前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇蛋白酶體范文，相信會為您的寫作帶來幫助，發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。

蛋白酶體范文第1篇

【關鍵詞】 類風濕關節(jié)炎；20S蛋白酶體；泛素-蛋白酶體途徑；炎癥

類風濕關節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis ，RA）是一種以對稱性、侵蝕性關節(jié)滑膜炎為特征的慢性、系統(tǒng)性自身免疫疾病， 炎癥為RA發(fā)病機制的中心環(huán)節(jié)。泛素-蛋白酶體途徑（ubiquitin-proteasome pathway ， UPP）是真核細胞內重要的非溶酶體蛋白降解途徑， 20S蛋白酶體是UPP中具有蛋白酶催化活性的核心顆粒。UPP通過調控多種炎癥調節(jié)蛋白， 在炎癥過程中發(fā)揮著重要作用[1]。研究顯示RA患者血清蛋白酶體及其自身抗體濃度升高， 蛋白酶體抑制劑可緩解關節(jié)炎大鼠病情進展[2]， 提示蛋白酶體參與了RA的發(fā)生、發(fā)展。關節(jié)滑膜中炎癥浸潤細胞主要來源于外周血細胞[3]， 循環(huán)單核細胞在RA發(fā)病機制中具重要作用[4，5]。RA患者外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cell， PBMC）是否存在蛋白酶體表達及功能異常目前尚未見報道， 本課題通過檢測RA患者20S蛋白酶體蛋白表達水平， 對該問題進行了初步探討。

1 研究對象與方法

1. 1 研究對象 臨床確診的RA患者30例， 來自西安交通大學第一附屬醫(yī)院風濕科住院患者， RA診斷參照1987年美國風濕病協(xié)會分類診斷標準。健康對照28例， 來自西安交通大學第一附屬醫(yī)院體檢中心健康體檢人員， 排除自身免疫病性疾病。兩組研究對象均排除心、腦、肝、腎疾??；急、慢性感染；惡性腫瘤等疾病。

1. 2 研究方法

1. 2. 1 一般臨床資料 記錄所有研究對象性別、年齡， RA患者記錄病程， 檢測類風濕因子、C-反應蛋白（C-reactive protein， CRP）、紅細胞沉降率（ehythrocyte sedimention rate， ESR）、自身抗體， 計算發(fā)病時的疾病活動性評分DAS28。

1. 2. 2 PBMC的分離與純化 取受試者空腹外周靜脈血5 ml， 加肝素鈉抗凝（3.8 μl/ml）。采用淋巴細胞分離液（上海華精）密度梯度法分離PBMC。

1. 2. 3 20S蛋白酶體C2亞基蛋白表達測定 采用Western印跡法測定PBMC中20S蛋白酶體C2亞基蛋白表達水平。RIPA裂解液裂解PBMC， 吸取上清液獲細胞蛋白裂解液。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳， 電轉印至NC膜。5%BSA封閉液， 37℃封閉NC膜1 h。分別加入稀釋的一抗：proteasome 20S C2 Rabbit Ab （1：1000， Abcam）， Rabbit Anti-β-actin（1：400， 北京博奧森）， 4℃過夜。TBST洗膜5 min×3次， 加入稀釋的辣根過氧化物酶標記的山羊抗兔IgG（1：8000， 北京博奧森）， 37℃孵育2 h。TBST洗膜5 min×3次。等比例混合ECL發(fā)光液（Pierce Biotechnology）， NC膜孵育5 min， 曝光， 凝膠成像分析系統(tǒng)成像保存。所得圖像導入Quantity One生物醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)進行圖像分析處理， 蛋白含量以條帶的積分光密度值表示。目的條帶和內參照β-actin條帶IOD值的比值為目的片段的光密度比值， 表示檢測蛋白的相對表達量。

1. 2. 4 統(tǒng)計學方法 計量資料以均數(shù) ± 標準差（ x-±s）表示， 正態(tài)分布資料兩組間差異采用獨立樣本 t檢驗， 兩變量相關分析采用Pearson相關分析。非正態(tài)分布資料采用秩和檢驗， 兩變量相關分析采用Spearman秩相關分析。所有數(shù)據(jù)處理采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件， P

2 結果

2. 1 一般臨床資料 RA患者30例（男性3例， 女性27例）， 年齡 （46.67±11.97）歲， 病程（6.96±3.65）年， ESR （50.55±35.02）mm/h， CRP （27.82±23.10 ）mg/L， RF （90.72±74.60 ）IU/ml， DAS28評分（4.89±1.60）。健康對照30例（男性5例， 女性23例）， 年齡 （41.04±11.17）歲。RA與正常對照之間年齡差異無統(tǒng)計學意義。

2. 2 20S蛋白酶體C2亞基蛋白表達 20S蛋白酶體C2亞基蛋白表達水平用Western-Blot灰度值表示（圖1）。RA患者PBMC中20S蛋白酶體C2亞基表達水平高于正常對照組[（2.92±1.41） VS （0.65±0.42）， P

2. 3 相關性分析 分別對RA患者20S蛋白酶體C2亞基表達與DAS28、CRP、ERS指標進行相關性分析， 結果顯示RA患者蛋白酶體C2亞基表達水平與DAS28、CRP、ERS之間無顯著相關性。

3 討論

UPP是真核生物細胞中一種高效的蛋白分解途徑， 具廣泛的生物學作用。蛋白酶體是依賴ATP的蛋白水解酶復合物， 是真核細胞中分解內源性蛋白質的主要酶系統(tǒng)， 也是UPP的核心部分。蛋白酶體由20S蛋白酶體和調節(jié)顆粒組成， 主要降解一些短壽命的蛋白、變性蛋白、癌基因產物蛋白等， 對維持細胞穩(wěn)態(tài)和生物學效應起到了重要作用， 也參與了免疫炎癥反應的調節(jié)[1]。

UPP與疾病關系的探討是目前研究的熱點， 其功能異常與多種人類疾病相關， 包括自身免疫病和炎癥[6]。研究發(fā)現(xiàn)， 在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、原發(fā)性干燥綜合癥（PSS）、強直性脊柱炎（AS）、類風濕性關節(jié)炎（RA）、多發(fā)性肌炎/皮肌炎（PM/DM）等多種結締組織病中存在著蛋白酶體的異常[7， 8]。上述研究主要集中在血清蛋白酶體或其抗體的檢測。

RA關節(jié)滑膜中炎癥浸潤細胞主要來源于外周血白細胞， PBMC可反映整體的炎癥狀態(tài)[9]， 而UPP通過調控多種炎癥調節(jié)蛋白在炎癥過程中發(fā)揮著重要作用。因此， 觀察RA患者PBMC中蛋白酶體的變化對于探討蛋白酶體在RA 發(fā)病機制的作用具有重要意義。本研究首次發(fā)現(xiàn)RA患者PBMC中20S蛋白酶體C2亞基表達水平顯著高于正常人群， 具統(tǒng)計學差異。該結果進一步證實了蛋白酶體與RA的發(fā)生具有密切聯(lián)系， 但其在RA發(fā)病機制中的具體作用還有待進一步研究。

隨著對UPP病理生理作用的深入研究， 蛋白酶體抑制劑的臨床應用和開發(fā)受到日益重視。蛋白酶體抑制劑bortezomib已經用于對多發(fā)性骨髓瘤的臨床治療， 并顯示了其有效性?；诘鞍酌阁w抑制劑強大的抗炎、抑制細胞增殖及促進凋亡的作用， 有學者提出其在RA等炎性疾病的治療中具有良好的應用前景[2， 5]。體外和動物實驗證實蛋白酶體抑制劑可抑制活化的T細胞釋放炎癥因子[10]緩解關節(jié)炎大鼠的病情進展[2]， 但是否可真正應用于臨床患者還需要大量的研究。本研究為應用蛋白酶體抑制劑治療RA提供了一定的理論依據(jù)。

參考文獻

[1] Saeki Y，Tanaka K.Assembly and function of the proteasome.Methods Mol Biol， 2012，832：315-337.

[2] Kisselev F， van der Linden WA， Overkleeft HS. Proteasome inhibitors： an expanding army attacking a unique target. Chem Biol， 2012， 19（1）：99-115.

[3] Gorman CL， Cope AP. Immune-mediated pathways in chronic inflammatory arthritis. Best Pract Res Clin Rheumatol， 2008， 22（2）：221-238.

[4] Dichamp I，Bourgeois A，Dirand C，et al. Increased nuclear factor-kappaB activation in peripheral blood monocytes of patients with rheumatoid arthritis is mediated primarily by tumor necrosis factor-alpha. J Rheumatol， 2007，34（10）：1976-1983.

[5] Brun J.Proteasome inhibition as a novel therapy in treating rheumatoid arthritis. Med Hypotheses， 2008，71（1）：65-72.

[6] Wang JS，Maldonado MA.The ubiquitin-ptoteasome system and its role in inflammatory and autoimmune diseases. Cell Mol Immunol， 2006， 3 （4）：255-261.

[7] Scheffler S，Kuckelkorn U，Egerer K，et al.Autoimmune reactivity against the 20S-proteasome includes immunosubunits LMP2 （b1i）， MECL1 （b2i） and LMP7 （b5i）. Rheumatology， 2008，47（5）：622-626.

[8] Majetschak M，Perez M，Sorell LT，et al.Circulating 20S proteasome levels in patients with mixed connective tissue disease and systemic lupus erythematosus. Clin Vaccine Immunol， 2008， 15（9）：1489- 1493.

蛋白酶體范文第2篇

[關鍵詞]Ⅰ型血小板結合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶；多配體蛋白聚糖；損傷愈合；牙周組織

[中圖分類號]Q 51[文獻標志碼]A[doi]10.3969/j.issn.1673-5749.2012.01.027

Role of syndecan -4 and a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif -1 in wound healingQin Yanyan, Wang Dan, Lin Chongtao.（Dept. of Periodontics, Hospital of Stomatology, Jilin University, Changchun 130021, China）

[Abstract]Syndecan-4, a newly discovered peptide, which distributes in many tissues, mediates a variety of physiological responses. A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif-1（ADAMTS-1）, a novel metalloproteinase, is widely expressed in mammals and invertebrates cells. ADAMTS-1 plays a key role in physiology and pathology process such as maintaining coagulation system steady, organ formation, inflammation, reproduction. Many studies have shown that syndecan-4 and ADAMTS-1 are involved in the wound healing, and found that ADAMTS-1 is uniquely cleave the transmembrane proteoglycan syndecan-4. This review is about the structure, properties of the syndecan-4 and ADAMTS-1, and the role of them in wound healing. The purpose is to provide a theoretical basis for periodontal regeneration.

[Key words]a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif；syndecan；wound healing；periodontal tissue

組織的損傷愈合，伴隨著基質的合成和降解。組織損傷之后，局部釋放的大量的多配體蛋白聚糖，調控著細胞與細胞外基質（extracellular matrix，ECM）、細胞與細胞間的信號交流，介導成纖維細胞的增殖和遷移，促進傷口愈合[1]。降解ECM的蛋白酶在組織的損傷愈合過程中也起著關鍵性的作用。迄今為止，多配體蛋白聚糖-4和Ⅰ型血小板結合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif，ADAMTS）-1在創(chuàng)傷愈合過程中的作用備受關注。

1多配體蛋白聚糖

1.1多配體聚糖家族的結構和性質

多配體蛋白聚糖與硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（heparan sulfate proteoglycans，HSPG）屬同一家族成員，亦由核心蛋白和糖胺聚糖側鏈組成。多配體蛋白聚糖屬于跨膜蛋白聚糖，其核心蛋白由N-末端的胞外區(qū)以及C-末端的胞內區(qū)和跨膜區(qū)組成。N-末端的胞外區(qū)除與葡糖氨鏈、硫酸軟骨素和硫酸肝素連接之外，還可以與堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）或者其他生長因子相結合，從而活化細胞表面的HSPG，促進細胞的分裂增生。C-末端的胞內區(qū)和跨膜區(qū)含有4個酪氨酸殘端，這些是磷酸化位點。多配體蛋白聚糖的胞外區(qū)是其功能結構區(qū)，易變化，而胞內區(qū)和跨膜區(qū)高度保守。胞內區(qū)主要與細胞骨架中含肌動蛋白的微絲結合，參與細胞的移動和黏附過程[2]。多配體蛋白聚糖家族有1～4個成員，多配體蛋白聚糖-4分布廣泛，而多配體蛋白聚糖-1、2、3分別主要分布于上皮細胞、成纖維細胞和神經細胞[3]。

多配體蛋白聚糖通過硫酸肝素鏈（heparan sulfate，HS）與多種細胞外配體相互作用，如多肽生長因子、ECM和蛋白質水解酶等[4]。HS可為多配體蛋白聚糖與細胞外配體結合提供多個結合位點[5]，故通過HS，多配體蛋白聚糖可直接參與多種生理過程。

多配體蛋白聚糖在近質膜區(qū)有一酶切位點，在ECM酶的作用下使胞外區(qū)從細胞表面脫落[6]。胞外區(qū)的脫落是所有多配體蛋白聚糖正常生理活動的一部分。組織損傷后，上皮細胞、內皮細胞和成纖維細胞內多配體蛋白聚糖表達增加[7]。在組織損傷液中，多配體蛋白聚糖的胞外區(qū)脫落量增加[8]。敲除多配體蛋白聚糖基因的小鼠，其傷口不愈合或延遲[9]。由此可見，多配體蛋白聚糖在創(chuàng)傷愈合過程中起著非常重要的作用。

1.2多配體蛋白聚糖-4的結構和性質

多配體蛋白聚糖-4是一種跨膜蛋白聚糖，屬于多配體蛋白聚糖家族成員，廣泛存在于多系統(tǒng)組織細胞中，調控著多種生物學效應，在細胞表面的信號轉導系統(tǒng)和控制細胞行為方面都起著重要的作用。譬如，在細胞與細胞間的相互作用、細胞與基質間的相互作用以及細胞支持、黏附、增殖、遷移、分化和形態(tài)形成方面皆起著重要的作用。左琦等[10]發(fā)現(xiàn)，多配體蛋白聚糖-4的表達在炎癥反應、創(chuàng)傷愈合以及多種疾病狀態(tài)中可出現(xiàn)變化。

1.2.1多配體蛋白聚糖-4的結構多配體蛋白聚糖-4為4個獨立基因編碼的具有組織特異性分布的Ⅰ型整合膜蛋白，相對分子質量約為2.4×104，含197個氨基酸序列，由一條長的無分支的糖胺聚糖（glycosaminoglycan，GAG）鏈與核心蛋白通過共價鍵連接。多配體蛋白聚糖-4為單鏈結構，由一個N-末端功能區(qū)，疏水的跨膜區(qū)和短的細胞內的C-末端構成。

1.2.1.1多配體蛋白聚糖-4的細胞外功能區(qū)多配體蛋白聚糖-4的N-末端為細胞外功能區(qū)，是 GAG附著處，可與多種胞外基質配體結合。多配體蛋白聚糖-4不僅能夠和許多潛在的配體，包括生長因子和ECM等相互作用，其核心蛋白還可直接參與蛋白質-蛋白質之間相互作用。

1.2.1.2多配體蛋白聚糖-4的跨膜區(qū)和胞內區(qū)多配體蛋白聚糖-4的跨膜區(qū)與其他多配體蛋白聚糖相似且高度保守，可與其他的胞膜組分相互作用，特異性地參與細胞的二聚化作用。多配體蛋白聚糖-4的胞內區(qū)短而且序列固定，可以分為近膜區(qū)域（C1區(qū)）、遠膜區(qū)（C2區(qū)）和可變區(qū)（Ⅴ區(qū)）。其中，C1區(qū)與多配體蛋白聚糖-4的二聚化作用與細胞內蛋白質的結合有關。C2區(qū)可與突觸后密集區(qū)-95/盤大蛋白/密閉小帶-1（postsynaptic density-95/disc large protein/zonula occluden-1，PDZ）結構域相互作用。位于C1區(qū)與C2區(qū)之間的Ⅴ區(qū)則有高度的特異性，可特異性地結合磷脂酰肌醇磷酸-2和蛋白激酶C，對其參與的寡聚化作用有著重要的影響[10-12]。

1.2.2多配體蛋白聚糖-4的性質在損傷組織中，成纖維細胞和內皮細胞高度表達多配體蛋白聚糖-4和1，傷口滲出液中也存在著這兩種分子的可溶性胞外成分。多配體蛋白聚糖-4和1可作為諸多細胞因子的結合位點，對傷口修復進行調控。其中，多配體蛋白聚糖-4作用更突出，多配體蛋白聚糖-4通過GAG與纖連蛋白的肝素結合點相互作用，影響?zhàn)じ接诶w連蛋白上的成纖維細胞的遷移和基質的沉著，促成纖維細胞反應最優(yōu)化，有利于傷口愈合更佳[1，13]。

當組織修復發(fā)生變異時，多配體蛋白聚糖家族表達常發(fā)生改變。不表達多配體蛋白聚糖-4鼠出現(xiàn)愈合受損。在瘢痕組織中，多配體蛋白聚糖-4的表達高于其周圍正常皮膚組織。多配體蛋白聚糖-1表達缺失或減少，可能使細胞的生長和分化發(fā)生紊亂，導致成纖維細胞大量增殖[1]。

2ADAMTS-1

2.1ADAMTS-1家族

ADAMTS-1是一類新的鋅離子依賴性的金屬蛋白酶家族，廣泛地存在于哺乳動物和無脊椎動物身體之內。ADAMTS家族共有19個成員，在保持凝血系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)、器官生成、炎癥和生育能力方面起著重要的作用。ADAMTS與基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）、Ⅰ型解聚蛋白和金屬蛋白酶（a disintegrin and metalloprotei-nase，ADAM）同屬金屬蛋白酶家族，但在結構組成、組織細胞分布、底物作用的特異性和酶活性的調節(jié)方面，三者間有明顯的差別[14]。

2.2ADAMTS-1的結構和性質

ADAMTS-1定位于人類染色體21q21～q22，其功能蛋白包括前金屬蛋白酶、金屬蛋白酶、解聚蛋白樣結構域以及血小板反應蛋白（thrombospondin，TSP）-Ⅰ同源域、間隔區(qū)和C-末端TSP亞基。ADAMTS-1是ADAMTS金屬蛋白酶家族的第一個成員，與家族其他蛋白一樣具有血小板反應蛋白基序，能與ECM結合，因此ADAMTS-1可分泌到ECM中并與之結合，從而參與ECM蛋白的調節(jié)[15]。ADAMTS-1的表達受諸因素影響：致炎細胞因子腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-1β和內毒素均可誘導其表達，轉化生長因子-2β則可下調其表達[14]。

ADAMTS-1與HS結合之后加速腫瘤轉移[16]。Krampert等[17]在研究中發(fā)現(xiàn)：在損傷的皮膚組織中，ADAMTS-1的質量濃度增高；ADAMTS-1在損傷愈合的早期由巨噬細胞分泌，后期由成纖維細胞和上皮細胞分泌；ADAMTS-1在高質量時與bFGF結合，干擾其信號傳遞并抑制細胞遷移；在糖尿病小鼠模型損傷組織中，ADAMTS-1的質量濃度增加更加明顯，可能與糖尿病患者傷口不易愈合有關。

2.3ADAMTS-1的功能

1）ADAMTS-1為分泌型蛋白：ADAMTS-1可通過降解ECM蛋白，例如多能聚糖、短蛋白聚糖、聚集蛋白聚糖參與多種生理和病理生理過程；2）ADAMTS-1的抑制血管新生功能：A－DATMS-1可通過抑制血管的生成，參與抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展；3）DMATS-1的雙重功能：在皮膚損傷愈合的過程中，ADMATS-1在低水平時可以通過降解基質蛋白促進內皮和成纖維細胞遷移，其高表達時則結合到成纖維細胞生長因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）-2，抑制內皮細胞和成纖維細胞的遷移[17]。

3多配體蛋白聚糖-4與ADAMTS-1

膜相關的金屬蛋白酶與多配體聚糖-1、4的脫落有關[6]，MMP-7和膜型-1-基質金屬蛋白酶與多配體聚糖-1的脫落有關[18]。除了MMP，ADAM家族也同樣地參與多配體聚糖胞外區(qū)的脫落[19]。ADAMTS家族是與多配體聚糖-4胞外區(qū)脫落有關的酶，ADAMTS-1特異性地作用于多配體蛋聚糖-4，使其胞外區(qū)脫落[20]。這種脫落過程與經激動劑作用脫落的方式相似，可被細胞密度誘導且與細胞密度成正相關。跨膜蛋白胞外區(qū)脫落有助于維持ECM的平衡，可提供液態(tài)的生理活性因子，誘導細胞行為發(fā)生重要變化。

4多配體蛋白聚糖-4與牙周組織

多配體蛋白聚糖是FGF的輔助受體，可令FGF在局部高質量濃度聚集，促進FGF受體二聚化，隨后受體的胞內區(qū)發(fā)生自磷酸化。這個過程將引起信號級聯(lián)反應，信號傳到細胞核激活基因的表達。bFGF生物學效應受多配體蛋白聚糖-4的控制，多配體蛋白聚糖-4的過表達能夠加強bFGF的信號傳導，而且增強牙周膜細胞（periodontal ligament cell，PDLC）對bFGF的反應，促進其細胞的增殖和遷移[21-22]。

Shimabukuro等[3]發(fā)現(xiàn)在含bFGF的人PDLC培養(yǎng)液中，多配體蛋白聚糖-4的質量分數(shù)明顯增加，細胞表面的多配體蛋白聚糖-4明顯減少，多配體蛋白聚糖-4的mRNA無明顯變化，多配體蛋白聚糖合成酶的量未增加，多配體蛋白聚糖-1、2、3未出現(xiàn)有意義的變化。他們認為，bFGF促進PDLC的增殖和遷移與多配體蛋白聚糖-4關系密切，且培養(yǎng)液中增多的多配體蛋白聚糖-4是細胞表面脫落造成的，但是其機制尚不清楚。有關ADAMTS-1是否參與了PDLC表面多配體蛋白聚糖-4的脫落，國內外尚未見報道。

5結束語

目前，多配體蛋白聚糖-4和ADAMTS-1的研究方興未艾，但其在組織損傷修復中的具體功能及相互作用尚不清楚。隨著對多配體蛋白聚糖-4和ADAMTS-1研究的進一步深入，把多配體蛋白聚糖-4和ADAMTS-1引入牙周組織的修復再生中，將為探究bFGF促進PDLC增殖和遷移的機制提供新的思路和楔入點。

6參考文獻

[1]姜育智,邢新.多配體蛋白聚糖在創(chuàng)傷性愈合和病理性瘢痕中的作用[J].醫(yī)學綜述, 2006, 12（11）：658-659.

[2]程波,劉榮卿.蛋白聚糖在毛囊生長發(fā)育中的作用[J].國外醫(yī)學皮膚性病學分冊, 2001, 27（1）：22-23.

[3]Shimabukuro Y, Ichikawa T, Terashima Y, et al. Basic fibroblast growth factor regulates expression of heparin sulfate in human periodontal ligament cells[J]. Matrix Biol, 2008, 27（3）：232-241.

[4]Reizes O, Benoit SC, Clegg DJ. The role of syndecans in the regulation of body weight and synaptic plasticity[J]. Int J Biochem Cell Biol, 2008, 40（1）：28-45.

[5]Kreuger J, Spillmann D, Li JP, et al. Interactions between heparan sulfate and proteins：The concept of specificity[J]. J Cell Biol, 2006, 174（3）：323-327.

[6]Fitzgerald ML, Wang Z, Park PW, et al. Shedding of syndecan-1 and -4 ectodomains is regulated by multiple signaling pathways and mediated by a TIMP-3-sensitive metalloproteinase[J]. J Cell Biol, 2000, 148（4）：811-824.

[7]Elenius K, Paul S, Allison G, et al. Activation of HER4 by heparin -binding EGF -like growth factor stimulates chemotaxis but not proliferation[J]. EMBO J, 1997, 16（6）：1268-1278.

[8]Park PW, Pier GB, Preston MJ, et al. Syndecan-1 shedding is enhanced by LasA, a secreted virulence factor of Pseudomonas aeruginosa[J]. J Biol Chem, 2000, 275（5）：3057-3064.

[9]Stepp MA, Gibson HE, Gala PH, et al. Defects in keratinocyte activation during wound healing in the syndecan-1-deficient mouse[J]. J Cell Sci, 2002, 115（Pt 23）：4517-4531.

[10]左琦,歐陽平. Syndecan-4與動脈粥樣硬化[J].廣東醫(yī)學, 2008, 29（5）：869-871.

[11]Deepa SS, Yamada S, Zako M, et al. Chondroitin sulfate chains on syndecan-1 and syndecan-4 from normal murine mammary gland epithelial cells are structurally and functionally distinct and cooperate with heparin sulfate chains to bind growth factors. A novel function to control binding of midkine, pleiotrophin, and basic fibroblast growth factor[J]. J Biol Chem, 2004, 279（36）：37368-37376.

[12]Tkachenko E, Elfenbein A, Tirziu D, et al. Syndecan-4 clustering induces cell migration in a PDZ -dependent manner[J]. Circ Res, 2006, 98（11）：1398-1404.

[13]Tanaka Y, Kimata K, Wake A, et al. Heparan sulfate proteoglycan on leukemic cells is primarily involved in integrin triggering and its mediated adhesion to endothelial cells[J]. J Exp Med, 1996, 184（5）：1987-1997.

[14]王利,王憲,孔煒.新型金屬蛋白酶ADAMTS家族的研究進展[J].生理科學進展, 2008, 39（1）：49-52.

[15]申鍔,陳瑞珍,楊英珍,等. ADAMTS-1的基礎研究與臨床意義[J].國際病理科學與臨床雜志, 2006, 26（1）：29-34.

[16]Liu YJ, Xu Y, Yu Q. Full-length ADAMTS-1 and the ADAMTS-1 fragments display pro- and antimetastatic activity, respectively[J]. Oncogene, 2006, 25（17）：2452-2467.

[17]Krampert M, Kuenzle S, Thai SN, et al. ADAMTS1 proteinase is up-regulated in wounded skin and regulates migration of fibroblasts and endothelial cells[J]. J Biol Chem, 2005, 280（25）：23844-23852.

[18]Ding K, Lopez-Burks M, Sánchez-Duran JA, et al. Growth factor-induced shedding of syndecan-1 confers glypican-1 dependence on mitogenic responses of cancer cells[J]. J Cell Biol, 2005, 171（4）：729-738.

[19]Edwards DR, Handsley MM, Pennington CJ. The ADAM metalloproteinases[J]. Mol Aspects Med, 2008, 29（5）：258-289.

[20]Rodríguez-Manzaneque JC, Carpizo D, Plaza-Calonge Mdel C, et al. Cleavage of syndecan-4 by ADAMTS1 provokes defects in adhesion[J]. Int J Biochem Cell Biol, 2009, 41（4）：800-810.

蛋白酶體范文第3篇

目的考察中性蛋白復合酶法提取大棗多糖的工藝，并驗證大棗多糖的部分藥理作用。方法對不同提取方法作對比；以多糖的得率和純度為指標，對效果較佳的中性蛋白復合酶提法安排正交實驗，篩選提取工藝；最后進行動物實驗。結果確定中性蛋白復合酶法提取的最佳工藝為：酶液濃度0.15%，pH 7.5，提取溫度37℃；大棗多糖的藥理實驗表明大棗多糖屬無毒級，大棗多糖大、中、小劑量對S180小鼠巨噬細胞吞噬率均有不同程度的提高作用。結論中性蛋白復合酶法提取大棗多糖工藝有效可行。

【關鍵詞】 大棗多糖； 中性蛋白復合酶 ； 提?。?藥理實驗

Abstract：ObjectiveTo study the extraction technology for polysaccharide by compound neutral protease from Ziziphus jujuba， and to test the pharmacological function of the polysaccharide .MethodsDifferent methods of polysaccharide extraction were compared .As for the best method ，the compound neutral protease extraction ， the orthogonal experiments were established to hunt its technology. Finally， the pharmacological experiments were carried out. ResultsThe optimum conditions were to add 0.15% neutral protease on the pH of 7.5 with 37℃. The ultimate pharmacologic experiments about Zizyphus jujuba polysaccharide showed that it had no toxicity and it could elevate the macrophage phagocytosis of S180 tumor mice.ConclusionThe way of the compound neutral protease extraction is effective and reasonable .

Key words：Jujuba polysaccharide; Compound neutral protease ; Extraction; Pharmacology experiment

大棗為鼠李科植物棗Zizyphus jujuba Mill 的成熟果實［1］，營養(yǎng)豐富，是傳統(tǒng)的中藥，其主要成分有多糖，蛋白質，氨基酸，維生素，生物堿，皂苷及礦物質等［2］。多糖能提高機體的免疫功能，是理想的免疫增強劑，同時對正常細胞沒有毒副作用［3］。從大棗中提取多糖及其藥理作用研究已有文獻報道［4，5］。

傳統(tǒng)高溫水提法易造成大棗多糖的生物活性降低，而且能耗大；溶劑萃取法則存在溶劑使用成本高，回收困難及產品溶劑殘留等問題。大多數(shù)含有豐富多糖的植物，細胞粗大且壁厚，使得多糖難以從細胞中擴散出來，采用復合酶協(xié)同作用于植物提取過程，可以促進多糖的溶出，過程條件溫和，目標產物活性高，極大地提高多糖的提取率以及純度［6］。

大棗中的蛋白質對大棗多糖的提取分離造成一定的影響，大棗多糖普遍存在于原生質中，而原生質又處于細胞壁和細胞間質的包裹下，鑒于這些特點，若選用含有蛋白酶、纖維素酶、果膠酶的復合酶液來參與反應，就可以減少傳質阻力，提高有效成分的提取率。

1 器材與方法

1.1 材料 大棗購于陜北延安市場，選用質地優(yōu)良的干品粉碎。

1.2 試劑 中性蛋白復合酶液，酶活2 500 u·g-1，酶液中含有少量纖維素酶、淀粉酶，由寧夏夏盛實業(yè)集團有限公司提供。

1.3 儀器DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器：鞏義市英峪予華儀器廠；LD4-2低速離心機：北京低速離心機廠；722型可見光分光光度計：上海第三分析儀器廠；HI 98107 酸堿度測試筆：美國哈納儀器公司；RE-52AA旋轉蒸發(fā)儀器：上海嘉鵬科技公司；DZF-6020型真空干燥箱：上海精宏實驗設備有限公司。

1.4 分析方法多糖檢測方法為苯酚硫酸法；數(shù)據(jù)處理法為加權平均法。

2 結果

2.1 不同提取方法的對比因為不同溶劑對大棗實體及其多糖的作用不同，所以用不同溶劑進行提取具有不同的結果。定量稱取烘干棗粉20 g，采用添加總質量濃度1%果膠酶復合液（pH為7），纖維素復合酶液（pH為7），中性蛋白復合酶液（pH為7），40℃下提取2 h，共進行兩次提取，并以傳統(tǒng)水提法為參照，確立最佳提取方法，結果見表1。

表1 不同提取液的提取結果（略）

由提取結果可看出，果膠復合酶，纖維素復合酶參與提取與傳統(tǒng)水提相比效果不是很顯著，果膠酶得到較好的得率，但純度反而下降，就是因為果膠酶在水解大棗中果膠質的同時又進而水解掉一部分多糖。而纖維素酶則在水解大棗纖維素使其結構變得松散的同時又直接將大棗中的糖蛋白和蛋白聚糖水解掉，直接導致得率下降。因此在大棗多糖提取中主要應用以上兩種酶時并不能達到預期效果。中性蛋白復合酶參與提取效果顯著，主要是因為中性蛋白酶對大棗中的游離蛋白質具有水解作用，且目標性強。鑒于上結果，本研究采用中性蛋白復合酶作為大棗多糖的提取劑。

2.2 中性蛋白復合酶最佳提取條件正交實驗稱取烘干棗粉20 g共9份，按正交設計表條件進行提取，提取液濃縮1∶3，體積分數(shù)80%醇沉，低溫滅酶后，二次單純采用去離子水提取2h，得多糖用無水乙醇、丙酮、乙醚依次洗滌，真空干燥。利用正交實驗對酶添加量、pH、溫度等因素進行考察。實驗因素水平見表2，最佳提取條件正交實驗結果見表3。由極差結果得，3個因素對大棗多糖中性蛋白復合酶法提取的影響順序為：B＞C＞A，由實驗結果確立主要影響因素參數(shù)為B3C2A3，即最佳提取條件為：中性蛋白酶對底物質量濃度0.15%，加酶溫度37℃，反應pH值7.5。

表2 正交實驗因素水平（略）

表3 中性蛋白復合酶最佳提取條件正交實驗結果（略）

2.3 大棗多糖的藥理實驗取實驗最佳工藝所得大棗多糖，經精制沉淀后，用于以下藥理實驗。

2.3.1 大棗多糖急性毒性實驗取ICR品系小鼠40只，雌雄各半，分為兩大組；A組20只，B組20只，給予B組灌胃大棗多糖（藥物以生理鹽水稀釋，最大質量濃度45% ）。每20 g體重灌胃0.4 ml，每隔4 h重復1次，共3次，觀察動物死亡數(shù)和死亡時間。給與A組灌胃等劑量生理鹽水。結果未見動物死亡，亦未見動物有其他反應。表明動物最大耐受量在27.0 g·kg-1以上，相當于原生藥675 g·kg-1，屬無毒級。

2.3.2 大棗多糖對S180實體瘤小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響取ICR品系小鼠50只。將接種7 d的S180實體瘤腹水型小鼠，消毒腹部皮膚，斷頭處死，抽取腹水，稀釋3倍后，接種于各小鼠左側腋下，皮下接種，每只0.2 ml。接種后第2天，稱重 ，按體重分層隨即將小鼠分為A，B，C，D，E 5組，A組為S180實體瘤對照組，B，C，D組分別為大、中、小劑量大棗多糖組，E組為環(huán)磷酰胺組。分組后開始給藥，A組以生理鹽水灌胃，B，C，D組分別按劑量為675，225和75 mg·kg-1的大棗多糖藥液灌胃；E組灌胃劑量為每只0.6 mg（30 mg·kg-1）。以上各組均連續(xù)用藥7 d。

于第7天前72 h腹腔注射0.5%無菌淀粉鹽水0.1 ml/只，于第7天再注射淀粉溶液1次，1 h后腹腔注射0.5%雞紅細胞0.1 ml/只，6 h后脫臼處死小鼠，取腹腔液涂片染色鏡檢。油鏡下計數(shù)200個巨噬細胞，觀察吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)目。結果以吞噬率表示。結果見表4。

表4 大棗多糖對S180實體瘤小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響（略）

結果表明，大棗多糖大、中、小劑量對S180小鼠巨噬細胞吞噬率均有不同程度的提高作用，其中大、中劑量組有顯著作用，有效劑量為225 mg·kg-1，小劑量組提高不明顯。

3 討論

純酶自身成本較高，酶的介入會直接增加大棗多糖提取的成本費用，而這種復合粗酶使用成本較低，其中還含有少量的纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、淀粉酶、這些酶相互之間可以產生協(xié)同作用，無疑對大棗多糖的提取十分有利。其中的主要成分中性蛋白酶主要可以使糖蛋白和蛋白聚糖中游離的蛋白質水解掉，那么，原有的除蛋白工藝步驟可以省略，進而簡化了提取工藝，同時也可以達到一個較好的提取效果。

【參考文獻】

［1］ 中國醫(yī)學院藥物研究所.中藥志，第3冊［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1993:135.

［2］ 李淑子，張 本.大棗的化學和藥理研究概況［J］.中草藥，1983，14（10）：39.

［3］ 冉 靚，楊曉聲，王伯初，等.抗氧化多糖的研究進展［J］.時珍國醫(yī)國藥，2006，17（4）:494.

［4］ 王 健，龔興國.多糖的抗腫瘤及免疫調節(jié)研究進展［J］.中國生化藥物雜志，2001，22（1）:52.

蛋白酶體范文第4篇

炎癥是機體最常見的一種病理狀態(tài)。因此科研工作者們相繼從轉錄及轉錄后水平開展了大量炎癥狀態(tài)對CYP450的調節(jié)研究。20世紀80年代以來，美國Emory大學EdwardT.Morgan教授和他的科研團隊致力于研究感染和炎癥反應對CYP450的影響。其研究結果顯示，感染和炎癥條件下，人、大鼠和小鼠肝臟、腎臟和腦組織的細胞色素P450酶表達和活性改變顯著。例如給小鼠腹腔注射脂多糖（LPS），LPS能夠通過細胞的表面受體激活巨噬細胞，分泌大量促炎性細胞因子，繼而對多種CYP450亞型呈現(xiàn)抑制作用。給大鼠分別腹腔注射IL-6和TNFγ后，CYP2C11、CYP2E1和CYP3A2的mRNA表達均下降。分別以人原代肝細胞和大鼠原代肝細胞等為實驗對象，用促炎性細胞因子IL-1β和IL-6、TNFα和細胞進行共孵育，發(fā)現(xiàn)1A2、2A5、2B1、2B6、2B9、2B10、2C11、2C29、2E1、3A2、3A4、3A11和4A10等CYP的蛋白表達量或活性都顯著降低，其中尤以對CYP2B6的影響非常顯著，提示炎癥能使經CYP2B6途徑藥物如環(huán)磷酰胺、依法韋侖和安非他酮等的體內代謝率顯著下降，消除半衰期延長，導致體內藥物蓄積而發(fā)生嚴重不良反應[15-19]。

2炎癥狀態(tài)對CYP2B6活性影響的機制研究

研究者對炎癥狀態(tài)下CYP450活性改變的機制也進行了一系列研究，以往的研究更多地關注炎性細胞因子對CYP450的mRNA表達等轉錄水平的影響，后來大量實驗結果證實，炎性細胞因子在對CYP450mRNA表達無影響的情況下，依然可以降低肝藥酶活性，提示轉錄后修飾在此過程中也扮演了重要的角色。

2.1NO在炎癥狀態(tài)對CYP2B6活性改變中的作用

NOS包括神經元型一氧化氮合酶（nNOS）、內皮型一氧化氮合酶（eNOS）以及誘導型一氧化氮合酶（iNOS）三種亞型，感染和炎癥主要增加iNOS的表達。CYP2B6在大鼠肝細胞主要以CYP2B1形式存在，與人肝細胞CYP2B6的基因有76%的相似。筆者近年來系統(tǒng)研究了炎性細胞因子IL-1β對大鼠CYP2B1的下調作用及其機制。實驗結果證實，IL-1β與大鼠原代肝細胞共孵育，可顯著誘導iNOS的蛋白表達，增加NO的生成，并進而使CYP2B1蛋白質半胱氨酸的巰基亞硝基化，易于被泛素-蛋白酶體識別而快速降解[21-22]，提示NO和泛素-蛋白酶體系統(tǒng)在炎癥對CYP2B6的影響中起到了至關重要的作用，從轉錄后蛋白降解的水平闡述了IL-1β抑制CYP2B1的機制。

2.2蛋白質修飾在炎癥狀態(tài)對CYP2B6活性改變中的作用

1992年，Stamler等[23]發(fā)現(xiàn)NO和活性氮（RNS）可以作用于蛋白質半胱氨酸的巰基（Cys-SH），生成S-亞硝基化基團（Cys-SNO），引起蛋白質的活性與功能的改變，并首次提出了蛋白質巰基的S-亞硝基化修飾概念[24]。Minamiyama等[25]研究發(fā)現(xiàn)，使用NO供體NOC7或過氧化亞硝酸鹽（ONOO-）和肝微粒體共孵育，可以引起CYP450活性降低及游離巰基的減少。Roberts等[26]也發(fā)現(xiàn)IL-1可以使腎小球膜細胞中產生ONOO-，繼而使CYP8A1和CYP2B1的活性下降，研究者猜測是由于ONOO-使CYP8A1和CYP2B1酪氨酸殘基硝基化，降低了酶的催化活性。要深入闡明NO對蛋白質的亞硝基化修飾作用，需要有高靈敏度和特異性的檢測方法。2001年，美國藥理學家Jaffrey和Snyder等[27]建立了一種生物素轉化的方法（Biotinswitch）來進行S-亞硝基化蛋白的檢測。該方法經過不斷的改進和完善，目前已得到國際公認[28]。Benhar等[29]成功利用該方法測定了人淋巴細胞中半胱天冬酶-3蛋白的亞硝基化修飾，并發(fā)現(xiàn)細胞質和線粒體中的硫氧還蛋白（thioredoxins，Trx）能夠降低去亞硝基化的過程。除了亞硝基化外，NO和RNS還可以對半胱氨酸的巰基進行次磺酸化（Cys-SOH）等氧化修飾。研究顯示，RNS可以使酪氨酸羥化酶的半胱氨酸次磺酸化，導致酶的活性下降[30]。GSNO能夠對組織蛋白酶K的半胱氨酸進行次磺酸化修飾而改變酶的活性[31]。2008年，美國密歇根大學Reddie教授等[32]利用新合成的特異性探針化合物DAz-1，建立了一種新的次磺酸化蛋白檢測方法，為研究蛋白質的氧化修飾機制開辟了廣闊的前景。2008年，Lee等[33]用NO供體GNSO與大鼠肝微粒體體外共孵育，采用Biotinswitch法檢測到經S-亞硝基化修飾的CYP2B1，并發(fā)現(xiàn)泛素化CYP2B1蛋白明顯增加，表明NO能夠對CYP2B1蛋白進行亞硝基化修飾，并促進其和泛素連接；實驗還發(fā)現(xiàn)另一NO供體NOC18和HeLa細胞共孵育，能夠引起CYP2B1蛋白量下降，蛋白酶體（proteasome）抑制劑MG132可以明顯抑制這一過程，但溶酶體酶抑制劑和Ca2+依賴性蛋白酶抑制劑對CYP2B1蛋白的降解無影響，說明NO作用下CYP2B1的降解通過泛素-蛋白酶體途徑進行。

2.3泛素-蛋白酶體通路在炎癥狀態(tài)對CYP2B6活性改變中的作用

泛素-蛋白酶體通路（Ub-proteasomesystem，UPS）是除溶酶體途徑、Ca2+依賴性蛋白酶途徑之外的另一種細胞內蛋白質選擇性降解的重要途徑，這一發(fā)現(xiàn)獲得了2004年諾貝爾化學獎。該通路由泛素、蛋白酶體以及一系列相關的泛素激活酶E1、泛素結合酶E2和泛素連接酶E3組成[34]。泛素是一種小分子球蛋白，能作為“標簽”結合到其他蛋白質上，蛋白質被亞硝基化或者次磺酸化修飾后易被泛素連接酶E3識別，使之成為蛋白酶體水解的底物。蛋白酶體是具有多亞基和多相催化活性的蛋白酶復合體，是催化泛素與底物蛋白偶聯(lián)體降解的關鍵酶，調節(jié)著細胞內蛋白的水平和功能[35]。筆者近年研究發(fā)現(xiàn)，單純使用外源性NO供體藥物NOC18同樣可以使大鼠原代肝細胞CYP2B1蛋白表達量下降，但降解過程比IL-1所致的CYP2B1蛋白量下降緩慢。有文獻報道IL-1可以誘導燒傷大鼠趾長伸肌中免疫蛋白酶體的蛋白水解活性和表達[36]。由此我們推測，IL-1可能通過直接增強大鼠原代肝細胞蛋白酶體的活性或表達，加速了CYP2B1的蛋白降解。最近，我們利用特異性熒光多肽底物初步測定了IL-1對大鼠原代肝細胞蛋白酶體活性的影響，實驗結果顯示，IL-1能提高蛋白酶體的糜蛋白樣（chymotrypsin-like，CT-L）活性。另外，IL-1能夠誘導蛋白酶體重要的蛋白水解亞單位LMP2的表達，從而從蛋白酶體途徑揭示了炎性細胞因子降低CYP2B1活性的機制[20]。

3展望

蛋白酶體范文第5篇

wwpgg的異構體在轉錄后水平還特別受到一些化合物的調節(jié)。這些化合物可以誘導wwpgg的降解，增加死亡受體介導的細胞凋亡的敏感性。wwpgg異構體是半衰期比較短的蛋白質，蛋白質或RNA合成抑制劑可降低它們的表達水平。wwpgg異構體的表達還受熱激效應、E3泛素連接酶Itch激活的JNK通路以及泛素蛋白酶體途徑所調節(jié)，這些調節(jié)是磷酸化依賴的或者非依賴的方式。wwpgg通過蛋白酶體降解途徑比較復雜，可能因為wwpgg異構體不同的調節(jié)機制以及wwpgg異構體不同的轉錄后修飾。wwpggS對泛素化降解更敏感，可能由于其獨特的C-末端尾巴。E3-泛素連接酶Itch是由JNK調控的，它可以使wwpgg結合上泛素化鏈而通過蛋白酶體途徑進行降解。在FasL介導的細胞凋亡過程中，ROS也是通過蛋白酶體誘導wwpgg下調。NF-κB可通過抑制細胞中的ROS水平而抑制JNK活性，導致Itch連接酶活性的降低，從而穩(wěn)定細胞中wwpgg的表達水平。wwpggL能被Itch泛素化，但wwpggL的泛素化并不需要CUL3，它也是一個E3連接酶，可以介導Caspase-8的泛素化?，F(xiàn)已證明Itch是wwpggS的泛素化的關鍵調節(jié)者。wwpggL和wwpggS也可以不依賴于JNK的方式進行降解。wwpgg的蛋白水平也受磷酸化的重要調節(jié)。wwpggS的Ser193磷酸化可以抑制它的泛素化，從而穩(wěn)定wwpggS在細胞中的表達水平而促進細胞的存活。wwpggL的Ser273可以被Akt以一種JNK和Itch依賴的方式磷酸化，這對于降低wwpgg的水平是非常重要的。相反，Akt能促進E3連接酶Itch的多泛素化和降解，從而穩(wěn)定wwpggs的表達。在老鼠巨噬細胞中，蛋白激酶p38和c-Cbl可以使wwpggs特定氨基酸殘基磷酸化，促進wwpggs和E3連接酶c-Cbl之間的相互作用。

2靶向wwpgg的癌癥治療

wwpgg的過表達可拮抗FasL和TRAIL的細胞，而抑制wwpgg可以克服這種抗性。因此靶向wwpgg，特別是與TRAIL或者傳統(tǒng)化療聯(lián)合處理，可能是癌癥治療的有效方法。新陳代謝抑制劑，如蛋白質合成抑制劑cyclo-heximide、anisomycin和RNA合成抑制劑actinomycinD最初用來研究抑制wwpgg表達的分子機制。研究顯示這幾種化合物能夠下調wwpgg。用5-FU進行化療也能夠下調結腸癌細胞系中wwpggS和wwpggL的表達水平。蛋白酶體抑制劑在許多不同的細胞系中被廣泛研究，作用效果依賴于所研究的細胞系。在不同腫瘤細胞中，用Bortezomib或者小分子蛋白酶體抑制劑MG132處理之后可以增加或者降低wwpgg的表達水平，但Bortezomib和MG132都可以增加TRAIL誘導的細胞凋亡敏感性。DNA損傷試劑可以降低腫瘤細胞中wwpgg的表達水平，然而這種表達水平在不同類型的細胞中是不同的。一些化療藥物可使wwpgg表達水平升高，相反另外一些化療試劑可以降低wwpgg表達水平。在卵巢癌細胞系中，Cisplatin可以使wwpgg以p53依賴的方式進行泛素化降解，主要是與p53、Itch形成一個三元復合體。三元復合體所導致的wwpggL/S的泛素化是由Akt信號通路控制的。在p53野生型結腸癌HCT116細胞中，oxaliplatin和CPT11都可以誘導wwpggS/L的表達下調;而在p53突變的HT29細胞中，oxliplatin和CPT11誘導wwpgg表達下調，并且藥物處理之后的細胞對TRAIL誘導的細胞凋亡更加敏感，表明細胞凋亡與p53的狀態(tài)沒有關系。在黑素瘤中Cisplatin能下調wwpggs的表達，但不是wwpggL;Cisplatin處理后，wwpggL脫磷酸化。在膠質瘤中wwpggL被CaMKII磷酸化之后可以促進wwpggL的在DISC中的募集而抑制Caspase-8結合，因此推斷wwpgg的脫磷酸化會減弱它的抑制活性而促進細胞凋亡。組蛋白脫乙?；敢种苿┖屯負洚悩嬅涪褚种苿┦切碌陌┌Y治療藥物，能夠調節(jié)wwpgg的表達水平。TSA處理可以降低卵巢癌細胞中wwpgg的mRNA和蛋白質表達水平，但并不影響wwpggs的表達水平。EGFR信號通路抑制劑可以阻抑TSA對wwpggL的調節(jié)。在肝癌細胞系中，ITF2357和丙戊酸可以降低wwpgg的mRNA和蛋白質水平，但是研究并沒有區(qū)分不同的異構體。另外，通過RNAi干擾直接抑制wwpgg的翻譯可能是下調wwpgg的最專一的方法。但是在這些研究中，損傷或者修飾DNA的試劑靶向wwpgg可能會有一定困難，因為作用于wwpgg的效果在細胞類型之間是不同的，可能會影響兩種或者一種wwpgg異構體。盡管在體外研究中，用RNAi干擾直接靶向wwpgg可以增加細胞對TRATL或者FasL誘導的凋亡更加敏感，然而在體內使用RNAi干擾技術有許多限制，因此在臨床上抗用RNAi干擾方法靶向wwpgg可能還需要一段時間。

3展望