚不清楚,發(fā)病年齡、血象、白蛋白量及巨球蛋白的性質(zhì)都與預(yù)后有關(guān)。1997年Morel等根據(jù)232例巨球蛋白血癥的觀察結(jié)果,提出了一個積分方法,根據(jù)其積分把巨球蛋白血癥患者分為3組:低危組(0~1分)占27%,5年生存率占86%;中危組(2分)占27%,5年生存率61%;高危組(3~4分)占46%,5年生存率26%。該病晚期可出現(xiàn)高黏滯綜合征、出血、血栓形成、溶血性貧血、反復(fù)感染、極少數(shù)并發(fā)淋巴瘤和白血病。
參考文獻