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【摘要】對(duì)具有祛風(fēng)止癢，養(yǎng)血潤(rùn)燥作用的清血糖漿進(jìn)行了相關(guān)的藥，得出其具有以下三方面的作用：(1)穩(wěn)定肥大細(xì)胞膜作用；(2)抗組胺作用；(3)增強(qiáng)紅細(xì)胞清除循環(huán)免疫復(fù)合物的功能。

【關(guān)鍵詞】瘙癢癥；藥理學(xué)；動(dòng)物；實(shí)驗(yàn)

瘙癢是皮膚科許多疾病中常見的伴隨癥狀，引起瘙癢的原因眾多，機(jī)理復(fù)雜，長(zhǎng)期的瘙癢給患者身心帶來了巨大的痛苦，我科室清血糖漿(主要成分：當(dāng)歸、川芎、白芍、生地、防風(fēng)等)以中醫(yī)為基礎(chǔ)，辨病辨證相結(jié)合，根據(jù)實(shí)際臨床觀察，精心研制而成，在和緩解瘙癢癥狀，尤其是血虛風(fēng)燥型瘙癢上取得了明顯的療效［1］。為了進(jìn)一步弄清本藥確切的藥理作用，我們對(duì)清血糖漿進(jìn)行了相關(guān)研究，結(jié)果報(bào)告如下。

1實(shí)驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄皆用，體重18～22g，清潔級(jí)，合格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)字-042，由華中大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，以上動(dòng)物均喂以普通飼料，自由飲水。

1.2試劑與藥物(1)右旋糖酐40：規(guī)格30g/500ml，武漢濱湖雙鶴藥業(yè)有限公司；(2)色甘酸鈉：湖北潛江制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)：030624；(3)卵蛋白：天津東方衛(wèi)生材料廠生產(chǎn)，批號(hào)：031109；(4)百白破疫苗：衛(wèi)生部長(zhǎng)春生物制品研究所生產(chǎn)，批號(hào)：030815-1-4；(5)酵母多糖：由第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海免疫室提供；(6)補(bǔ)體致敏酵母多糖：由第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院免疫室提供；(7)東寶補(bǔ)血膠囊組：通化東寶藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)98090111；(8)清血糖漿：由湖北省中醫(yī)院制劑科提供。

2與結(jié)果

2.1抗血虛實(shí)驗(yàn)

2.1.1血虛動(dòng)物模型的制備按方法操作［2］。

2.1.2方法取10只健康昆明種小鼠，雌雄兼用，作為正常組，給生理鹽水0.5ml/只，灌胃，取50只血虛模型小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照模型組；清血糖漿高、中、低劑量組；東寶補(bǔ)血膠囊對(duì)照組?？瞻讓?duì)照模型組給生理鹽水；清血糖漿高、中、低劑量組按表中劑量給藥，每次灌胃體積均為0.5ml/只；東寶補(bǔ)血膠囊對(duì)照組按3.4g/kg(膠囊粉末)溶解后灌胃，每次灌胃體積均為0.5ml/只。各組每日灌胃一次，連續(xù)7天，第7天小鼠眼眶取血，分別進(jìn)行RBC、WBC計(jì)數(shù)、Hb含量測(cè)定。按酵母菌紅細(xì)胞花環(huán)實(shí)驗(yàn)郭峰法［3］測(cè)定紅細(xì)胞的免疫功能，以一個(gè)紅細(xì)胞結(jié)合上2個(gè)或2個(gè)以上酵母菌為一朵花環(huán)，計(jì)數(shù)200個(gè)RBC，出相應(yīng)的紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率(RBC.C3bR)和紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)率(RBC.ICR)。結(jié)果x±s表示，采用成組t檢驗(yàn)比較組間差異。

2.1.3結(jié)果見表1、2、3。

表1清血糖漿對(duì)失血性小鼠血虛證模型血液學(xué)的(x±s)

注：與正常組相比■P＜0.01；與空白對(duì)照模型組相比★P＜0.01；與空白對(duì)照模型組相比▲P＜0.05

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：模型組在RBC和WBC數(shù)量上及Hb的含量上均顯著性的低于正常組(P＜0.01)，說明造模成功。清血糖漿高、中劑量組能顯著性的提高血虛小鼠的RBC和Hb的含量，其中，高劑量組還能顯著性的提高血虛小鼠WBC的數(shù)量，清血糖漿低劑量組血虛小鼠的RBC、WBC的數(shù)量和Hb的含量與空白對(duì)照模型組差異無顯著性。陽性對(duì)照東寶補(bǔ)血膠囊組能顯著性的提高血虛小鼠的RBC的數(shù)量和Hb的含量，但對(duì)血虛小鼠的WBC的數(shù)量無明顯影響。清血糖漿高劑量組與正常組相比差異存在顯著性。

表2清血糖漿對(duì)失血性小鼠血虛證模型RBC.C3bR的影響(x±s)

注：與正常組相比■P＜0.01；與空白對(duì)照模型組相比★P＜0.01；與正常組相比◆P＜0.05

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：空白對(duì)照模型組與正常組相比差異有顯著性，提示造模成功。清血糖漿高、中劑量組能顯著性的提高血虛小鼠RBC.C3bR，與模型組相比差異有顯著性。而清血糖漿低劑量組無此作用。但清血糖漿高、中、低劑量組在給藥后的RBC.C3bR與正常組相比差異仍有顯著性。

表3清血糖漿對(duì)失血性小鼠血虛證模型對(duì)RBC.ICR的影響（x±s）

注：與正常組相比■P＜0.01；與空白對(duì)照模型組相比★P＜0.01；與正常組相比◆P＞0.05

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：空白對(duì)照模型組與正常組相比差異有顯著性，提示造模成功。清血糖漿高、中劑量組在給藥前后能顯著性的降低血虛小鼠RBC.ICR，與模型組相比差異有顯著性，而清血糖漿低劑量組無此作用。在給藥后，清血糖漿高劑量組與正常組相比無明顯差異(P＞0.05)，而清血糖漿中、低劑量組則與正常組相比有明顯的差異(P＜0.05)。

2.2右旋糖酐所致的小鼠全身瘙癢實(shí)驗(yàn)取50只昆明種小鼠，雌雄兼用，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，清血糖漿高、中、低劑量組，撲爾敏組?？瞻讓?duì)照組、清血糖漿高、中、低劑量組給藥同前；撲爾敏組按1.7mg/kg給藥，使用前用蒸餾水溶解，每次灌胃體積均為0.5ml/只。各組每日灌胃1次，連續(xù)7天。于末次給藥后30min，給各小鼠尾靜脈注射0.025%右旋糖酐0.05ml/10g，以小鼠前爪搔抓頭部，后爪搔抓軀干，嘴咬全身各部位作為瘙癢指針，記錄30min內(nèi)小鼠搔抓的次數(shù)及瘙癢持續(xù)的時(shí)間，以此作為評(píng)價(jià)藥物的止癢作用，各組進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，結(jié)果見表4。

表4清血糖漿對(duì)右旋糖酐所致的小鼠全身瘙癢的止癢作用(x±s)

注：與空白對(duì)照組相比★P＜0.01；與撲爾敏組相比■P＞0.05

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：清血糖漿高、中、低劑量組能夠顯著的減少右旋糖酐所致的小鼠全身瘙癢的次數(shù)及持續(xù)時(shí)間，且表現(xiàn)出了較好的量效關(guān)系。陽性對(duì)照組撲爾敏組也能顯著的減少右旋糖酐所致的小鼠全身瘙癢的次數(shù)及持續(xù)時(shí)間。清血糖漿高、中、低劑量組在減少小鼠全身瘙癢的次數(shù)及持續(xù)時(shí)間方面與撲爾敏組相比在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無明顯差異。

2.3肥大細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

2.3.1分組大鼠50只，隨機(jī)分入空白對(duì)照組，色甘酸鈉組，清血糖漿高、中、低劑量組，每組10只。模型對(duì)照組、色甘酸鈉組給生理鹽水3ml/只灌胃；清血糖漿高、中、低劑量組按表5所示給藥，每次灌胃體積均為3ml/只。各組每日灌胃一次，連續(xù)7天。

2.3.2制備抗血清取4只大鼠，體重150～200g，肌注卵蛋白25mg/kg，同時(shí)腹膜內(nèi)注射免疫佐劑百白破疫苗2×1010個(gè)/只，正常飲食、飲水，12天后眶內(nèi)采血，制備大鼠抗卵蛋白血清，置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.3.3除空白對(duì)照組頭皮下注射生理鹽水外，其余各組均頭皮下注射抗卵蛋白血清1：5稀釋液0.25ml，48h后各組動(dòng)物口服給藥(色甘酸鈉按25mg/kg靜脈給藥)，給藥后50min靜脈注射1%卵蛋白0.5ml，30min后處死大鼠，剝離顱骨置于95%的乙醇中，1h后取出移入無水甲醇中，再用0.18%中性紅染色30min。染色后用鹽水沖洗并剝離骨膜，置于載玻片上封固。光鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)肥大細(xì)胞中脫顆粒的細(xì)胞數(shù)目。

2.3.4結(jié)果見表5。

表5清血糖漿對(duì)大鼠顱骨骨膜肥大細(xì)胞脫顆粒的(x±s)

注：與空白對(duì)照組相比★P＜0.01；與色甘酸鈉組相比■P＜0.01

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：清血糖漿高、中、低劑量組能夠顯著地抑制大鼠顱骨骨膜肥大細(xì)胞脫顆粒，陽性對(duì)照組色甘酸鈉組也表現(xiàn)出了相同的功能。但清血糖漿高、中、低劑量組在抑制大鼠顱骨骨膜肥大細(xì)胞脫顆粒方面與陽性對(duì)照組色甘酸鈉組相比有明顯的差異(P＜0.01)。

3清血糖漿止癢機(jī)理的探討

通過上述實(shí)驗(yàn)表明清血糖漿至少在以下3個(gè)方面阻斷或干擾了瘙癢的產(chǎn)生：(1)穩(wěn)定肥大細(xì)胞膜作用：通過穩(wěn)定肥大細(xì)胞膜抑制肥大細(xì)胞脫顆粒，釋放瘙癢介質(zhì)。(2)抗組胺作用：能夠直接拮抗組胺介導(dǎo)的瘙癢。(3)增強(qiáng)紅細(xì)胞清除循環(huán)免疫復(fù)合物的功能。

臨床上血虛風(fēng)燥型瘙癢患者可表現(xiàn)出紅細(xì)胞免疫學(xué)方面的異常，如陳如泉［4］等對(duì)臨床血虛證患者血液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)血虛證患者的紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率明顯減少，而紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)率則明顯升高，這提示血虛證患者的紅細(xì)胞免疫功能呈低下狀態(tài)，血虛證的病理實(shí)質(zhì)中包含著紅細(xì)胞免疫功能的低下。而本藥能增強(qiáng)紅細(xì)胞清除循環(huán)免疫復(fù)合物的功能，并通過這一機(jī)制減少抗原抗體復(fù)合物的沉積，避免沉積的抗原抗體復(fù)合物激活補(bǔ)體釋放過敏毒素(如C3a、C4a、C5a)作用于肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞上的相應(yīng)受體，促使其脫顆粒，釋放瘙癢介質(zhì)，而誘發(fā)或加重瘙癢。這應(yīng)該是本藥對(duì)血虛風(fēng)燥型瘙癢療效突出的一個(gè)重要原因。

綜上所述，本藥具有抗變態(tài)反應(yīng)，增強(qiáng)紅細(xì)胞免疫功能，能多途徑、多靶點(diǎn)的發(fā)揮止癢作用，與單純抗組胺藥相比，本藥具有更加強(qiáng)大的止癢作用，且本藥還能提高血虛小鼠的RBC、WBC的數(shù)量，Hb的含量，這可能在改善皮膚的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，促進(jìn)皮膚功能的恢復(fù)方面也發(fā)揮了一定的作用。

【】

1王玉英.清血合劑皮膚瘙癢的臨床觀察.湖北中醫(yī)雜志，2003，25(3)：29.

2陳奇.中藥藥理研究方法學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版社，1994，1010.

3郭峰.紅細(xì)胞免疫及其調(diào)節(jié)功能測(cè)定方法.免疫學(xué)雜志，1990，6(1)：60.

4陳如泉.血虛證的臨床及實(shí)驗(yàn)研究探討.中西醫(yī)結(jié)合雜志，2001，21(6)：473.