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歲末感言范文第1篇

Abstract: According to the construction of railway tunnel in Lanyu line， in this paper， long bolt is the main method to control the displacement. It provides the process of numerical simulation of tunnel type anchorage and analyzes the stability of surrounding rock. In the soft surrounding rock tunnel， the reinforcement effect of the advanced long bolt is better than that of the common bolt.

關(guān)鍵詞： 錨固試驗(yàn)；軟弱圍巖；長(zhǎng)錨桿；數(shù)值模擬

Key words: anchoring test；soft surrounding rock；long bolt；numerical simulation

0 引言

目前，普遍應(yīng)用于地質(zhì)條件較好的巖土工程中的錨桿，其支護(hù)效果表現(xiàn)良好。但在圍巖松軟破碎、高地應(yīng)力等復(fù)雜條件下的大變形隧道中，錨桿支護(hù)仍然是尚待解決的難題。國(guó)內(nèi)外錨桿支護(hù)正朝著提高錨固力、提高支護(hù)效率、擴(kuò)大應(yīng)用范圍方向發(fā)展。普遍認(rèn)為開(kāi)發(fā)具有強(qiáng)初撐、急增阻、高阻力力學(xué)特性的錨桿支護(hù)，是控制高應(yīng)力、軟巖大變形隧道的有效途徑，是錨桿支護(hù)的主要發(fā)展方向[1]。

本文以蘭渝線蘭州至廣元段鐵路隧道施工為工況模擬背景，針對(duì)該工程隧道開(kāi)挖中圍巖大變形問(wèn)題（開(kāi)挖變形達(dá)25cm），以長(zhǎng)錨桿作為變形控制的主要手段，對(duì)現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)進(jìn)行模擬對(duì)比驗(yàn)證計(jì)算，為完善軟巖大變形控制方法提供進(jìn)一步依據(jù)。

1 工程概況

該工程位于甘肅省岷縣縣城東邊。隧道于洮河右岸岷縣奈子溝村東側(cè)山坡（DK201+820）進(jìn)洞，在岷縣正龍骨料飼料廠后山坡（DK206+955）出洞。隧道全長(zhǎng)5135m，為雙線隧道。隧道進(jìn)、出口位于國(guó)道G212路邊，交通方便。洞身段落山大溝深，地形起伏很大，距離國(guó)道較遠(yuǎn)，交通不便。該工程地貌上位于西秦嶺中山區(qū)。山高溝深，山坡、谷坡較陡，隧道洞身最大埋深248m，梁頂植被覆蓋較好。該隧道洞身經(jīng)過(guò)的地層有第四系全新統(tǒng)坡積砂質(zhì)黃土、碎石土；二疊系下統(tǒng)炭質(zhì)板巖、板巖、砂巖，三疊系中統(tǒng)板巖、砂巖等。山坡表層覆蓋有第四系全新統(tǒng)坡積黏質(zhì)黃土，坡積、滑坡堆積粗角礫土、碎石土等。

2 錨固試驗(yàn)施工方法

考慮到成本投入和施工的便利性、可操作性，制定方案主要如下。以長(zhǎng)錨桿作為變形控制的主要手段設(shè)置試驗(yàn)段，沿中線對(duì)稱布置，錨桿鉆孔施作采用專用幫錨桿機(jī)。分三組試驗(yàn)：第一組錨桿長(zhǎng)3m；第二組錨桿長(zhǎng)6m；第三組錨桿長(zhǎng)8m；錨桿間距均為1m。錨桿布置情況如圖1所示。該控制措施效果富余時(shí)，可再確定加大錨桿間排距試驗(yàn)，以便于確定合理的加固措施。其中3m、6m、8m長(zhǎng)錨桿分別選用?準(zhǔn)22螺紋鋼、?準(zhǔn)42注漿鋼管、?準(zhǔn)70注漿鋼管，其施作富余部分與鋼拱架焊接，鎖定鋼拱架。施作步驟：鉆孔快硬水泥卷與螺紋鋼端頭插入送快硬水泥卷與螺紋鋼入孔注漿螺紋鋼鎖定鋼拱架。

3 模擬計(jì)算及分析

為分析錨桿對(duì)隧道圍巖變形控制的影響，根據(jù)實(shí)際工程的地質(zhì)條件分別進(jìn)行錨桿長(zhǎng)度和直徑的對(duì)比試驗(yàn)的模擬研究。

3.1 隧道計(jì)算范圍及地質(zhì)條件 隧道左右側(cè)邊界為隧道開(kāi)挖洞徑的4倍，上下側(cè)為隧道開(kāi)挖洞徑的3倍（隧道毛斷面凈高12.5m，跨度14.0m）。依據(jù)地形條件加載自重應(yīng)力。圍巖為Ⅴ級(jí)，處在F3斷層內(nèi)，隧道洞身二疊系～三疊系板巖、砂巖巖體節(jié)理裂隙發(fā)育，工程地質(zhì)條件差。 轉(zhuǎn)貼于

3.2 計(jì)算單元和計(jì)算參數(shù)的選取 根據(jù)隧道結(jié)構(gòu)的不同部分的特點(diǎn)選用合適的單元可以使模型更加接近工程實(shí)際，提高計(jì)算精度，減小解題規(guī)模。本次模擬采用ANSYS軟件對(duì)隧道開(kāi)挖采用二維方式模擬，計(jì)算采用了三種單元，用實(shí)體單元PLANE42模擬圍巖和挖去的土體單元，用桿單元LINE1模擬隧道錨桿，用梁?jiǎn)卧狟EAM3模擬噴射混凝土和鋼拱架。主要模擬計(jì)算參數(shù)噴射混凝土：厚度0.3m，彈性模量30e9Pa，泊松比0.2，密度2551kg/m3；圍巖：彈性模量1.3e9Pa，泊松比0.38，凝聚力0.2e6Pa，內(nèi)摩擦角21；錨桿：彈性模量200ePa，泊松比0.3，密度7840kg/m3 。

3.3 數(shù)值模擬分析 采用ANSYS軟件對(duì)長(zhǎng)錨桿支護(hù)軟弱圍巖隧道方案進(jìn)行模擬，取經(jīng)過(guò)隧道縱軸線的圍巖立面為研究對(duì)象，分別得到27根4米錨桿、26根6米錨桿、12根8米錨桿作用下的圍巖豎向位移分布云圖。

3.3.1 以ANSYS模擬開(kāi)挖和支護(hù)效果，選取合理的模擬計(jì)算參數(shù)十分重要，經(jīng)多次反復(fù)調(diào)試及驗(yàn)證才能獲得有效的接近工程實(shí)際的模擬云圖。

3.3.2 位移控制效果分析。如圖2，27根3m錨桿控制最大變形量為18.947cm，26根6m錨桿控制最大變形量為14.009cm，12根8m錨桿控制最大變形量為14.7cm，且都發(fā)生在仰拱處，可見(jiàn)，優(yōu)化的錨桿設(shè)置控制變形最為有效。由錨桿軸力圖知，錨桿近端軸力大，遠(yuǎn)端軸力小，而且拱頂軸力比兩側(cè)的大，且錨桿的軸力相對(duì)于隧道結(jié)構(gòu)來(lái)說(shuō)是對(duì)稱的。

3.3.3 圍巖穩(wěn)定性分析。在長(zhǎng)錨桿的作用下，由于長(zhǎng)錨桿較強(qiáng)的錨固力作用，改善了圍巖的應(yīng)力狀態(tài)，臨空面附近穩(wěn)定性較弱的巖體與深部穩(wěn)定性較好的巖體通過(guò)長(zhǎng)錨桿連接在一起，增強(qiáng)了巖體結(jié)構(gòu)的整體作用，使得圍巖的整體性和承載能力得到了提高，圍巖的穩(wěn)定性亦顯著提高。

4 結(jié)論

4.1 對(duì)現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)進(jìn)行數(shù)值模擬計(jì)算，為軟巖大變形控制方法的研究提供了一定的依據(jù)。

4.2 大變形隧道錨桿與圍巖相互作用雖取決于圍巖的力學(xué)特性以及隧道所處地形情況，但長(zhǎng)錨桿對(duì)軟弱圍巖隧道的變形也具有一定的控制作用，長(zhǎng)錨桿能夠改變圍巖的力學(xué)特性，提高圍巖的自承能力，減少圍巖變形，保持隧道圍巖的穩(wěn)定性。

4.3 針對(duì)具體地形以及隧道圍巖的力學(xué)性質(zhì)等因素優(yōu)化錨桿設(shè)置，對(duì)于軟弱圍巖隧道，長(zhǎng)錨桿的設(shè)置對(duì)圍巖的加固效果優(yōu)于普通錨桿設(shè)置。

參考文獻(xiàn)

[1]孫鈞.巖土力學(xué)與地下工程結(jié)構(gòu)分析的若干進(jìn)展[J].力學(xué)季刊，2005，26（3）：329-338.

孫鈞.地下結(jié)構(gòu)有限元法解析[M].上海：同濟(jì)大學(xué)出版社，1988.

鄭穎人，趙尚毅，鄧楚鍵等.有限元極限分析法發(fā)展及其在巖土工程中的應(yīng)用[J].中國(guó)工程科學(xué)，2006，8（12）：39-61.

歲末感言范文第2篇

【關(guān)鍵詞】 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞； 肺氣腫； 移植

慢性阻塞性肺疾?。璺危珻OPD）嚴(yán)重影響人類健康，與慢性支氣管炎及阻塞性肺氣腫密切相關(guān)，而阻塞性肺氣腫可出現(xiàn)肺泡、支氣管上皮細(xì)胞的損傷，造成肺實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞，且隨著病情進(jìn)展，肺功能進(jìn)行性下降?，F(xiàn)行的內(nèi)科治療手段是盡早去除致病因素，最大限度減少損傷細(xì)胞的數(shù)量及損傷程度，但往往無(wú)滿意的療效。肺移植是目前終末期間質(zhì)性肺疾病、慢阻肺患者唯一有效的治療方法，但由于存在供體數(shù)量的下降、免疫排斥反應(yīng)等問(wèn)題而限制了其應(yīng)用。目前人民迫切尋求一種新的、組織替代療法來(lái)治療這類不可逆的肺部疾病。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）由于來(lái)源方便、分離簡(jiǎn)單、擴(kuò)增迅速，可以取材于患者本人，傳代擴(kuò)增并定向誘導(dǎo)為特異細(xì)胞后，回輸給患者本人，安全性高，免疫原性低，且具有多向分化潛能引起廣泛的關(guān)注，被認(rèn)為是細(xì)胞移植和組織工程的種子細(xì)胞[1-3]。本實(shí)驗(yàn)將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）經(jīng)尾靜脈注入肺氣腫大鼠體內(nèi)，觀察MSCs植入大鼠體內(nèi)后在肺組織中的存活，為MSCs治療慢阻肺提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 大鼠MSCs的體外分離與鑒定 （1）MSCs的分離與培養(yǎng)：無(wú)菌條件下取出大鼠雙側(cè)股骨和脛骨，無(wú)菌PBS沖洗骨髓腔獲取骨單細(xì)胞懸液，將單細(xì)胞懸液1000 r/min，離心5 min，10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液5 mL重懸細(xì)胞，接種于培養(yǎng)瓶37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱培，每3天換液一次。倒置相差顯微鏡逐日觀察并記錄的形態(tài)及生長(zhǎng)情況，當(dāng)細(xì)胞融合達(dá)90%時(shí)，按1∶3比例傳代培養(yǎng)。取第4代MSCs進(jìn)行鑒定。（2）流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞CD表型：取第3代MSCs，生長(zhǎng)至90%融合時(shí)PBS洗滌2次，1×106的MSCs重懸于含0.1 mL PBS的PE管中，各管加入CD34、CD45、CD44及CD29，加入抗兔FITC，室溫孵育40 min，流式細(xì)胞儀檢測(cè)上述細(xì)胞表型，陰性對(duì)照為未加熒光抗體的MSCs細(xì)胞懸液。

1.2 移植MSCs的培養(yǎng)、標(biāo)記 取6孔培養(yǎng)板，向每孔中加入2 mL含（1～2）×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37 ℃ 5% CO2培養(yǎng)至40%～50%匯合時(shí)轉(zhuǎn)染（匯合過(guò)度，不利于轉(zhuǎn)染細(xì)胞）。PBS洗細(xì)胞，10% FBS的DMEM/F12繼續(xù)培養(yǎng)，72 h后熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染細(xì)胞的綠色熒光，棄病毒混合培養(yǎng)液，流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，轉(zhuǎn)染后攜帶GFP的MSCs（GFP-MSCs）按1：3傳代培養(yǎng)，取第4代MSCs進(jìn)行鑒定。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及大鼠肺氣腫模型建立 SD大鼠34只按隨機(jī)數(shù)字表分為四組，MSCs干預(yù)組（A組，10只，慢阻肺大鼠，尾靜脈輸注MSCs 1×106個(gè)/mL），肺氣腫模型組（B組，10只，慢阻肺大鼠，尾靜脈輸注等體積PBS）及MSCs對(duì)照組（C組，10只，正常大鼠，尾靜脈輸注MSCs 1×106個(gè)/mL），正常對(duì)照組（D組，4只，正常大鼠，尾靜脈輸注等體積PBS）。采用煙熏法復(fù)制大鼠肺氣腫模型。將A、B組大鼠置于煙室內(nèi)，采用靜式吸入染毒方法，10支椰樹(shù)牌香煙置于吸煙孔內(nèi)，點(diǎn)燃香煙，每支香煙每分鐘吸一次，35 mL/次，收集主流煙氣和側(cè)流煙氣，通過(guò)塑料軟管與熏煙箱相連，將煙霧導(dǎo)入熏煙箱。其間，每隔5秒將箱內(nèi)流風(fēng)機(jī)開(kāi)啟10 s，使箱內(nèi)氣體分布均勻。8 min香煙點(diǎn)燃完畢，關(guān)閉吸煙系統(tǒng)。動(dòng)物每次暴露45 min，45 min后取出動(dòng)物，清洗熏煙箱。2次/d，共12周。煙霧暴露時(shí)動(dòng)物可在箱內(nèi)自由取食飲水。按上述方法將MSCs干預(yù)組第3代的轉(zhuǎn)染GFP質(zhì)粒的間充質(zhì)干細(xì)胞（每只1×106個(gè)/mL）尾靜脈注入A組大鼠體內(nèi)，B組注入等體積PBS；C組在相同時(shí)間內(nèi)注入1×106個(gè)/mL骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞等，D組注入等體積PBS，注入后24 h內(nèi)處死大鼠，取肺組織迅速冰凍切片，共聚焦激光顯微鏡下觀察觀察轉(zhuǎn)染GPF的間充質(zhì)干細(xì)胞在大鼠肺內(nèi)定植情況。第3代的轉(zhuǎn)染GFP質(zhì)粒的間充質(zhì)干細(xì)胞（每只1×106）進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，比較采用單因素方差分析，以P

2 結(jié)果

2.1 MSCs培養(yǎng)與鑒定 原代培養(yǎng)的MSCs第24小時(shí)即可見(jiàn)梭形細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，到第6天時(shí)有大量梭形細(xì)胞呈克隆生長(zhǎng)，第10天左右細(xì)胞可長(zhǎng)滿皿底。細(xì)胞長(zhǎng)滿后與成體MSCs相似，呈旋渦狀（圖1）。按1：3進(jìn)行傳代培養(yǎng)，細(xì)胞在體外培養(yǎng)可穩(wěn)定傳至48代，在第4代做流式細(xì)胞表型鑒定，符合目前公認(rèn)間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞表型標(biāo)志。經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)，分離細(xì)胞傳至第4代時(shí)有99.5%表達(dá)CD44、99.6%表達(dá)CD29等間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志，0.4%表達(dá)CD34、1.0%表達(dá)CD45單核細(xì)胞以及造血干細(xì)胞表型（圖2）。

圖1 MSCs的原代培養(yǎng)（×400）

注：原代培養(yǎng)的MSCs第10天左右細(xì)胞長(zhǎng)滿皿底后，成體MSCs相似，呈旋渦狀。

2.2 SD大鼠肺氣腫模型的建立 香煙煙霧暴露后A、B組大鼠小氣道上皮呈鋸齒狀增生增厚，上皮脫落，纖毛倒伏，氣管內(nèi)見(jiàn)大量炎性滲出物，管壁結(jié)締組織增生，可見(jiàn)炎性細(xì)胞，及淋巴小結(jié)。肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡壁斷裂，肺泡腔擴(kuò)大，部分融合成肺大皰（圖3A）。C、D對(duì)照組大鼠小氣道黏膜上皮完整，纖毛未見(jiàn)黏連脫落，管壁規(guī)整未見(jiàn)增厚，未見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，管腔內(nèi)未見(jiàn)炎性滲出物，肺泡腔未見(jiàn)病理性擴(kuò)大（圖3B）。

香煙煙霧暴露組（A、B組）平均肺泡間隔為（119.0±26.2）μm，高于對(duì)照組（C、D組）的（89.8±17.3）μm，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

表1 大鼠肺組織病理學(xué)改變情況（x±s）

組別 支氣管數(shù)

（只） 平均肺泡間隔（μm） 肺泡數(shù)

（個(gè)/mm2）

對(duì)照組（n=14） 27 89.8±17.3 280.3±104.0

香煙組（n=20） 28 119.0±26.2 173.86±68.3

F值 - 3.8 4.7

P值 -

2.3 各組轉(zhuǎn)染GPF綠色熒光蛋白的表達(dá) 取第8代培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞，調(diào)整合適的間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)密度，細(xì)胞融合40%～5%時(shí)轉(zhuǎn)染GPF綠色熒光蛋白質(zhì)粒，24 h后觀察轉(zhuǎn)染效果，在轉(zhuǎn)染GPF綠色熒光蛋白質(zhì)粒后48～96 h表達(dá)效果最好，質(zhì)粒發(fā)光強(qiáng)度大、數(shù)量多，效率可達(dá)40%左右。微共聚焦發(fā)現(xiàn)MSCs經(jīng)尾靜脈注入大鼠體內(nèi)24 h后，A組大鼠肺組織內(nèi)可見(jiàn)攜帶MSCs的綠色熒光，而B(niǎo)組、C組及D組均未見(jiàn)轉(zhuǎn)染熒光（圖4）。

3 討論

慢阻肺是一種全球性患病率較高的疾病，40歲以上人群，慢阻肺患病率為8.2%[5]。其患病率之高十分驚人，死亡率高，目前居全球死亡原因的第4位，經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)重，已成為世界第5大負(fù)擔(dān)的疾病，由于慢阻肺的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，病理改變可引起氣道結(jié)構(gòu)重塑、肺泡結(jié)構(gòu)破壞及肺血管減少，依靠機(jī)體的自我再生能力無(wú)法達(dá)到完全的修復(fù)，導(dǎo)致病情進(jìn)行性進(jìn)展。目前慢阻肺的內(nèi)科治療以抗炎、擴(kuò)張支氣管、氧療、呼吸運(yùn)動(dòng)鍛煉及增強(qiáng)免疫力等來(lái)緩解患者癥狀及降低患者未來(lái)健康惡化的風(fēng)險(xiǎn)，其作用非常有限，外科肺減容術(shù)及經(jīng)纖支鏡肺減容術(shù)等治療目的在于緩解癥狀和改善生活質(zhì)量，二者均不能阻止病情的進(jìn)行性發(fā)展。因此，如能尋找到一種有效修復(fù)氣道及肺部組織結(jié)構(gòu)，從而恢復(fù)肺功能的方法，將在慢阻肺的治療上將具有里程碑式的意義。

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一類具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞。在一定條件下它可分化為心肌細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞等多個(gè)胚層來(lái)源的細(xì)胞[6-8]。而且骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體外易于分離、培養(yǎng)和擴(kuò)增，免疫原性低，使其在組織工程、細(xì)胞移植、基因治療等領(lǐng)域具有十分廣闊的應(yīng)用前景[1]。近年來(lái)許多研究表明，干細(xì)胞移植可能為某些肺部疾病的治療帶來(lái)新希望[9-13]。1995年P(guān)ereira等[14]從表達(dá)人小基因膠原酶I的轉(zhuǎn)基因鼠中分離獲得成年骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，體外擴(kuò)增、培養(yǎng)，再通過(guò)尾靜脈注射入受致死劑量照射的小鼠中，1～5個(gè)月后，發(fā)現(xiàn)肺實(shí)質(zhì)、骨、軟骨細(xì)胞中都含有膠原酶I陽(yáng)性的細(xì)胞，骨髓來(lái)源干細(xì)胞移植移植到博萊霉素肺纖維化小鼠體內(nèi)，可產(chǎn)生肺泡I型細(xì)胞，并使其肺纖維化程度得到改善。目前MSCs在肺部疾病治療研究主要集中于急性肺損傷與肺間質(zhì)纖維化，在慢阻肺中的研究較少，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是否在慢阻肺大鼠體內(nèi)定植、分化呢？本研究通過(guò)全骨髓貼壁法獲得了足夠數(shù)量和活力的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，培養(yǎng)的MSCs不表達(dá)CD34和CD45，表達(dá)CD29和CD44，在一定的誘導(dǎo)條件下可向脂肪細(xì)胞骨細(xì)胞及軟骨細(xì)胞分化，提示成功培養(yǎng)MSCs。應(yīng)用GFP標(biāo)記的MSCs可表達(dá)綠色熒光蛋白，可應(yīng)用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。筆者應(yīng)用香煙煙熏成功復(fù)制肺氣腫大鼠，觀察經(jīng)尾靜脈注入的MSCs在肺氣腫大鼠肺內(nèi)的生存。將轉(zhuǎn)染GFP質(zhì)粒的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)尾靜脈輸注入肺氣腫模型大鼠體內(nèi)，經(jīng)快速冰凍切片發(fā)現(xiàn)肺氣腫模型大鼠肺內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞有骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定植，這與Kidds等[15]報(bào)道相一致，為MSCs治療慢阻肺提供理論基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

[1] Le B K，Tammik C，Rosendahl K，et al.HLA expression and immunologic properties of differentiated and undifferentiated mesenchymal stem cells[J].Exp Hematol，2003，31（10）：890-896.

[2] Sun Y Q，Deng M X，He J，et al.Human pluripotent stemcell-derived mesenchymal stem cells prevent allergic airway inflammation in mice[J].Stem Cells，2012，30（12）：2692-2699.

[3] Luo D，Yan X，Liu D，et al.Differential effects of mesenchymal stem cells on a heterogeneous cell population within lung cancer cell lines[J].Mol Cell Biochem，2013，378（1-2）：107-116.

[4] Menge T，Zhao Y，Zhao J，et al.Mesenchymal stem cells regulate blood-brain barrier integrity through TIMP3 release after traumatic brain injury[J].Sci Transl Med，2012，4（161）：150-161.

[5] Zhong N，Wang C，Yao W，et al.Prevalence of chronic obstructive pulmonary disease in China： a large， population-based survey[J].Am J Respir Crit Care Med，2007，176（8）：753-760.

[6] Kotton D N，Ma B Y，Cardoso V，et al.Bone marrow-derived cells as progenitors of lung alveolar epithelium[J].Development，2001，128（24）：5181-5188.

[7] Wang G，Bunnell B A，Painter R G，et al.Adult stem cells from bone marrow stroma differentiate into airway epithelial cells： potential therapy for cystic fibrosis[J].Proc Natl Acad Sci USA，2005，102（1）：186-191.

[8] Gregory C A，Prockop D J，Spees J L.Non-hematopoietic bone marrow stem cells： molecular control of expansion and differentiation[J].Exp Cell Res，2005，306（2）：330-335.

[9] Yen C C，Yang S H，Lin C Y，et al.Stem cells in the lung parenchyma and prospects for lung injury therapy[J].Eur J Clin Invest，2006，36（5）：310-319.

[10] Spaeth E L，Kidd S，Marini F C.Tracking inflammation-induced mobilization of mesenchymal stem cells[J].Methods Mol Biol，2012，904（12）：173-190.

[11] Kidd S，Spaeth E，Watson K，et al.Origins of the tumor microenvironment： quantitative assessment of adipose-derived and bone marrow-derived stroma[J].PLoS One，2012，7（2）：e30 563.

[12] Zhang W G，He L，Shi X M，et al.Regulation of transplanted mesenchymal stem cells by the lung progenitor niche in rats with chronic obstructive pulmonary disease[J].Respir Res，2014，15（5）：33.

[13] Scarritt M E，Bonvillain R W，Burkett B J，et al.Hypertensive rat lungs retain hallmarks of vascular disease upon decellularization but support the growth of mesenchymal stem cells[J].Tissue Eng Part A，2014，20（9-10）：1426-1443.

[14] Pereira R F，Halford K W，O'Hara M D，et al.Cultured adherent cells from marrow can serve as long-lasting precursor cells for bone， cartilage， and lung in irradiated mice[J].Proc Natl Acad Sci USA，1995，92（11）：4857-4861.

歲末感言范文第3篇

[關(guān)鍵詞]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；骨組織工程；細(xì)胞膜片；磷酸三鈣

[中圖分類號(hào)]R318[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號(hào)]1008-6455（2011）03-0408-03

Engineering bone tissue using bone marrow mesenchymal stem cell sheet and β-tricalcium phosphate ceramic

MA Dong-yang1,MA Jing2,JIANG Dong-hong3,WANG Jian-feng3

(1.Department of Oral and Maxillofacial Surgery,2. Department of Otolaryngology,3. Department of Medical Administration，Lanzhou General Hospital,Lanzhou Command,PLA,730052,Gansu,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the feasibility of constructing bone tissue using bone marrow mesenchymal stem cell (BMSC) sheet and β-tricalcium phosphate ceramic (TCP).MethodsWe first harvested a cell sheet from rabbit BMSCs using a continuous culture method and a scraping technique. The cell sheet was then wraped around a cylinder of β-TCP. Finally,the constructs were implanted into the subcutaneous pockets of nude mice for in vivo experiments. Gross view and histological examinations were performed to evaluate the harvested specimens. Results The cell sheet, with an average thickness of 158 mm, was composed of multi-layered cells separated in the extracellular matrix. Six weeks after implantation, the new bone tissue was present both on the edge and at the center of the TCP in sheet-TCP group. A layer of woven bone formed in the cell-sheet group. In contrast, the TCP was filled only with fibrous tissue in the TCP group,without evidence of bone formation.ConclusionThe study indicates that the combination of osteogenic BMSC sheet and β-TCP ceramic can engineer bone tissue and the engineered construct might be considered as a promising substitute for bone repair.

Key words:bone mesenchymal stem cell; bone tissue engineering; cell sheet; β-tricalcium phosphate

近年來(lái)，隨著再生醫(yī)學(xué)的迅速發(fā)展，組織工程有望為骨缺損提供理想的修復(fù)方法[1]。組織工程骨的傳統(tǒng)構(gòu)建方法是將具有成骨分化功能的種子細(xì)胞與三維支架材料復(fù)合[1-2]。細(xì)胞在體外擴(kuò)增后常用胰蛋白酶消化成離散細(xì)胞懸液，在此過(guò)程中，細(xì)胞自分泌的細(xì)胞外基質(zhì)、細(xì)胞-基質(zhì)連接、以及細(xì)胞-細(xì)胞連接等結(jié)構(gòu)都被破壞，而這些結(jié)構(gòu)對(duì)于細(xì)胞分化、特異性表型維持、分泌、組織形成等功能非常重要[3]。再者，細(xì)胞與支架材料直接復(fù)合的方法存在細(xì)胞利用率低的缺點(diǎn)[4]。為了解決上述問(wèn)題，我們提出新的組織工程構(gòu)建策略，即應(yīng)用細(xì)胞膜片與可降解的外源性支架材料復(fù)合來(lái)構(gòu)建工程化骨組織。為驗(yàn)證這一構(gòu)想，本研究選用來(lái)源豐富、容易獲取、體外擴(kuò)增速度快、安全實(shí)用性、無(wú)倫理學(xué)爭(zhēng)議的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cell, BMSC)作為種子細(xì)胞來(lái)構(gòu)建細(xì)胞膜片，同時(shí)選擇具有良好的生物相容性、可降解性、與松質(zhì)骨的結(jié)構(gòu)類似的多孔樣磷酸三鈣(β-tricalcium phosphate, TCP)作為支架材料。

1材料和方法

1.1 材料：3月齡成年新西蘭大耳白兔，體重2.6～3.0kg，雌雄不限，由總醫(yī)院動(dòng)物中心提供。6周齡裸鼠(NIH strain, outbred) 購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。DMEM培養(yǎng)基（購(gòu)自Gibco, Invitrogen Corp）；L－谷胺酰胺、地塞米松、抗壞血酸、β-甘油磷酸鈉、胰蛋白酶（均購(gòu)自美國(guó)Sigma公司，胎牛血清(杭州四季青公司)，CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱(Forma公司3110Ⅱ，美國(guó))，倒置顯微鏡及照相系統(tǒng)(Olympas IX71. A21PH, 日本)，離心機(jī)(Heraens Cryofuge 8000, 德國(guó))，一型超凈工作臺(tái)（蘇州凈化設(shè)備廠）。

1.2 方法

1.2.1 兔BMSCs分離、培養(yǎng)、及細(xì)胞膜片構(gòu)建：氯胺酮（10 mg/kg）肌內(nèi)注射麻醉下，切取兔雙側(cè)髂骨并劈開(kāi)，用含200 U/ml肝素的低糖DMEM沖洗髓腔、過(guò)濾骨髓、離心、棄上清、加入含10%胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)液，輕輕吹打成單細(xì)胞懸液，接種到直徑為10cm的普通培養(yǎng)皿里。加入含100 U/ml 青霉素、10%胎牛血清、50mg/L抗壞血酸、0.27g/L L-谷胺酰胺的低糖DMEM，置于37℃、5% CO2的孵箱內(nèi)培養(yǎng)，每隔2天更換培養(yǎng)液一次。當(dāng)細(xì)胞達(dá)90%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化后按1:3 傳代，換成含10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液，90%融合時(shí)再消化，按密度1×105個(gè)/cm2接種到直徑為10cm的培養(yǎng)皿。細(xì)胞融合后，更換為含10%胎牛血清，1×10-7mol/L地塞水松，50mg/L抗壞血酸，10mmol/L β-甘油磷酸鈉的高糖DMEM條件培養(yǎng)液，每隔2 天換培養(yǎng)液1次，經(jīng)2周的連續(xù)培養(yǎng)，用細(xì)胞刮刀由外周向中心沿底壁仔細(xì)刮起，獲得完整的細(xì)胞膜片[5]。

1.2.2 細(xì)胞膜片顯微結(jié)構(gòu)觀察：隨機(jī)選取所獲細(xì)胞膜片，4%多聚甲醛固定，梯度乙醇脫水，常規(guī)石蠟包埋，切成5μm厚切片，蘇木精－伊紅染色（H&E）光鏡下觀察組織結(jié)構(gòu)。部分膜片樣本經(jīng)丙酮固定，鈣鈷法進(jìn)行堿性磷酸酶染色。部分膜片經(jīng)2.5% 戊二醛固定，梯度乙醇脫水，干燥，噴金，掃描電子顯微鏡觀察標(biāo)本表面形貌及層面結(jié)構(gòu)。

1.2.3 體內(nèi)試驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)組將單層細(xì)胞膜片剪切成10mm×25mm的長(zhǎng)方形狀（圖1A），并由一端卷起包裹預(yù)制成的TCP圓柱體（直徑0.8cm，高度1.0cm，70%孔隙率，平均孔徑450± 50μm，圖2A、B），靜置孵育24h后移植到裸鼠背部皮下。作為對(duì)照，相同大小的細(xì)胞膜片和同規(guī)格經(jīng)成骨培養(yǎng)基孵育24h的單純材料也進(jìn)行皮下移植。術(shù)后6周處死動(dòng)物取材，進(jìn)行大體觀察及組織形態(tài)學(xué)分析：①組織學(xué)定性分析：各樣本經(jīng)石蠟包埋、切片后HE及Mallory 三色染色光鏡觀察；②組織學(xué)半定量分析：每組每例樣本連續(xù)4張5μm厚切片，橫貫整個(gè)樣本，Mallory 三色染色后由獨(dú)立的觀察者采用NIH Image J圖像分析系統(tǒng)在10倍鏡下分析切片中骨樣組織（磚紅色）與纖維組織（淡藍(lán)色）所占的面積百分比。每張切片隨機(jī)選取4個(gè)視野，計(jì)量后收集各組數(shù)據(jù)，取其平均值。

2結(jié)果

2.1 膜片的構(gòu)建：融合BMSCs經(jīng)過(guò)2周連續(xù)培養(yǎng)，皿底有透明乳白色薄膜樣物質(zhì)形成，表面散在多個(gè)白色結(jié)節(jié)。用細(xì)胞刮沿皿底輕刮即可使其與培養(yǎng)皿底分離，刮起后膜片自行收縮，具有彈性和較穩(wěn)定的機(jī)械性能，可以用鑷子或血管鉗進(jìn)行鉗夾操作。HE染色，所獲膜片具有類似三維結(jié)構(gòu)，由約8～10層細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)組成，厚度平均158μm （圖1B）。掃描電鏡下觀察：膜片中細(xì)胞被細(xì)胞外基質(zhì)包埋，基質(zhì)表面可見(jiàn)礦化結(jié)節(jié)聚集（圖2C）。

2.2 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)

2.2.1 移植6周后：實(shí)驗(yàn)組和TCP組取材標(biāo)本的形狀與移植前無(wú)明顯變化，但前者表面較硬，容易與周圍軟組織分離，后者表面被覆一層質(zhì)軟的纖維組織，不易分離。膜片組見(jiàn)紙片狀硬質(zhì)組織形成。

2.2.2 組織學(xué)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組的外周表現(xiàn)為礦化程度較高的板層狀骨組織，可見(jiàn)致密骨基質(zhì)、骨陷窩、骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞等結(jié)構(gòu)，材料內(nèi)部的孔隙中央為纖維組織，周邊見(jiàn)低度礦化的小梁骨（圖3A、B、C）。組織定量學(xué)分析，骨與纖維組織的所占面積分別為22.5%和59.6%。單一TCP組孔隙內(nèi)為纖維組織（面積比為76.1%），未見(jiàn)骨或軟骨樣組織。單純膜片組見(jiàn)片狀編織骨形成，致密的骨基質(zhì)中可見(jiàn)類髓腔樣結(jié)構(gòu)（圖3D）。

3討論

本研究證實(shí)了BMSC膜片與多孔TCP支架材料復(fù)合構(gòu)建組織工程骨的可行性。與傳統(tǒng)方法相比，本研究應(yīng)用的構(gòu)建方法具有以下優(yōu)點(diǎn)：①采用物理刮治的方法將體外擴(kuò)增的細(xì)胞連同培養(yǎng)過(guò)程中自分泌的細(xì)胞外基質(zhì)、形成的細(xì)胞基質(zhì)連接一同收集，避免了傳統(tǒng)用胰蛋白酶消化的有創(chuàng)收集方法；②具有較高的細(xì)胞利用率。

細(xì)胞膜片技術(shù)由日科學(xué)家Okano等[6]發(fā)明，他們將溫度敏感性聚合物凝膠涂層于普通培養(yǎng)皿底壁制備出了溫敏性培養(yǎng)皿，在37℃時(shí)聚合物對(duì)其表面擴(kuò)增融合的單層細(xì)胞膜片有絕對(duì)親和性，但降至其臨界溶液溫度32℃以下時(shí)，此聚合物對(duì)單層細(xì)胞膜片的親和性消失，使細(xì)胞膜片自動(dòng)從培養(yǎng)皿底壁釋放。該培養(yǎng)技術(shù)避免了對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳統(tǒng)胰蛋白酶消化等處理，進(jìn)而保留了細(xì)胞自分泌的細(xì)胞外基質(zhì)以及一些重要的細(xì)胞表面蛋白如離子通道、生長(zhǎng)因子受體、細(xì)胞-細(xì)胞連接蛋白。利用此技術(shù)，角膜、皮膚、心肌、肝組織等多種細(xì)胞密集型軟組織已被成功構(gòu)建[3]，但在用于骨組織方面的研究較少。2007年，Zhou等[4]首先報(bào)道用細(xì)胞膜片技術(shù)與復(fù)合離散細(xì)胞懸液的聚合物-陶瓷材料（磷酸三鈣-聚已酸內(nèi)酯復(fù)合物）構(gòu)建出組織工程骨；Gao等[7]則用多層細(xì)胞膜片與管狀珊瑚構(gòu)建出管型骨。Okano等獲取膜片的技術(shù)操作程序較復(fù)雜，而且應(yīng)用溫敏聚合物，可能會(huì)影響細(xì)胞的增殖分化。同時(shí)該技術(shù)獲得的膜片為單層細(xì)胞組成，厚度只有約10μm[8]。相比之下，我們的細(xì)胞膜片獲取方法簡(jiǎn)單易行，無(wú)需特殊材料或者設(shè)備，而且由多層細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)組成，厚度可達(dá)158μm，更像三維結(jié)構(gòu)的組織。另外，一定的厚度賦予了膜片相應(yīng)的彈性和較穩(wěn)定的機(jī)械性能，增加了可操作性。本研究則用單層膜片與已用于臨床的人工骨替代材料TCP復(fù)合。

有趣的是，實(shí)驗(yàn)組中，不僅在支架材料的外周有礦化程度較高的骨組織形成，而且在材料內(nèi)部也可見(jiàn)相當(dāng)數(shù)量的骨小梁。這一結(jié)果表明：作為細(xì)胞釋放載體系統(tǒng)，細(xì)胞膜片可賦予無(wú)機(jī)材料以生物活性。另一個(gè)有趣的結(jié)果是，與單純材料組相比，實(shí)驗(yàn)組材料孔隙結(jié)構(gòu)內(nèi)的纖維組織量較少，意味著細(xì)胞膜片在促進(jìn)成骨的同時(shí)阻止了纖維組織的張入，有望成為新型的具有生物活性的組織引導(dǎo)再生膜。

組織工程骨要取代自體骨移植大范圍應(yīng)用于臨床，首先需要解決大體積支架內(nèi)部細(xì)胞的氧氣、營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)以及代謝產(chǎn)物排泄。種子細(xì)胞在體外依賴于培養(yǎng)介質(zhì)提供營(yíng)養(yǎng)，而植入到體內(nèi)后，如同非血管化的游離骨移植，則需依靠受區(qū)組織液的彌散滲透作用獲得營(yíng)養(yǎng)。然而，理論上體內(nèi)環(huán)境通常所能提供的最大彌散距離是150～200μm，因此大體積復(fù)合物內(nèi)相當(dāng)數(shù)量的細(xì)胞因?yàn)闊o(wú)法獲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并排泄代謝產(chǎn)物而死亡[9-10]。盡管已有諸多方法可促進(jìn)組織工程植入物與宿主血管網(wǎng)的緊密聯(lián)系，提高細(xì)胞成活率和組織修復(fù)功能，但目前為止，任何促進(jìn)血管生長(zhǎng)的方法都需要5～7天以上時(shí)間才能使植入細(xì)胞獲得血液供應(yīng)，在這段時(shí)間內(nèi)，細(xì)胞需從組織液中獲得足夠營(yíng)養(yǎng)[10]。本實(shí)驗(yàn)所應(yīng)用的BMSC膜片厚度為 158μm左右，在有效組織彌散范圍內(nèi)。我們推測(cè)將其植入體內(nèi)后易于成活，有利于提高細(xì)胞治療的效率。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Meijer GJ,de Bruijn JD,Koole R,et al. Cell-based bone tissue engineering[J]. PLoS Med,2007,4(2):e9.

[2]Quarto R,Mastrogiacomo M,Cancedda R,et al. Repair of large bone defects with the use of autologous bone marrow stromal cells[J].N Engl J Med,2001,344(5):385-386.

[3]Yang J,Yamato M, Shimizu T, et al. Reconstruction of functional tissues with cell sheet engineering[J]. Biomaterials,2007,28(34):5033-5043.

[4]Zhou Y,Chen F,Ho ST,et al. Combined marrow stromal cell-sheet techniques and high-strength biodegradable composite scaffolds for engineered functional bone grafts[J]. Biomaterials,2007,28(5):814-824.

[5]Ma D,Ren L,Liu Y,et al. Engineering scaffold-free bone tissue using bone marrow strom cell sheets[J].J Orthop Res,2010,28(5):697-702.

[6]Okano T,Yamada N,Sakai H,et al. A novel recovery system for cultured cells using plasma-treated polystyrene dishes grafted with poly (N-isopropylacrylamide)[J].J Biomed Mater Res,1993,27(10):1243-1251.

[7]Gao Z,Chen F,Zhang J,et al. Vitalisation of tubular coral scaffolds with cell sheets for regeneration of long bones: a preliminary study in nude mice[J].Br J Oral Maxillofac Surg,2009,47:116-122.

[8]Iwata T,Yamato M,Tsuchioka H,et al. Periodontal regeneration with multi-layered periodontal ligament-derived cell sheets in a canine model[J].Biomaterials,2009,14:2716-2723.

[9]Ren LL,Ma DY,Feng X,et al. A novel strategy for prefabrication of large and axially vascularized tissue engineered bone by using an arteriovenous loop[J].Med Hypotheses,2008,71(5):737-740.

歲末感言范文第4篇

這個(gè)下午，我們都在讀雪

入心的柔，熱飲的暖

持續(xù)到傍晚。路燈的

溫和，讓先前撲棱著的

那些鳥(niǎo)兒，安靜地歸巢

小酌。淡雅彌漫著

伸出在窗外。次第

梨花白，一地可愛(ài)的

貓咪。雪守望著幸福

和來(lái)年的春光

春天來(lái)了

下午的陰沉，介于

冷和暖之間，我滯留在

有你的磁場(chǎng)里，水杯

熱度，干冷的空氣

不適宜傳遞。想想夢(mèng)中

那株海棠，花還在枝頭

不曾遠(yuǎn)離的默契

臥龍崗院內(nèi)的銀杏樹(shù)上

親愛(ài)的鴿子，等待著

雪落的消息。我閉上眼

仿佛春就要到來(lái)，一場(chǎng)

獲獎(jiǎng)的感言。季節(jié)

趨于萌動(dòng)，愛(ài)和你

風(fēng)吹的夜晚

不羈的風(fēng)。月亮是夜的

心結(jié)，那只出走的鳥(niǎo)兒

又飛回來(lái)。林子里暗藏著

無(wú)數(shù)的驚嘆和停頓

巢，卻并不適宜做句號(hào)

這就像，你永遠(yuǎn)

也不能看清楚的我

沙子在城市里推磨

河流被光陰逐漸剝離

謎底，一切都離得那么遠(yuǎn)

荊紫關(guān)，土層

呆滯著，我的停頓

走不進(jìn)你的憂傷

密不透風(fēng)的籬笆。油菜花

無(wú)數(shù)的子彈劃過(guò)之后

流星遠(yuǎn)去，這個(gè)角落

更加凄涼黑暗。和你

隔世的眼淚，他們的墓地

以及低垂著的旌幡

發(fā)絲不愿萎縮，一根

捆綁在陽(yáng)光上的哭泣

從荊紫關(guān)的那個(gè)夜晚里

醒來(lái)，風(fēng)掠過(guò)石頭的沉默

鐘聲

重疊覆蓋。隱約聽(tīng)見(jiàn)

鐘聲，迷茫的人決不能

輕易死去，略微衰老

是個(gè)別羽毛，障目的

葉子完全可以舍棄

沒(méi)有理由去懷疑夢(mèng)中

的那片雪花，有佳人

在撫弄，花開(kāi)的聲音

春的咒語(yǔ)就是力量

和勇氣。潮水

泛濫，我沐浴著你

與永偉、江離、羅羽和向威

這首詩(shī)繼續(xù)著它的

滑翔。客從魯山云游而來(lái)

在宛城南關(guān)的古宅

青磚，瓦片。車水馬龍里

詩(shī)性地存在者，撿起

這漸漸遠(yuǎn)去的標(biāo)簽

與江南對(duì)接。賒店的

青花瓷，打開(kāi)煙雨

紫薇花濃，唐朝的夜幕

貝貝、亞刀、青樹(shù)和我

在油田

歲末的暢想 如盤中

堅(jiān)果，五一路上

我和魔頭，不斷地

嗑出問(wèn)號(hào)、驚嘆號(hào)

一地的零落，雪再次

被撕開(kāi)。撒歡兒的啤酒

充當(dāng)下午的句號(hào)

皇帝又著新裝，你我

誰(shuí)也不是神筆馬良

這樣的試探，毫無(wú)意義

虛和實(shí)之間繁生著四季

花開(kāi)花落。依水的蒼茫

熟悉的孤獨(dú)，是我無(wú)數(shù)次

都想砍倒的那些樹(shù)

酒醒的時(shí)候，想起

一個(gè)詞語(yǔ)：徒勞

村口的老榆樹(shù)剛離開(kāi)人世

黑烏鴉就開(kāi)始懷念它

心傷是個(gè)無(wú)人認(rèn)領(lǐng)的孩子

楊柳依依

飽滿的陽(yáng)光，中

楊柳依依。風(fēng)拂弄

壩堤，等待那個(gè)可以

擁你的季節(jié)，雪的冰潔

定會(huì)是一種水柔

心越過(guò)春天，我們信仰

愛(ài)和思念。那團(tuán)火

燃燒在玫瑰的唇紅里

如冷風(fēng)吹滅

張牙舞爪。如你的春天

雪韻尚未展開(kāi)

這個(gè)夜晚燃得很節(jié)制

燭光靠近，淅瀝的雨

敲不開(kāi)眾生的心事

冷風(fēng)吹滅在文化宮

夜，眼角彈淚

散去的是霧霾

啤酒瓶習(xí)慣歪倒

就像總在此時(shí)

難眠的你我

落淚

深深的刺痛，稻草人

這不是雪的一部分

2013的元旦

盆窯，河是用筆畫(huà)出的記憶體

春答應(yīng)了夢(mèng)想

我答應(yīng)了淚水和憂傷

多情的人啊

歲末感言范文第5篇

開(kāi)播式安排在我國(guó)重要的軌道交通裝備高端產(chǎn)品基地，也是該片推出的唯一一家軌道交通制造企業(yè)――中國(guó)北車唐山軌道客車有限責(zé)任公司（以下簡(jiǎn)稱唐車公司）高速動(dòng)車組生產(chǎn)線舉行。宏大的廠房里，停放著唐車公司自主研發(fā)的CRH3A動(dòng)車組、CRH3G動(dòng)車組、石家莊A型地鐵樣車和出口土耳其的100%低地板現(xiàn)代有軌電車。這些軌道交通裝備新產(chǎn)品，代表著我國(guó)軌道裝備制造業(yè)的先進(jìn)水平。

唐車，一個(gè)始建于1881年的百年老廠，何以能領(lǐng)跑世界速度，在新百年的征程上再次煥發(fā)出灼人的青春和活力？唐車公司青年方陣給了我們一個(gè)響亮的回答。

用青春托舉高速動(dòng)車制造技術(shù)平臺(tái)

“能制造350公里高速動(dòng)車的三維流線型司機(jī)室的，全世界只有空客、西門子和我們唐車三家?！?/p>

來(lái)到唐車青年中間，常常能聽(tīng)到血?dú)夥絼偟男』镒?、颯爽英姿的大姑娘說(shuō)出的“該項(xiàng)技術(shù)只有我們擁有”、“這方面我們?cè)趪?guó)際領(lǐng)先”等話語(yǔ)。的確，他們創(chuàng)造了世界軌道交通第一速度，他（她）們有資格自信、自豪。

“靠引進(jìn)、消化、吸收、再創(chuàng)新，到最終擁有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，唐車用5年時(shí)間走完了國(guó)外企業(yè)20年的路，掌握了動(dòng)車組列車的車體總成、總組裝、調(diào)試等動(dòng)車組關(guān)鍵制造技術(shù)?！睘樘岣呒夹g(shù)人員和工人水平，形成再創(chuàng)新的能力，構(gòu)建產(chǎn)品持續(xù)發(fā)展的平臺(tái)，這些年唐車公司共派出90多個(gè)團(tuán)組、1000多人次參加出國(guó)培訓(xùn)，90%都是35歲以下的青年員工。

唐車公司現(xiàn)有員工6700余人，其中35歲以下青年3800余人，團(tuán)員2000余人。

立足時(shí)速350公里CRH3動(dòng)車組生產(chǎn)，唐車公司團(tuán)委按照中央企業(yè)團(tuán)工委和中國(guó)北車集團(tuán)公司團(tuán)委實(shí)施青年創(chuàng)新創(chuàng)效活動(dòng)的總體部署，組織青年員工廣泛開(kāi)展了科技創(chuàng)新、管理創(chuàng)新、操作創(chuàng)新和服務(wù)創(chuàng)新活動(dòng)。近三年來(lái)實(shí)現(xiàn)科技創(chuàng)新成果100多項(xiàng)，管理創(chuàng)新成果200多項(xiàng)，一線技術(shù)工人的操作創(chuàng)新成果近500項(xiàng)。

走進(jìn)唐車公司的生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)，隨處都可看到以操作者名字命名的創(chuàng)新操作法指示牌，一張張青年員工的笑臉就象一朵朵盛開(kāi)的鮮花，在動(dòng)車組生產(chǎn)線上綻放。

CRH3動(dòng)車組已經(jīng)達(dá)到了每秒近百米的運(yùn)行速度，近于“陸地飛行”的狀態(tài)，生產(chǎn)中每一個(gè)細(xì)小的操作失誤，都將對(duì)動(dòng)車組運(yùn)行產(chǎn)生重大影響，產(chǎn)品質(zhì)量必須要有極為可靠的保證。據(jù)測(cè)算，每列CRH3動(dòng)車組需要使用電纜線達(dá)100多種、4萬(wàn)多根，有8萬(wàn)多個(gè)接頭，連在一起將近400公里，相當(dāng)于從北京到鄭州的直線距離。

在電線放線、布線和剪線操作中，青年女工劉莉莉自創(chuàng)了適于動(dòng)車組生產(chǎn)的“劉莉莉剪線法”，匠心獨(dú)具地研制了“過(guò)線架”、“過(guò)線孔細(xì)化板”等工裝，保證纜線不沾地、不糾纏，使電線前端破損率降低為零，提高工作效率一倍以上。在接線工序中，劉莉莉創(chuàng)新發(fā)明的“5步接線操作法”，更是保證接線操作實(shí)現(xiàn)了“萬(wàn)根無(wú)差錯(cuò)”的水平。據(jù)統(tǒng)計(jì)，CRH3動(dòng)車組的組裝接線準(zhǔn)確率達(dá)到了99.997%，創(chuàng)造了同行業(yè)的世界之最。

“世界最先進(jìn)的動(dòng)車組上刻著我們的名字！”

“時(shí)速350公里運(yùn)營(yíng)，世界上沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)。所以，哪怕一個(gè)小小的螺栓，一塊裙板，一根電線，員工生產(chǎn)的每一個(gè)細(xì)小操作都必須一絲不茍的按標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，并記錄在案?！辈坏?0歲的高級(jí)工程師黃烈威說(shuō)。

青年鋁焊工技師殷麗榮說(shuō)：“我們焊的動(dòng)車組，用X光照，也不能找出一個(gè)氣泡，100%沒(méi)有缺陷。我們每個(gè)焊工的鋼印都打在上面。”

“繼續(xù)努力，專注工作”，這是唐車公司“萬(wàn)根接線無(wú)差錯(cuò)”第一人高向麗純樸的獲獎(jiǎng)感言。高向麗是唐車公司總裝配廠一名青年女工，捋線、核線、接線、剝線……她巧手翻飛，在盤根錯(cuò)節(jié)的電纜叢林中把‘剪不斷，理還亂’的電纜編織成一副美麗的畫(huà)卷。她參與了接線工藝流程的標(biāo)準(zhǔn)化設(shè)計(jì)，僅從第一列CRH3動(dòng)車組生產(chǎn)到第14列出廠，就累計(jì)完成了10582根接線無(wú)差錯(cuò)，得到公司嘉獎(jiǎng)。

華燈初上，完成了一天工作的高向麗把寫有自己名字的作業(yè)牌捆扎在綁好的線纜上，記名作業(yè)牌放上去，就再也不會(huì)取下來(lái)了，她的名字將和CRH3動(dòng)車組緊緊綁在一起，飛馳在祖國(guó)的大地上。

接軌世界，普通青工同樣能當(dāng)頂梁柱

要做軌道交通裝備行業(yè)世界級(jí)企業(yè)，需要與世界接軌的各種青年人才。

孫斌斌30出頭，別看她年紀(jì)輕輕，卻是中國(guó)北車資深專家，是唐車公司首批“與世界接軌”的女焊工。這位19歲技校畢業(yè)就進(jìn)工廠當(dāng)焊工的姑娘，近年出國(guó)培訓(xùn)多次，全國(guó)僅有包括她在內(nèi)的兩人通過(guò)歐洲最高級(jí)的7項(xiàng)焊接資格認(rèn)證，具有做“國(guó)際焊接教師”的資格，她的200多名學(xué)生焊接了世界上運(yùn)營(yíng)速度最快的CRH3“和諧號(hào)”動(dòng)車組。